PROTOCOLO DE VALIDACIÓN

VIGENCIA DEL ESTADO LIMPIO DE AMBIENTES

1. Objetivo

2. Justificación

3. Referencia

4. Alcance

5. Responsabilidad

6. Consideraciones Generales

7. Descripción del Área de Envasado de Semisólidos Estériles

8. Requerimientos Previos a la Validación

9. Metodología para la Validación

10. Métodos de Muestreo

11. Criterios de Aceptación

12. Reporte de Resultados

13. Dictamen de Validación

1. Objetivo:
Demostrar mediante evidencia documentada que el proceso de limpieza y
sanitización empleando el agente desinfectante Tego 2000 a la concentración de
1,0%, permite asegurar la remoción de residuos, agentes de limpieza y
contaminación microbiana en superficies de pisos, paredes, techos y anaqueles; a
niveles microbiológicos permisibles predeterminados y por un tiempo prolongado;
en los diferentes ambientes del Área de Envasado de Semisólidos Estériles.

2. Justificación:

3. Referencia:
3.1. Reporte 32 (OMS) – 1992.
3.2. Reporte 45 (OMS) – 2011.
3.3. USP 39 – 2016.
3.4. Manual de Buenas Prácticas de Manufactura (DIGEMID) – 1999.
3.5. Guide to Inspections Validation of Cleaning Processes (FDA).
3.6. Artículo Estrategia y Metodología para la Validación de Limpieza e
Higienización de Áreas Limpias.

4. Alcance:
El presente proceso de validación aplica a los diferentes ambientes del Área de
Envasado de Semisólidos Estériles, como:
a. Zona negra.
b. Zona gris
c. Zona blanca
d. Corredor 1 y 2.
e. Pasadizo.
f. Envasado (Parihuelas y Máquina envasadora).
Empleando el desinfectante Tego 2000 a la concentración de 1,0 %.

5. Responsabilidad:

6. Consideraciones Generales:
6.1. Los objetivos de las buenas prácticas de manufactura declaran explícitamente
que los fabricantes de productos farmacéuticos deben limpiar apropiadamente
sus instalaciones y equipos para prevenir la contaminación y contaminación
cruzada de materias primas y productos farmacéuticos.
 6.2. Los productos farmacéuticos pueden ser contaminados por una variedad de
sustancias tales como contaminantes asociados con microorganismos,
productos anteriores (ingredientes farmacéuticos activos (API) y residuos de
excipientes), residuos de agentes de limpieza, materiales suspendidos en el
aire, tales como polvo, lubricantes; y materiales auxiliares, tales como
desinfectantes y residuos de productos de descomposición de:

6.2.1. Residuos de productos ocasionados por, ej. el uso de ácidos y bases

fuertes durante el proceso de limpieza.

6.2.2. Residuos de productos de los detergentes, ácidos y bases que pueden

ser empleados como parte del proceso de limpieza.

6.3. Los procedimientos de limpieza adecuados, desempeñan un rol importante en

la prevención de contaminación y contaminación cruzada. La validación de
los métodos de limpieza aporta evidencia documentada que un procedimiento
de limpieza aprobado, proporcionará un equipo limpio o sala limpia,
adecuado para el uso previsto.

6.4. Es importante establecer que no existe un único camino para realizar un

proceso de validación de limpieza y que el punto común a buscar es la
existencia de criterios, parámetros y metodologías que sean científicamente
justificables y que demuestren claramente que un procedimiento de limpieza
produzca resultados que estén de acuerdo con las especificaciones
preestablecidas.

6.5. La evaluación de la calidad microbiológica del ambiente como de superficies

nos indica la cantidad de microorganismos que están presentes en un área
determinada. Mientras más limpia es un área, menor será el número de
microorganismos presentes en el aire de la misma. Los microorganismos
generalmente no están flotando en el aire sino que se encuentran sobre
partículas inertes, que le sirven como medio de transporte, y pueden
encontrarse aislados o agregados. Algunas de estas partículas pueden
depositarse sobre las superficies.

