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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERÍA EN ALIMENTOS


CARRERA DE INGENIERÍA BIOQUÍMICA

PROYECTO DE TRABAJO DE TITULACIÓN MODALIDAD PROYECTO DE


INVESTIGACIÓN

TEMA: “Extracción y microencapsulación de antocianinas a partir de col morada (Brassica


oleracea fo. rubra)”

LINEA DE INVESTIGACIÓN
Biotecnología

DELIMITACION DE LA INVESTIGACION
Área: BQPI17
Subárea: Agrícola
Sector: Plantas
Subsector: Metabolitos vegetales

EJECUCIÓN
Autor: Eliana Catalina Ramos Lalaleo
Tutor: PhD. Orestes López
Unidad Ejecutora: Laboratorio de Unidad Operativa de la Dirección de Investigación y
Desarrollo (UODIDE-ICIA), FCIAL, UTA.
Periodo: septiembre 2018 – febrero 2019
Lugar y Fecha de presentación: Ambato, 19 de diciembre de 2018

FINANCIAMIENTO
Costo total estimado: $720
Aporte personal: $720

.............................................
Eliana Catalina Ramos Lalaleo

i
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERÍA EN ALIMENTOS
CARRERA DE INGENIERÍA BIOQUÍMICA

Tema: “Extracción y microencapsulación de antocianinas a partir de col morada (Brassica


oleracea fo. rubra)”

Proyecto de Trabajo de Titulación, modalidad proyecto de investigación, previa la obtención del


Título de Ingeniero Bioquímico, otorgado por la Universidad Técnica de Ambato, a través de la
Facultad de Ciencia e Ingeniería en Alimentos.

Autor: Eliana Catalina Ramos Lalaleo

Ambato – Ecuador
2018

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1. TEMA DE INVESTIGACIÓN ............................................................................................. 1
2. JUSTIFICACIÓN.................................................................................................................. 1
3. OBJETIVOS ......................................................................................................................... 2
3.1. Objetivo General ........................................................................................................... 2
3.2. Objetivos específicos..................................................................................................... 2
4. FUNDAMENTACIÓN CIENTÍFICO TÉCNICA ................................................................ 3
4.1. Descripción de la planta ................................................................................................ 3
4.1.1. Brassica oleracea fo. rubra................................................................................... 3
4.1.2. Taxonomía............................................................................................................. 4
4.1.3. Compuestos fitoquímicos en (Brassica oleracea fo. rubra) ................................. 4
5. METODOLOGÍA ................................................................................................................. 5
5.1. Trabajo de campo .......................................................................................................... 5
5.1.1. Recolección de la planta ........................................................................................ 5
5.2. Trabajo de laboratorio ................................................................................................... 5
5.2.1. Preparación del material vegetal ........................................................................... 5
5.2.2. Obtención de extractos vegetales líquidos .......................................................... 65
5.2.3. Determinación de sólidos totales ......................................................................... 65
5.2.4. Análisis por espectrofotometría............................................................................. 6
5.2.5. Determinación de condiciones óptimas de extracción ........................................ 76
5.2.6. Microencapsulación ............................................................................................ 76
5.2.7. Evaluación de la actividad antioxidante .............................................................. 76
6. RECURSOS ........................................................................................................................ 98
6.1. Recursos humanos ....................................................................................................... 98
6.2. Recursos institucionales .............................................................................................. 98
6.3. Recursos materiales ..................................................................................................... 98
6.4. Recursos tecnológicos ................................................................................................... 9
6.5. Recursos económicos ................................................................................................ 109
Tabla 1. Recursos económicos .............................................................................................. 109
7. CRONOGRAMA ................................................................................................................ 10
Tabla 2. Cronograma de actividades ....................................................................................... 10
Figura 2: Cronograma de actividades ..................................................................................... 11
8. BIBLIOGRAFÍA................................................................................................................. 12

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1. TEMA DE INVESTIGACIÓN

“Extracción y microencapsulación de antocianinas a partir de col morada (Brassica oleracea fo.


rubra)”

