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I.

INTRODUCCION
La pérdida de cantidades grandes de sangre conduce, en poco tiempo,
a la muerte. Por ello no es de extrañar que, ya desde antiguo, se haya
intentado reemplazar la sangre perdida por medio de inyecciones de
sangre procedente de otras personas e incluso de animales. Sin
embargo, la transfusión indiscriminada de sangre ocasionaba, a veces,
efectos fatales para el enfermo que la recibía. Así cuando fueron
intentadas las primeras transfusiones de sangre, se producía a
menudo la aglutinación inmediata o retrasada y la hemólisis de los
glóbulos rojos, causando reacciones de transfusión que, con
frecuencia, conducían a la muerte. Pronto se descubrió que las sangres
de personas diferentes tienen diferentes antígenos, de modo que los
anticuerpos en el plasma de una sangre reaccionan con antigenos
sobre las superficies de las células rojas. Se han encontrado al menos
unos 30 antígenos comunes y cientos de otros, menos frecuentes, en
las membranas de las células sanguíneas. La mayor parte son débiles,
y no dan lugar a reacciones de transfusión, utilizándose para
determinar relaciones de parentesco. Las clasificaciones más
importantes para describir grupos sanguíneos en humanos son por los
antígenos del sistema ABO y del factor Rh.

II. MARCO TEORICO


a. Sistema ABO: propuesto por Landsteiner y colaboradores, los
cuales comprobaron que la sangre de todo individuo pertenece a uno
de cuatro tipos diferentes, que se distinguen uno de otros según el
resultado de una reacción de aglutinación. Plantearon la existencia de
cuatro fenotipos ABO principales conocidos como grupos O, A, B y AB;
en donde los individuos del grupo A poseen el antígeno A (Anti – A) en
sus hematíes, los del grupo B el antígeno B (Anti-B), los del grupo AB
presentan ambos antígenos y los del grupo O carecen de ambos. El
patrón de herencia de estos grupos sanguíneos, corresponde a la
interacción de alelos múltiples en los cuales el gen O es recesivo frente
a los codominantes A y B.

b. Sistema Rh: Estos grupos tienen un interés clínico similar a los


grupos ABO, dada su relación con la enfermedad hemolítica del recién
nacido y su importancia en la transfusión. El sistema Rh es
genéticamente complejo, pero a manera de introducción se puede
describir en términos de un único par de alelos D y d; donde las
personas Rh (+) son DD o Dd y las Rh (-) son dd.
Durante esta práctica los estudiantes podrán determinar sus grupos
sanguíneos, empleando los sistemas ABO y Rh.

Reacciones antigeno- anticuerpo


Las reacciones de aglutinación y de precipitación son la base de la
mayor parte de las técnicas inmunológicas. Su principio se basa en la
reacción antígeno-anticuerpo.
Para comprender lo anterior es necesario definir qué es un
antígeno y un anticuerpo.
Antígeno es una sustancia de alto peso molecular,con cierta rigidez
estructural y que tiene la particularidadde ser parcialmente
“metabolizado” por células especializadas llamadas macrófagos, por lo
tanto escapaz de generar una respuesta inmune en un organismoque
la detecte como un agente extraño. Mientras que un anticuerpo es una
glicoproteína, producida por linfocitos B activados, llamados células
plasmáticas, como respuesta a la presencia de un antígeno en el
organismo, a su vez los anticuerpos pueden ser producidos por líneas
celulares in vitro, como es el caso de la producción de anticuerpos
monoclonales. Dichos anticuerpos llamados también
inmunoglobulinas, se presentan en cinco clases principales, IgG, IgM,
IgA, IgD e IgE, que se diferencian
entre sí por sus características físicas, químicas y
biológicas.
La capacidad inmunogénica de distintas partículas,es en orden
decreciente la siguiente: proteínas,glicoproteínas, polisacáridos,
lípidos y azúcares.
Las reacciones de precipitación son medibles en cantidad y son fáciles
de ejecutar. Las técnicas de aglutinación son sólo semicuantitativas y
algo más difíciles. La aglutinación de los antígenos nativos insolubles o
de las partículas recubiertas por el antígeno puede evaluarse a simple
vista con o sin la ayuda del microscopio. Entre las ventajas de las
reacciones de aglutinación están su alto grado de sensibilidad y la
enorme variedad de substancias identificables a través del uso de
partículas que están recubiertas por antígeno o por anticuerpo.
Según Coombs existen 3 requerimientos principales en las pruebas de
aglutinación:
1. Disponibilidad de una suspensión estable de células
o de partículas.
2. Presencia de uno o más antígenos cercanos a la
superficie.
3. Conocimiento de que los anticuerpos "incompletos"
o no aglutinables no son localizables sin modificación
(reacciones antiglobulina)

