Protocolo de Investigación
Evaluación de la actividad Matcha para prevención de arritmias cardiacas por inhalación de
ROFA’s
Cabrera Sánchez Areli, Santiago Molina Erik David,
Servín Valadez, Rivera Perea Higo Josué, García Kunz Susana.
Resumen.
Introducción.
Té matcha
Té verde con origen en Asia, muy popular en Japón
debido a que tiene propiedades que le confieren la
capacidad de reducir el estrés, es hipoglucemiante (no
eleva los niveles de insulina ni la presión arterial),
hipolipemiante e hipocolesterolemiante, estimula las
defensas y ayuda a combatir el cáncer. Se obtiene de
las hojas del té verde, las cuales son machacadas hasta
obtener un polvo fino de color verde, lo que multiplica
el valor nutricional y el contenido de antioxidantes en
comparación con otros tipos de té.
Figure 1 Matcha
Componentes
El matcha contiene L-teanina, un aminoácido que se
encuentra en las hojas del té verde, y tiene la función
de promover la producción de ondas alfa en el cerebro
y mejorar el enfoque mental, la creatividad, memoria
y concentración; así como disminuir la presión arterial
alta, regular la función cerebral y nerviosa y prevenir e
Alzheimer. La L-teanina también tiene la función de
relajar la mente sin causar somnolencia.
Figure 2 Molécula de la teanina
También contiene cafeína, un estimulante causante
de la amargura del té, aunque en exceso puede causar
diarrea, vómito, náuseas y dolor de cabeza. Pero su
potencia en el té es contrarrestada por la L-teanina. El
matcha posee aproximadamente la mitad de cafeína
que el café. En el matcha, la cafeína se absorbe y se
asimila lentamente, sin aumentar el azúcar en la
sangre, la insulina, ni liberación de la hormona del
estrés cortisol; como ocurre con la cafeína en el café.
Figure 3 Molécula de la cafeína
Tiene mucha fibra que se absorbe fácilmente, lo que
ayuda a aliviar el estreñimiento y regular los niveles de
azúcar y colesterol en la sangre.
Posee importantes nutrientes como Vitamina C que
ayuda a mantener el cutis, así como contrarrestar los
efectos nocivos del alcohol y la nicotina. También
contiene potasio, que ayuda a controlar la presión
arterial alta y mejorar la función muscular. Y, por
supuesto, es muy rico en clorofila, lo que beneficia la
eliminación de toxinas en el cuerpo.
Posee taninos que son la principal fuente de
astringencia en el té. Se ha demostrado que las
catequinas combaten las bacterias y reducen el
colesterol.
Figure 4 Taninos
Efecto antioxidante
El matcha tiene efectos benéficos antioxidantes sobre
la salud, lo que previene el envejecimiento y las
enfermedades crónicas. Las catequinas son el
antioxidante por excelencia en el matcha y son
conocidas por sus efectos en la quema de grasas,
prevención de artritis, y combate contra el cáncer.
Además, se ha demostrado su efecto antibiótico y
fortalecimiento en general del sistema inmunológico.
El tipo de catequina presente en el té verde es el
Galato de epigalocatequina (EGCG), es un compuesto
químico natural conocido como polifenol con
poderoso efecto antioxidante y beneficios para la
salud, como mayor metabolismo y resistencia física. Su
efecto antioxidante se basa en la limpieza de radicales
libres y toxinas del cuerpo, lo que provoca la
disminución de peso, el riesgo a enfermedades
crónicas y cáncer.
Mecanismo antioxidante de los flavonoides
El estrés oxidativo se caracteriza por un aumento en
los niveles de especies reactivas de oxígeno y de
nitrógeno (ROS/RNS), que no alcanza a ser
compensado por los sistemas de defensa
antioxidantes que resulta en la disfunción y la muerte
celular.
Un estado de estrés oxidativo, causa en la célula
efectos tóxicos por oxidación de lípidos, proteínas,
carbohidratos y nucleótidos, lo cual produce
acumulación de agregados intracelulares, disfunción
mitocondrial, excitotoxicidad y apoptosis.
La oxidación de lípidos está asociada con la disfunción
neuronal, debido a que la composición lipídica de su
membrana presenta un alto contenido de ácidos
grasos poliinsaturados con respecto al resto de las
células del cuerpo humano. La peroxidación de ácidos
grasos poliinsaturados en las membranas celulares,
inicia un deterioro acumulativo de las funciones,
disminución en la fluidez, reducción en el potencial
electroquímico y el aumento de la permeabilidad de la
membrana para diferentes iones, entre los que
destaca el Ca2+.
El aumento en la concentración de Ca2+ intracelular
por periodos prolongados de tiempo activa proteasas,
lipasas, endonucleasas y, además activa a la sintasa de
óxido nítrico neuronal (nNOS), responsable de
sintetizar al NO, el cual es una molécula importante en
el progreso del estrés oxidativo que causa
degeneración neuronal.