2. JUSTIFICACIÓN

Las frutas y vegetales rojos, morados y de color azul se han utilizado tradicionalmente por sus
efectos beneficiosos; . Estas plantas poseen un color característico, debido a la presencia de
antocianinas, las cuales han sido ampliamente estudiadas por sus valores medicinales (Khoo,
Azlan, Tang, & Lim, 2017). Una de las plantas con abundante cantidad de antocianinas es el
repollo rojo o morado ( Brassica oleracea fo.rubra), Este un cultivo nativo de la región
mediterránea de Europa, que en la actualidad se cultiva como un vegetal de mercado fresco en
todo el mundo (Song, H., Yi, H., Lee, M., Han, C.-T., Lee, J., Kim, H., … Hur, Y. 2018). Las
verduras crucíferas, en particular las incluidas en el género Brassica, son una parte importante de
la dieta del ser humano, porque le. Así, proporcionan gran cantidad de nutrientes y compuestos
bioactivos (Sotelo, Cartea, Velasco, & Soengas, 2014).

La col lombarda (Brassica oleracea L; Familia-Brassicaceae) es un alimento funcional.


Comúnmente comúnmente es consumido en Asia y Europa debido a su baja composición calórica,
( Jana, S., Patel, D., Patel, S., Upadhyay, K., Thadani, J., Mandal, R., … Devkar, R. 2017), sus
vitaminas, carotenoides, azúcares solubles y componentes fenólicos (Sotelo et al., 2014). Además,
es una fuente rica de antocianinas como cianidin-3-diglucósido-5-glucósido y sus diversos
derivados acilados (Jana et al., 2017).

Por su parte, las antocianinas extraídas de plantas comestibles son ingredientes farmacéuticos
potenciales, ya que poseen efectos antidiabéticos, anticancerígenos, antiinflamatorios,
antimicrobianos y antiobesidad., Tambiénademás, pueden mejorar la función visual y también
ayudar en la prevención de enfermedades cardiovasculares ( Khoo, H. E., Azlan, A., Tang, S. T.,
& Lim, S. M. 2017). Se han publicado investigaciones sobre las propiedades de la col lombarda
como hepatoprotector, estabilizadora de membrana y neuroprotectora, en la que su potencial
terapéutico es atribuido a su alto contenido de antocianinas (Jana et al., 2017).

Según Arrazola, Herazo, & Alvis, (2013), también juegan un rol fundamental quizá en la
reducción de enfermedades coronarias, cáncer, diabetes, y comportamiento cognitivo. Todos

1
estos efectos preventivos y terapéuticos se asocian a sus propiedades antioxidantes (Longo & Formatted: English (United States)
Vasapollo, 2004; Garzón Gloria A., 2008). Field Code Changed
Formatted: English (United States)

Las antocianinas (perteneciente a los flavonoides), además de mejorar la salud y curar Field Code Changed

enfermedades, se emplean ampliamente en la industria alimentaria, para aumentar la Formatted: English (United States)
Formatted: English (United States)
aceptabilidad del consumidor a ciertos productos (Zapata, 2014). Las antocianinas son de interés
Formatted: English (United States)
particular para la industria de colorantes alimenticios debido a su capacidad para impartir colores
Formatted: English (United States)
atractivos (Konczak & Zhang, 2004). El interés por los pigmentos antocianinos no solo es debido
Field Code Changed
al color que confieren; este tipo de colorantes se han usado habitualmente como colorantes
alimentarios naturales debido a que tienen baja o nula toxicidad, (Garzón Gloria A., 2008) además
de propiedades nutricionales y farmacéuticas para la salud.

La incorporación de antocianinas como colorantes alimenticios, además de mejorar la apariencia


total, son muy benéficas para nuestra salud. Según Aguilera, Reza, Chew, & Meza, (2011) existen
varios estudios que presentan evidencia científica que los extractos ricos en antocianinas pueden
mostrar actividad antioxidante, atrapar radicales y actuar como agentes quimioprotectores. Los
colorantes naturales como este, son más seguros para el consumo incluso en grandes cantidades
a diferencia de los colorantes sintéticos, que pueden llegar a ser perjudiciales (Khoo et al., 2017).