La incompatibilidad sanguínea, es un ejemplo de reacción inmunitaria,


y da lugar a una serie de reacciones, que son el resultado de la
interacción de antígenos de la membrana de los hematíes con
macromoléculas presentes en el plasma del sujeto receptor.En una
reacción de aglutinación ("agrupamiento") y posterior hemólisis
("rotura"), interviene un aglutinógeno presente en los eritrocitos del
donante y una aglutinina específica presente en el plasma del
receptor. Evidentemente, ninguna de estas combinaciones se da de
forma natural puesto que se produciría una reacción de
autoaglutinación.

La aglutinación suele ser visible en pocos minutos. Las células


aglutinadas tienen un aspecto de granos en un líquido claro. Si no hay
aglutinación el líquido sigue teniendo un aspecto rosado uniforme. Si
se administra a un paciente la sangre equivocada, la aglutinación de
los eritrocitos puede bloquear los pequeños vasos sanguíneos en
órganos vitales, como los pulmones o el cerebro. La consiguiente
hemólisis de los glóbulos aglutinados puede dar lugar a la aparición de
hemoglobina en la orina y finalmente a una insuficiencia renal y a la
muerte.
III. OBJETIVOS
Determinar el grupo sanguíneo y el factor Rh de una muestra
sanguínea, utilizando los antisueros correspondientes y previa
demostración correctamente.
IV. MATERIALES Y METODOS
Materiales
Material biológico: Gota de sangre
Material instrumental: goteros, portaobjetos con campos de
reaccion, material punzante esteril (lancetas), mondadientes,
algodón, alcohol etilico
Materiales químicos: Un kit de reactivos que contengan las
aglutininas anti A, anti B y anti D (con color azul, amarillo y
transparente respectivamente).

Métodos
A) Selección de voluntarios: El jefe de practica selecciona a un grupo
de voluntarios (cuatro alumnos) que tengan conocimiento de su
determinado grupo sanguíneo ( A,B,AB,O)

B) Montaje del material biológico (gota de sangre):


Marcar con letras A, B, y Rh, la lámina portaobjetos con
excavaciones. Limpie con alcohol embebido en alcohol la yema del
dedo anular se utiliza la punción cutánea por medio de lanceta
hematológica estéril. Apretando ligeramente el dedo, coloque tres
gotas de sangre por separado sobre la lámina portaobjetos en cada
una de las excavaciones de la placa correspondientes (A, B y Rh).
Con algodón estéril comprima la pequeña herida para impedir la
salida de más sangre.
C) Determinación de grupo sanguíneo por medio de aglutininas:
Rápidamente antes que se coagule la sangre, agregue en la
excavación No.1 una gota de suero anti – A, en la otra una gota de
suero anti – B. A la excavación No. 3, agréguele una gota de suero
anti – D. En las anteriores operaciones evite que la punta de los
goteros de los sueros toque las gotas de sangre. Mezclar
perfectamente con un mondadientes cada preparación (no
contaminar las diferentes preparaciones).
Agitar suavemente la placa con movimientos circulares durante 30
segundos aproximadamente.
Leer el resultado (una aglutinación macroscópica indicará la
reacción).