7. Descripción del Área de Envasado de Semisólidos Estériles:

7.1. Esclusas:
7.1.1. Zona Negra
7.1.2. Zona Gris
7.1.3. Zona blanca
7.1.4. Corredor 1
7.1.5. Corredor 2
7.1.6. Pasadizo
7.2 Área de Envasado
7.2.1 Parihuelas (punto de muestreo)
7.2.2 Máquina envasadora (punto de muestreo)

7.2. Clasificación de Ambientes:

7.2.1. Zona negra:

a. Se halla clasificada como Grado D (Clase 100 000).

b. No cuenta con filtro HEPA sólo con un inyector de aire.

7.2.2. Zona gris:

a. Se halla clasificada como Grado D (Clase 100 000).

b. Cuenta con 1 filtro HEPA de 99,99% de eficiencia y dimensiones

24 x 12 pulg.

7.2.3. Zona blanca:

a. Se halla clasificada como Grado D (Clase 100 000).

b. Cuenta con 1 filtro HEPA de 99,99% de eficiencia y dimensiones

24 x 24 pulg.

7.2.4. Área de Envasado:

a. Se halla clasificada como Grado B (Clase 1 000).

b. Cuenta con 12 filtros HEPA de 99,99% de eficiencia y

dimensiones 24 x 48 pulg.

c. El área de envasado es de 25.140 m2, dentro de la cual se

encuentran las parihuelas y la máquina envasadora.

d. Consta de paredes lisas, libre de rajaduras, hendiduras, alto o bajo

relieve; pintada a base de pintura epóxica y con ángulos sanitarios
tanto en la parte superior como en la parte inferior.

e. Máquina envasadora:
Se halla clasificada como Grado A (Clase 100).
Cuenta con 1 filtro HEPA de 99,99% de eficiencia y dimensiones
24 x 48 pulg.
e. Requerimientos Previos a la Validación:

a. Programa de Rotación del Desinfectante Tego 2000:

b. Trazabilidad de Preparación de los Agentes Desinfectantes:

8.3 Trazabilidad de Filtración del Agente Desinfectante luego de su

Preparación:

8.4 Trazabilidad de Prueba de Efectividad de los Agentes Desinfectantes:

8.5 Trazabilidad del Análisis (Materia Prima) de los Agentes Desinfectantes:

8.5.1 Tego 2000:

a. Es un desinfectante versátil líquido y efectivo, basado en
tensioactivos anfotéricos; adecuado para aplicar sobre superficies
externas.

b. Está basado en una solución concentrada de agentes activos

anfotéricos de superficie, con excelentes propiedades
desinfectantes frente a un amplio rango de microorganismos.

c. Es recomendado para aplicar en procesos de la industria

alimentaria.

d. Debe aplicarse después de que las superficies se hayan limpiado

a fondo y enjuagado.

e. Puede usarse en la desinfección de suelos, paredes, utensilios y

equipos.

f. Es adecuado para aplicación manual, por inmersión, por spray y

nebulización.

g. Concentración de Uso:
  Al 1,0 %, para desinfectar superficies de techos, paredes,
anaqueles y pisos.

8.5.2 Alcohol Etílico 96º:

a. Es un desinfectante líquido incoloro y transparente, libre de
sedimento de partículas en suspensión y de material extraño.
Volátil e inflamable, es higroscópico y miscible en agua.

b. Exhibe propiedades germicidas desnaturalizando las proteínas

bacterianas. En la ausencia de agua las proteínas no son
desnaturalizadas por lo que una solución de alcohol isopropílico
al 70% es mejor que utilizar el alcohol puro (99%).

c. Es capaz de matar la mayoría de las bacterias en unos pocos

minutos de exposición, pero es inefectivo para esporas y tiene
relativa efectividad virusida.

d. Concentración de Uso:
Al 70%, para desinfectar superficies de máquinas, equipos,
materiales, cortinas y lunas.

8.5.3 Alquilaril Sulfonato de Sodio:

a. Este detergente posee una composición de tensoactivos que
comprende al menos dos isómeros en su fórmula, para que dicha
composición sea eléctricamente neutra.

b. Los tensioactivos son sustancias químicas que presentan en su

molécula tanto grupos polares como no polares y cuando se
disuelven en un líquido en una concentración tal que se favorezca
la formación de micelas, actúan dándole características
fisicoquímicas especiales.

c. Asimismo, los tensioactivos para ser considerados detergentes

deben cumplir con las siguientes propiedades:

 Disminución de la tensión superficial.