3. OBJETIVOS

3.1. Objetivo General


Obtener productos microencapsulados con propiedades antioxidantes y antiinflamatorias a partir
de antocianinas extraídas de Brassica oleracea var. capitata f. rubra

3.2. Objetivos específicos


 Establecer las condiciones óptimas de extracción de antocianinas de hojas de Brassica
oleracea fo. rubra.
 Microencapsular mediante secado por aspersión las antocianinas extraídas empleando
maltodextrina como polímero.
 Evaluar la actividad antioxidante de las antocianinas microencapsuladas.

2
4. FUNDAMENTACIÓN CIENTÍFICO TÉCNICA

4.1. Descripción de la planta


4.1.1. Brassica oleracea fo. rubra
Brassica oleracea comúnmente conocida como “col morada” es una de las más de 3000 especies
de género Brassica (Ishida, Hara, Fukino, Kakizaki, & Morimitsu, 2014), perteneciente a la
familia Cruciferaceae. Tiene una raíz corta y sin ramificaciones. La principal característica es el
pigmento púrpura en sus cabezas florales. Es una planta ampliamente apreciada, puesto que tiene
gran importancia nutricional, ya sea por sus vitaminas o por sus componentes fitoquímicos vitales
(Watanabe, Suwabe, & Suzuki, 2012).

El repollo morado como también es conocida, tiene diferentes usos ya sea en el campo químico o
en el gastronómico. Está constituida por abundantes en compuestos de azufre, vitamina C y ácido
cítrico. Tiene un bajo contenido calórico, es rica en antioxidantes (1,88 millimoles/100 g) y
proporciona mucha fibra, por lo que se le adjudica propiedades laxantes (Salas Salvadó, Ros
Rahola, & Sabaté, 2005).

3
Figura 1: Brassica oleracea fo. rubra Fuente: (Plantas, 2018)

4.1.2. Taxonomía
Tabla 1: Taxonomía Brassica oleracea fo. rubra
Reino Plantae
División Magnoliophyta
Clase Magnoliopsida
Orden Brassicales
Familia Brassicaceae
Género Brassica
Variedad Capitata
Autor del epíteto específico Palacios Riera, J. U.
Nombre científico Brassica oleracea var. capitata f. rubra
Fuente: (Riera & Urcesino, 2014)

4.1.3. Compuestos fitoquímicos en (Brassica oleracea fo. rubra)

4
Los vegetales Brassicaceae tienen gran cantidad de sustancias que promueven la salud y reducen
el riesgo de enfermedades. Estas verduras son fuentes potenciales de glucosinolatos
anticancerígenos, gran cantidad de compuestos polifenólicos, como glucosinolatos, ácidos
fenólicos, antocianidinas, carotenoides y aminoácidos (Park et al., 2014).

La col, una verdura crucífera, contiene carbohidratos y metabolitos antioxidantes como vitamina
C y E (Chun, Smith, Sakagawa, & Lee, 2004). Además, se conoce que el repollo rojo contiene
varios flavonoides como por ejemplo miricetina, luteolina, delfinidina, cianidina y pelargonidina
y en especial kaempferol y quercetina, que se consideran compuestos antioxidantes,
antiinflamatorios, anticancerígenos, antitrombóticos y antivirales lo que puede tener un impacto
beneficioso en la salud humana (Park et al., 2014). Por otro lado (Wiczkowski, Topolska, &
Honke, 2014) a través de un estudio realizado con la col morada se determinó mediante el método
HPLC-DAD-MS / MS que Brassica oleracea fo. rubra cuenta con otra subclase de flavonoides,
20 antocianinas diferentes con la estructura principal de cianidina-3-diglucósido-5-glucósidos. Se
reconoció la presencia de forma no acilada, monoacilada y diacilada predominando en su mayoría
los compuestos no acilados y diacilados con ácido sinápico de cianidin-3-diglucósido-5-
glucósido.