Anti A Anti B Anti D El grupo


sanguíneo y su
Factor será:
+ - + A Rh positivo
+ - - A Rh negativo
- + + B Rh positivo
- + - B Rh negativo
+ + + AB Rh positivo
+ + - AB Rh negativo
- - + O Rh positivo
- - - O Rh negativo

Tabla1. En donde (+) existencia de aglutinación / En donde (-) ausencia de


aglutinación

D) Identifique que tipo de sangre pueden recibir y donar las


personas de los grupos sanguíneos A, B, AB Y O con Rh+ y Rh-:
Teniendo en cuenta la experimentación y la teoría analice de quien
y a quien puede donar cada tipo de sangre.

E) Eritroblastosis fetal: Teniendo en cuenta lo ocurrido en el


experimento anterior, y ya habiendo investigado sobre la
eritroblastosis, júntate con tus compañeros de laboratorio y opina
sobre la Eritroblastosis fetal (causa, consecuencias y tratamiento).
V. RESULTADOS
A) MÉTODO A y B: No es necesario evidenciar resultados en este
procedimiento ya que únicamente se realizo con el fin de poder
trabajar con el material biológico requerido. El montaje de la gota de
sangre fue un éxito.

MÉTODO C:
Con el fin de practicar la forma de interpretar los resultados, se
determino a qué grupos sanguíneos pertenecen los siguientes
alumnos conociendo las reacciones obtenidas en el experimento
según la tabla 1.

PERSONA ANTI - A ANTI - B ANTI - D GRUPO SANGUÍNEO

Sofia + - + A Rh positivo
Camila - + + B Rh positivo
AGLUTINA
CION
Naomi + + + AB Rh POSITIVA
positivo
Victor - - + O Rh positivo

Sofia Naomi Camila Víctor


VI. DISCUSION DE RESULTADOS

A) METODO A Y B (no hay discusiones por ser un procedimiento con


la finalidad única de la obtención del material necesario y el montaje
para la práctica).

B) METODO C:
Dado que este sistema de antígenos no está, exclusivamente, distribuido en
las membranas de los hematíes, sino que bien al contrario, este tipo de
antígenos se encuentra en multitud de secreciones y/o células, los
contactos interespecíficos permiten que se desarrolle actividad inmunitaria
contra los antígenos que no se poseen. Ello permite que se produzca la
situación siguiente:

1. En Sofia, se determina que el grupo sanguíneo es “A” Factor Rh


positivo (+) ya que aglutina en el suero Anti A y Anti D según la
placa mostrada. La sangre del grupo A contiene el antígeno A en
sus hematíes y el anticuerpo anti-B en el plasma.

2. En Naomi, se esperaba que diera como grupo sanguíneo B Factor


Rh positivo(+) ya que así lo dijo la alumna. Sin embargo al aplicar
los reactivos se observó aglutinación en las excavaciones donde se
vertió suero Anti A, Anti B y Anti D. Según esto la alumna posee
grupo sanguíneo AB Factor Rh positivo(+) debido a que se aglutina
en el suero Anti A, Anti B y Anti D. La sangre del grupo AB tiene
hematíes con los dos tipos de antígenos A y B, pero su plasma no
contiene aglutininas.

3. En Camila, se determina que el grupo sanguíneo es “B” Factor Rh


positivo (+) ya que aglutina en los sueros Anti B, y Anti D. La sangre
del grupo B tiene el aglutinógeno B en sus hematíes y la aglutinina
anti-A en su plasma.
4. En Víctor, se determina que el grupo sanguíneo es “O” Factor Rh
positivo (+) ya que solo aglutina en el suero Anti D. La sangre del
grupo O no tiene antígenos en sus hematíes y, en consecuencia,
tiene aglutininas anti-A y anti-B.

5. La aglutinación suele ser visible en pocos minutos, aunque hay


casos donde demora más (20 min. Aprox.). Las células aglutinadas
tienen un aspecto de granos en un líquido claro. Si no hay
aglutinación el líquido sigue teniendo un aspecto rosado uniforme.