Se ha mostrado que la administración oral de

epicatequina previene la formación de

ROS y la peroxidación de lípidos provocados por la

inyección del Aβ25-35 (secuencia de aminoácidos que
posee efectos tóxicos del péptido Aβ) en el hipocampo
de ratas macho.
Figura 1. Mecanismo antioxidante y antiinflamatorio
de los flavonoides en el SNC (Limón, 2010)

Así mismo se indica que el consumo de té verde, rico

en (-)-epigalocatequina-3-galato (EGCG) atenúa la
toxicidad inducida por la 6-OHDA. Se ha demostrado
que estos compuestos polifenólicos también pueden
disminuir otros marcadores específicos de estrés
oxidativo como los isoprotanos, 4-HNE y la 8-
desoxiguanosina, además de quelar iones metálicos
transitorios, tales como el Fe2+, Cu2+, Zn2+, catalizar
el transporte de electrones, y depurar radicales libres
inducidos por diversas neurotoxinas inyectadas en el
SNC.
Se ha observado que los flavonoides pueden bloquear
el estrés oxidativo inducido por el daño neuronal, así
como la activación de la caspasa-3. Así, la
epicatequina protege a las neuronas del daño
oxidativo a través de un mecanismo que implica la
inhibición pro-caspasa-3. Flavonas, como la
hesperetina y su metabolito, 5-nitro hesperetina,
inhiben la apoptosis neuronal por medio un
mecanismo de fosforilación que activa vías de
supervivencia.
ROFAS
El ROFA es una mezcla compleja de metales, sulfatos,
ácidos, contaminantes del combustible y otros
componentes desconocidos combinados con un
núcleo de carbono en partículas insoluble.
La exposición ocupacional a ROFA se ha asociado con
efectos adversos para la salud respiratoria en
humanos, de igual manera, los estudios en animales
han demostrado que la inhalación de partículas de
ROFA y del aire fresco, aumenta la sensibilidad a
contraer alguna infección.
Varios estudios han demostrado que la ROFA
disminuye la actividad bactericida de los macrófagos
alveolares, esto debido a que la biodisponibilidad de
los metales en transición solubles en ROFA pueden ser
un factor potencial de lesión pulmonar ya que estas
inducen la pérdida de proteínas y aumentan la
afluencia de neutrófilos y macrófagos hacia los
pulmones.

El ROFA induce una variedad de respuestas

respiratorias in vivo e in vitro, que incluyen:
alteraciones en la activación del factor de
transcripción, aumento de la hiperreactividad de las
vías respiratorias, aumento de la secreción de mucina,
aumento del estrés oxidativo, expresión alterada de
citoquinas y expresión génica alterada. (Roberts, Jenny. Taylor,
Michael. Castranova, Vincent. Clarke, Robert. Antonini, James. (2003))
Vía endotraqueal
Esta vía de administración es utilizada en casos donde
no se dispone de alguna vía venosa utilizando como
canal el tubo endotraqueal. En este tipo de casos las
dosis administradas serán al doble o triple,
dependiendo de las dosis recomendadas por vía
venosa. (Remedios, Paco. (2009))
Se deberá diluir en suero fisiológico, acompañado de 5
fluctuaciones seguidas y de manera rápida con el
balón resucitador, esto con el fin de facilitar la entrada
del fármaco a la vía aérea.
Esta vía de administración puede provocar efectos
adversos sobre la presión parcial de oxígeno. (Remedios,
Paco. (2009))
Radio telemetría
La telemetría es una transmisión a distancia de
información utilizando ondas electromagnéticas, que
viajan a través del agua o aire.
La radio telemetría en animales es básicamente la
transmisión de información mediante un transmisor
colocado en animales a un receptor. Gracias a la radio
telemetría es posible conocer información acerca de
animales que son un poco difíciles de estudiar, por
ejemplo, su movimiento, uso de hábitat,
sobrevivencia, etc. Ha demostrado ser una técnica
valiosa para aprender más acerca de la conducta y la
historia de un gran número de especies.
Esta técnica resulta especialmente útil en el campo de
la farmacología, la toxicología y la fisiología. En los
últimos años se han desarrollado sensores
implantables de tamaño muy pequeño, que se alojan
en el organismo y que interfieren mínimamente en la
fisiología y el comportamiento normales del animal
estudiado. Cada sensor es capaz de registrar una o
más variables. En el caso que nos ocupa se puede
registrar la actividad, el electrocardiograma, la
frecuencia cardiaca y la temperatura. Las señales
emitidas pueden ser captadas por un equipo receptor
alojado de forma permanente a poca distancia del
animal
Toxicidad del té verde
Se han realizado múltiples ensayos clínicos con
pacientes voluntarios y estos han permitido dilucidar
en cierto grado la absorción de las catequinas del té
verde. En uno de estos, Yang y colaboradores (Yang,
1998) suministraron diferentes dosis de catequinas a
18 voluntarios. Las dosis eran de 282, 564 y 846 mg de
las tres principales catequinas del té verde (EGCG
(galato de epigalotocatequina), EGC (catequina
epigalato), CE (epicatequina) respectivamente). En
plasma, aproximadamente a las 1,5 h y 2,5 h se
detectaron los máximos niveles de catequinas,
indicando que tienen una buena absorción vía oral; a
las 24 h no se detectaron más niveles de estas
sustancias. La concentración máxima medida en
plasma fue para EGCG 321 ng/ml, para EGC 550 ng/ml
y para CE fue de 190 ng/ml. La catequina con vida
media más larga fue la EGCG con 5 h, siendo esta la
catequina que se ha encontrado más involucrada en
los procesos de daño hepático.
En el caso específico del matcha, éste contiene un
aminoácido llamado L-teanina, que, aunque no se
encuentra reportado es posible que ayude a disminuir
los niveles de toxicidad ocasionados por las catequinas
presentes.
OBJETIVOS
General
- Evaluar la actividad de las catequinas
presentes en el matcha sobre arritmias
cardiacas.
Específicos
- Conocer el mecanismo biológico de las catequinas.
- Diseñar un modelo experimental para inducir
arritmias cardiacas mediante la exposición a ROFA’s en
ratones.
- Determinar los efectos benéficos de las catequinas
sobre las arritmias cardiacas producidas por
hipertensión pulmonar.
HIPÓTESIS
Si se les induce una hipertensión pulmonar a ratas,
con un consumo regular de Matcha, se esperaría no
observar una arritmia cardiaca y evitar esa misma
hipertensión pulmonar por el efecto antioxidante de
los componentes del Matcha.