5. METODOLOGÍA
5.1. Trabajo de campo
5.1.1. Recolección de la planta

El material vegetal fértil (fresco y en mejores condiciones) de la col morada será recaudado en el
Mercado Modelo, Provincia de Tungurahua, Ambato. La identificación taxonómica de la especie
será efectuada en el Herbario Nacional del Ecuador (QCNE), Quito. Un espécimen botánico se
depositará en el Herbario Misael Acosta Solís (AMAS), como colección de referencia.

5.2. Trabajo de laboratorio


5.2.1. Preparación del material vegetal

En el laboratorio de la Facultad de Ciencia e Ingeniería en Alimentos (FCIAL) de la UTA, se


deshojará el tallo para proceder a lavar las hojas y eliminar cualquier tipo de contaminación que
pudiera afectar los resultados. Con el fin de obtener mejores resultados se triturarán las hojas en

5
un procesado (marca Thermomix®). Subsecuentemente, se extenderá la muestra en mallas
metálicas e introducirlas en una estufa (marca Gander MTN) a 60 °C de temperatura y reducir la
humedad hasta 9 %.
5.2.2. Obtención de extractos vegetales líquidos
Previa obtención del mejor extracto vegetal, se trabajará con diferentes variables, tales como: la
relación material vegetal/volumen de disolvente y el tiempo de extracción, manteniendo constante
la temperatura de ebullición. Como disolvente se usará etanol al 96 % en combinación con ácido
clorhídrico 1mol/l, en proporción 85:15. Se utilizarán tres variables de masa 3.3, 4.0 y 5.0 g de
material vegetal seco, que se pesarán utilizando una balanza analítica (marca Ohaus pioneer) y se
mezclarán respectivamente con 100 ml de disolvente.
A continuación, en 3 matraces (marca Pyrex) con tapa, se calentará cada una de las muestras en
una plancha de calentamiento (marca Corning PC-620D) con agitación magnética a 400 min-1,
aplicando tres tiempos de extracción diferentes, 60, 90 y 120 min respectivamente para cada una
de las respectivas proporciones de masa; Se tomará el tiempo después de alcanzar la temperatura
de ebullición, así sucesivamente con cada una de las muestras. Posteriormente, se separarán los
residuos sólidos del extracto líquido, utilizando una centrífuga (marca Rotina 380) a 5000 min-1
durante 10 minutos. Se desechará el precipitado y conservará el sobrenadante en botellas de vidrio
color ámbar en refrigeración a 4 °C para evitar la descomposición de las antocianinas.

5.2.3. Determinación de sólidos totales


Los sólidos totales de las muestras obtenidas se determinarán tomando mediciones de humedad
por triplicado con una balanza de humedad (marca KERN MLS 50-3), en recipientes de vidrio.
Finalmente se calculará el porcentaje de sólidos totales con la siguiente fórmula.

% 𝑆𝑜𝑙𝑖𝑑𝑜𝑠 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙𝑒𝑠 = 100 − % ℎ𝑢𝑚𝑒𝑑𝑎𝑑 (1)

5.2.4. Análisis por espectrofotometría


El análisis de antocianinas se realizará de los extractos líquidos obtenidos con un factor de
dilución 1/25, utilizando un espectrofotómetro UV-VIS compatible con microplacas de 96
pocillos (marca Fisherbrand™ accuSkan™ GO). Con el objetivo de determinar la absorbancia de
la col morada se colocarán 200 µl en cada pocillo de cada una de las muestras por cuadruplicado.
La longitud de onda en la cual se medirá será de 526 nm. A continuación, se procederá a calcular
la concentración de antocianinas utilizado la siguiente ecuación:

𝐴 𝑥 𝑀𝑊 𝑥 𝐷𝐹 𝑥 1000
𝑚𝑔 𝐿−1 =
𝜀𝑥1

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donde, A es igual a absorbancia, PM equivale al peso molecular de la cianidina-3-glucósido
(449,6 g/L), FD es el factor de dilución y 𝜀 es coeficiente de absorción molar para la col morada
(38020) (Universidad de las Américas de Puebla, 2018).