METODO D:
La incompatibilidad sanguínea se produce por la presencia de
anticuerpos o aglutininas en la sangre, que sigue la siguiente lógica:

1.Un individuo con glóbulos rojos que presentan los antígenos A en


la superficie (grupo sanguíneo A) tiene anticuerpos contra los
glóbulos rojos con antígenos B. por lo tanto, cualquier sangre que
contiene antígenos B será rechazada.
2.Un individuo con glóbulos rojos que presentan los antígenos B en
la superficie (grupo sanguíneo B) tiene anticuerpos contra los
glóbulos rojos con antígenos A. por lo tanto, cualquier sangre que
contiene antígenos A será rechazada.
3.Un individuo con glóbulos rojos que presentan antígenos A y B en
la superficie (grupo sanguíneo AB) no tiene anticuerpos contra
glóbulos rojos con antígenos B ni contra glóbulos rojos con
antígenos A. Como no hay anticuerpos, todos los grupos de sangre
pueden ser transfundidos.
4.Un individuo con glóbulos rojos que no presentan ni antígenos A
ni antígenos B en la superficie (grupo sanguíneo O) tiene
anticuerpos contra los glóbulos rojos con antígenos A y contra
glóbulos rojos con antígenos B. Por lo tanto, cualquier sangre que
contiene antígenos A o B será rechazada. Esto significa que esto
individuo solamente puede recibir sangre grupo O.
METODO E:
1.La eritroblastosis fetal se trata de una anemia hemolítica del feto
o del recién nacido, causado por transmisión transparentaría de la
madre contra la membrana fetal generalmente secundaria a una
incompatibilidad entre el grupo sanguíneo de la madre y el feto.
Cuando los glóbulos rojos fetales cruzan la placenta pueden
estimular la producción de anticuerpos maternos contra aquellos
antígenos fetales no heredados de la madre y considerandos, por
lo tanto, como extraños.

2. Toda madre Rh- que esta inmunizada al factor Rh+, debe ser
atendida durante su embarazo y parto por un medico gineco-
obstreta o con especialidad en medicina fetal. Es muy probable
que la embarazada sea expuesta a la sangre Rh positivo de su bebe
durante los 3 últimos meses del embarazo y durante el parto. Es
por esto que el médico, para evitar la sensibilidad, pedirá que se
aplique la vacuna Rhlg en la semana 28 del embarazo. Este
producto derivado de la sangre especialmente desarrollado puede
prevenir, el 95% de los casos, que los anticuerpos de la madre Rh-
reaccionen contra células Rh+. Una vez que nace el bebe y se
determina que su sangre es Rh+, deberá recibir la segunda dosis
dentro de las 72 horas después del parto.

VII. CONCLUSIONES
La variedad de grupos sanguíneos, dificulta muchas veces la donación de
órganos, pues puede producir aglutinación o hemolisis inmediata o tardía de
los hematíes con las típicas reacciones transfusionales que con frecuencia
causan la muerte.
A diferencia del sistema de grupos ABO, Factor Rh, su distribución en las
células y secreciones orgánicas está menos extendida, lo que significa que
para que en el plasma de una persona Rh negativa existan anticuerpos Rh se
hace necesario un primer contacto, que active el sistema inmunitario.
La importancia de la determinación del factor Rh es en las transfusiones
sanguíneas y en la eritroblastosis fetal.
VIII. BIBLIOGRAFIA
GUYTON, ARTHUR. TRATADO DE FISIOLOGIA MEDICA. 10 ED.
INTERAMERICAN, MEXICO, 2001
http://farmaciaulat.blogspot.com/p/grupo-sanguineo-y-factor-
rh.html
https://ocw.unican.es/mod/page/view.php?id=546
https://sites.google.com/site/amautabiologia/histologia/tejido-
sanguineo/experimentocongrupossanguineos
https://www.mdsaude.com/es/2017/04/grupos-sanguineos.html

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