Metodología
 Ratas
Se utilizaran 35 ratas macho Sprague-Dawley,
previamente compradas (con protocolo de justificación)
estas deben tener 60 días de vida de acuerdo a un
estudio previo realizado (Watkinson et al., 1995) en las
condiciones de temperatura, humedad y alimentación
estándar para este tipo de ratas.
Se estudiaron a los animales 90 días en un rango de
peso de 315-415 g.
 Partículas de ROFA
Obtener muestras de ROFA´s de chimeneas eléctricas
para una posterior exposición de las ratas.
 Tratamiento previo
Para esta metodología se debe usar una radiotelemetría
que permite monitorear y obtener información de una
continua electrocardiografía, temperatura y señales de
multiples animales.
Todas las ondas del electrocardiograma deben estar a la
vista por toda la duración del experimento.
Estos deben ser medidos antes y después de la
administración de las ROFA’s.
 Preparación exoerimental
Los animales previamente pesados deben ser
anestesiados con pentobarbital de sodio, para uns
implantación de el transmisor de radiotelemetría Este
debe ser implantado en la cavidad abdominal, mientras
que los electrodos y los cables se canalizan por vía
cutánea.
Se deben dar 10 días de reposo para la recuperación de
los animales.
 Procedimiento experimental
Los animales son divididos en 5 grupos:
1. Control: Administración de ROFA’s
2. Consumo regular de Matcha
3. Consumo regular de Matcha y con administración de
ROFA´s a una concentración de 0.25mg suspendidos en
0.3 mL de solución salina
19.Feb.2019
4. Consumo regular de Matcha y con administración de
ROFA´s a una concentración de 1.0mg suspendidos en
0.3mL de solución salina
5. Consumo regular de Matcha y con administración de
ROFA´s a una concentración de 2.5mg suspendidos en
0.3mL de solución salina.
Los animales 10 días posteriores a la operación fueron
anestesiados con halotano (anestesia general) e
intubados con un tubo traqueal, administrando a cada
grupo la dosis correspondiente. Los animales deben ser
monitoreados por 10 días en los cuales se debe
observar un aumento en la velocidad de onda cardiaca.
REFERENCIAS
1. Roberts, Jenny. Taylor, Michael. Castranova,
Vincent. Clarke, Robert. Antonini, James. (2003).
SOLUBLE METALS ASSOCIATED WITH RESIDUAL
OIL FLY ASH INCREASE MORBIDITY AND LUNG
INJURY AFTER BACTERIAL INFECTION IN RATS.
18/02/2019. Recuperado de:
http://citeseerx.ist.psu.edu/viewdoc/download
?doi=10.1.1.519.5872&rep=rep1&type=pdf
2. Remedios, Paco. (2009). Fármacos en
situaciones críticas. 18/02/2019. Recuperado
de:
https://www.auladae.com/pdf/cursos/capitulo/
cuidados_criticos_ec.pdf
3. Bisogno, V. (2017). Té matcha: qué es,
propiedades, beneficios, y cómo se usa.
Consultado el 18/02/19. Recuperado de:
https://www.elclubdelte.com/te-matcha-
propiedades-beneficios-se-usa/
4. Esteban, J. (2019). ¿Qué son las catequinas del
té y que propiedades tienen para la salud? .
Consultado el: 18/02/19. Recuperado de:
http://te.innatia.com/c-propiedades-del-te/a-
que-son-las-catequinas-del-te-y-que-
propiedades-tienen-para-la-salud-2422.html
5. William P. Watkinson,*,2 Matthew J. Campen,†
and Daniel L. Costa*. (November 17, 1997).
Cardiac Arrhythmia Induction after Exposure to
Residual Oil Fly Ash Particles in a Rodent Model
of Pulmonary Hypertension. TOXICOLOGICAL
SCIENCES, 41, 209–216.
19.Feb.2019