5.2.5. Determinación de condiciones óptimas de extracción


Los datos obtenidos serán tabulados en una base de datos Excel 2010. Posteriormente se usará el
programa Statgraphics el cual arrojará una ecuación de superficie de respuesta, que ayudará a
observar como los cambios en las variables afectan en los extractos obtenidos. Para predecir la
combinación óptima de material vegetal y tiempo de extracción se aplicará un diseño
experimental de superficie de respuesta 3 2 con los datos obtenidos de concentración de
antocianinas conseguidos de las nueve relaciones de material vegetal y tiempo con sus tres
respectivas réplicas.

5.2.6. Microencapsulación
La microencapsulación del extracto vegetal rico en antocianinas se llevará a cabo utilizando un
mini Spray Dryer BUCHI-B 290. Se procederá a secar por aspersión la solución de antocianinas
con el polímero, maltodextrina DE (dextrosa equivalente) 10. El material encapsulante se
solidificará sobre las partículas a medida que el disolvente se evapore formando microesferas.

5.2.7. Evaluación de la actividad antioxidante


Para la evaluación de la actividad antioxidante se utilizarán cepas cultivadas en medio YPD
compuesto por glucosa 2 % p/v, extracto de levadura 1 % p/v, peptona 2 % p/v y agar 2 % p/v.
Las cepas se sembrarán de un stock de glicerol congelado a un medio YPD líquido y se cultivarán
a 28 °C con agitación toda la noche. Luego estos cultivos se diluirán nuevamente en medio YPD
líquido para que crezcan a 28 °C con agitación toda la noche. Posteriormente se extendieron sobre
placas de agar YPD y se incubaron a 28 °C por 72 h para obtener colonias individuales.

Primero, se llevarán a cabo varios experimentos para determinar la concentración correcta de


oxidante. Una sola colonia de cepa de levadura se inoculará en 5 ml de medio YPD líquido fresco
y se incubará durante 6 horas a 28 ºC con agitación a 40 rpmin -1 . Se inoculará una alícuota de 5
μL de la dilución 1/10 de este precultivo en 3 mL de medio YPD líquido fresco durante 18 h a 28
-1
ºC con agitación a 100 rpmin en un rotador de tubos. Las células se recogerán luego por
centrifugación a 2700 g, durante 20 min, a 20 ºC y se resuspenderán en 3 ml de solución salina
tamponada con fosfato (PBS) pH 7.4 (se leerá la absorbancia OD a 600 nm) para asegurar una
concentración igual en la siguiente etapa de 0.1 y se incubará durante 30 minutos a 28 ºC.

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Para realizar la etapa de estrés oxidativo, se analizará un rango de concentraciones de H2O2. y se
incubarán durante 60 min a 28 ºC con H 2O2 de 0.25 a 6 mmol/l. También se llevará a cabo un
control no tratado. Luego, los oxidantes se eliminarán mediante centrifugación a 2700 g, durante
20 min, a 20 ºC y se realizará un lavado con PBS, el pellet se resuspenderá en medio YPD fresco
para su posterior análisis de crecimiento registrando la OD 600 nm.

Los cultivos se distribuirán en placas de microtitulación de 96 pocillos con un volumen final de


250 μl por pocillo utilizando cuatro repeticiones para cada combinación de condición. El
crecimiento de la levadura se controlará a 30 ºC leyendo la O.D 600 nm en un espectrofotómetro
con lector de placas de 96 pocillos (marca Fisherbrand™ accuSkan™ GO) durante 18 h con
agitación a 600 rpmin-1 antes de cada lectura. Los experimentos se llevarán a cabo por triplicado.

Las curvas de relación de crecimiento se calcularán para cada cepa y condición a las 5, 9, 12, 16
y 18 h de incubación con la siguiente formula:

curva de crecimiento del cultivo expuesto al estrés oxidativo


𝐶𝑢𝑟𝑣𝑎 𝑑𝑒 𝑟𝑒𝑙𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑑𝑒 𝑐𝑟𝑒𝑐𝑖𝑚𝑖𝑒𝑛𝑡𝑜 =
curva de crecimiento del cultivo no expuesto

El efecto que ejerce el peróxido de hidrogeno y los agentes oxidantes a evaluarse se determinarán
mediante el análisis estadístico de la gráfica de curva de relación de crecimiento vs tiempo.

Una sola colonia de cepa de levadura se inoculará en 5 ml de medio YPD líquido fresco y se
incubará durante 6 horas a 28 ºC con agitación a 40 rpmin -1 . Una alícuota de 5 μl de la dilución
1/10 de este precultivo se inoculará en 3 mL de medio YPD líquido fresco con los ingredientes
antioxidantes durante 18 h a 28 ºC con agitación a 40 rpmin -1 en un rotador de tubo. Se analizarán
varias concentraciones de los ingredientes antioxidantes (50 mg EE/L a 700 mg EE/L de extracto
de antocianina y 0.5 a 25 mmol/l de vitamina C) para inducir una respuesta antioxidante
intracelular en la levadura.

La vitamina C se utilizará como un resultado positivo y para el control negativo se utilizarán


cultivos sin ningún ingrediente antioxidante. Las células se recogerán mediante centrifugación a
2700 g, durante 10 minutos, a 20 ºC y se resuspenderán en 3 ml de PBS pH 7.4 (se leerá OD 600
nm para asegurar una concentración igual en todas las etapas). Una alícuota de esta suspensión
de células se diluirá en PBS en un volumen final de 3 ml para alcanzar una OD 600 de 0.1 y se
incubará previamente 30 min a 28 ºC.

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Para inducir un estrés oxidativo no letal, las células se incubaron durante 60 minutos a 28 ºC con
H2O2 (0.5 mmol/l y 4 mmol/l). Se llevará a cabo un control no tratado para cada muestra. Luego,
los oxidantes se eliminarán mediante centrifugación a 2700 g, durante 10 minutos, a 20 ºC y las
células se resuspenderán en medio YPD fresco para el análisis de crecimiento posterior
registrando la OD 600 nm como se describe anteriormente. Los experimentos se efectuarán por
triplicado. Las diferencias estadísticamente significativas (p <0,05) se calcularán mediante un
ANOVA de una vía con LSD post prueba. (Peláez Soto & Patricia Roig Montoya José Vicente
Gil Ponce Valencia, 2016)

6. RECURSOS
6.1. Recursos humanos
 Investigador: Eliana Ramos
 Docente tutor: PhD. Orestes López

6.2. Recursos institucionales


Laboratorio de Unidad Operativa de la Dirección de Investigación y Desarrollo
(UODIDE-ICIA), de la Facultad de Ciencia e Ingeniería en Alimentos, de la Universidad
Técnica de Ambato.

6.3. Recursos materiales


 Balones de aforo
 Matraces Erlenmeyer
 Probetas graduadas
 Núcleos para agitador magnético
 Pipetas
 Micropipetas
 Pera de succión
 Tubos para centrifugadora
 Microplacas de 96 pocillos para espectrofotómetro
 Botellas de cristal color ámbar

6.4. Recursos tecnológicos


 Plancha de calentamiento
 Centrifuga
 Balanza de humedad
 Espectrofotómetro UV-VIS

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 Equipo mini Spray Dryer
 Computadora laptop con sistema operativo Windows 10
 Software de análisis de datos estadístico y gráfico, Statgraphics XVII 64x

6.5. Recursos económicos


Tabla 1. Recursos económicos
Actividad Descripción Monto Aprox. (USD)

Recolección de materia vegetal Trabajo de campo para 50.00


recolección de la planta Brassica
oleracea fo. rubra

Obtención de extractos vegetales Extracción de metabolitos 100.00


vegetales por medio de extracción
orgánica sólido líquido

Análisis antioxidante y Determinación de actividad 250.00


espectrofotometría antioxidante in vivo.

Materiales de oficina Materiales de oficina 20.00

Elaboración de documentos Elaboración de perfil 50.00


(perfil, trabajo de graduación)

Transporte Transporte 50.00

Gastos imprevistos Gastos imprevistos 50.00

Reactivos Reactivos 150.00

Costo total 720.00

7. CRONOGRAMA

Tabla 2. Cronograma de actividades


Inicio de Duración Fin de
Actividad
actividad (días) actividad
Inicio del proyecto 24-sep-18 18-mar

10
Revisión bibliográfica 24-oct-18 145 18-mar-19

Redacción de perfil de tesis 12-nov-18 28 10-dic-18

Correcciones de perfil de tesis 10-dic-18 2 12-dic-18

Recolección de material vegetal 13-dic-18 1 14-dic-18


Fase experimental: ensayos de
17-dic-18 35 18-ene-19
laboratorio
Análisis de resultados 18-ene-19 5 23-ene-19

Redacción tesis 23-ene-19 20 12-feb-19

Corrección de tesis 17-feb-19 6 23-feb-19

Tramites de sustentación 23-feb-19 5 01-mar-19

Presentación de trabajo de graduación 04-mar-19 1 11-mar-19

Defensa del trabajo de graduación 18-mar-19 1 18-mar-19

Fin del proyecto Total 196 18-mar-19

24-Oct-1813-Nov-18 3-Dec-18 23-Dec-1812-Jan-19 1-Feb-19 21-Feb-1913-Mar-19

Revisión bibliográfica
Redacción de perfil de tesis
Correcciones de perfil de tesis
Recolección de material vegetal
Fase experimental: ensayos de laboratorio
Análisis de resultados
Redacción tesis
Corrección de tesis
Tramites de sustentación
Presentación de trabajo de graduación
Defensa del trabajo de graduación

Figura 2: Cronograma de actividades

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8. BIBLIOGRAFÍA
Aguilera, M., Reza, M. del C., Chew, R., & Meza, J. (2011). Propiedades Funcionales De Las
Antocianinas. BIOtecnia, 13(2), 16–22. https://doi.org/10.18633/bt.v13i2.81
Arrazola, G., Herazo, I., & Alvis, A. (2013). Microencapsulación de antocianinas de berenjena
(Solanum melongena L.) mediante Secado por aspersión y evaluación de la estabilidad de
su color y capacidad antioxidante. Informacion Tecnologica, 25(3), 31–42.
https://doi.org/10.4067/S0718-07642014000300006
Chun, O. K., Smith, N., Sakagawa, A., & Lee, C. Y. (2004). Antioxidant properties of raw and Formatted: English (United States)
processed cabbages. International Journal of Food Sciences and Nutrition, 55(3), 191–
199. https://doi.org/10.1080/09637480410001725148
Garzón Gloria A. (2008). Las antocianinas como colorantes naturales y compuestos bioactivos.
Departamento de Química, Universidad Nacional de Colombia., 13(3), 27–36.
https://doi.org/10.15446/abc
Ishida, M., Hara, M., Fukino, N., Kakizaki, T., & Morimitsu, Y. (2014). Glucosinolate Formatted: English (United States)
metabolism, functionality and breeding for the improvement of Brassicaceae vegetables.
Breeding Science, 64(1), 48–59. https://doi.org/10.1270/jsbbs.64.48
Jana, S., Patel, D., Patel, S., Upadhyay, K., Thadani, J., Mandal, R., … Devkar, R. (2017).
Anthocyanin rich extract of Brassica oleracea L. alleviates experimentally induced
myocardial infarction. PloS One, 12(8), e0182137.
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0182137
Khoo, H. E., Azlan, A., Tang, S. T., & Lim, S. M. (2017). Anthocyanidins and anthocyanins:
colored pigments as food, pharmaceutical ingredients, and the potential health benefits.
Food & Nutrition Research, 61(1), 1361779.
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Konczak, I., & Zhang, W. (2004). Anthocyanins—More Than Nature’s Colours, 5, 239–240.
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VALIDACIÓN FUNCIONAL DE EXTRACTOS POLIFENÓLICOS DE CACAO

12
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