 Alto poder de humectación.
 Poder de espuma.
 Alta biodegrabilidad (resultado de la acción de las bacterias
sobre el tensoactivo).

d. Los tensioactivos aniónicos presentan ventajas respecto al resto

de los grupos, en referente a: humectancia y poder espumante, por
 lo cual se utilizan como porcentaje mayoritario en las
formulaciones de detergentes. Entre ellos se encuentran los alquil
aril sulfonatos, alquil sulfatos, alquil etoxi sulfatos, etc.

e. Mecanismo de Acción: provocan una gran disrupción de

membranas, con efectos de lisis.
Son activos sobre todo a pH ácido, preferentemente sobre
bacterias Gram-positivas, pero poco sobre Gram-negativas, ya
que éstas quedan más protegidas por la barrera del polisacárido
de la membrana externa.

f. Concentración de Uso:
Al 0,5%, para limpieza de pisos, paredes, techos y ventanas.

8.6 Trazabilidad Documentaria Principal:

Vigente
Documento Tipo Código
desde
Limpieza y Sanitización del Área de
Envasado de Semisólidos Estériles

Control de Ambiente de Áreas Estériles y

Áreas No Estériles
Control Microbiológico de Superficies
Críticas
Prueba de Efectividad para Desinfectantes
por Método Kelsey-Sykes
Preparación de Desinfectantes
Promoción de Crecimiento y Control
Negativo de Medios de Cultivo

f. Metodología para la Validación:

a. La presente validación de vigencia de limpieza y sanitización de áreas tiene

como objetivo demostrar que, luego de aplicar correctamente el
procedimiento Limpieza y Sanitización del Área de Envasado de Semisólidos
Estériles con el desinfectante Tego 2000 a la concentración de 1,0%, es
posible bajo condiciones At Rest, mantener el estado “Limpio” de los
diferentes ambientes del Área de Envasado de Semisólidos Estériles, por
un lapso de 3 días (72 horas); de tal forma que en cualquiera de esas fechas
puedan ser empleadas normalmente.
b. Para ello se realiza una evaluación de 3 ciclos de limpieza, al término de los
cuales se efectuó un control microbiológico estricto por 3 días (72 horas)
 consecutivos para evaluar su estado (el plaqueo de cada día será realizado
cada 24 h). El presente trabajo corresponde a la primera evaluación.
Nota: Al término de la limpieza se realizará un plaqueo preliminar, que se
contabilizará como el “Día-0”.

24 h 24 h 24 h

DÍA-0 DÍA-1 DÍA-2 DÍA-3

(0 Horas) (24 Horas) (48 Horas) (72 Horas)

c. Preliminarmente, se efectúa la preparación del desinfectante a la
concentración de 1,0% (aplicados a superficies de paredes, techos, anaqueles
y pisos),

d. Seguidamente se efectúa la correspondiente evaluación de la efectividad del

desinfectante preparado, según procedimiento Prueba de Efectividad para
Desinfectantes por Método Kelsey-Sykes; a fin verificar su eficacia a las
concentraciones de trabajo previstas.

e. Hallándose apta la preparación del desinfectante se procedió a ejecutar el

procedimiento de limpieza y sanitización, el mismo que fue supervisado por
personal de Validaciones, a fin de evaluar su cumplimiento e identificar
posibles desviaciones.

f. Al término del mismo se coordina con Control de Calidad las pruebas

correspondientes para monitorear microbiológicamente su vigencia del
estado “Limpio” por un lapso de 3 días consecutivos. Esta actividad fue
supervisada por personal de Validaciones.

f. Plan de Muestreo:

9.7.1 Control de Ambientes:

 .

9.7.2 Control de Superficies:

Se evaluaron diversos puntos críticos de las superficies de Envasado
y Esclusas a:

 Zonas de mayor intervención y manipulación por el personal

operario.

1. Ventana (B)
2. Máquina Envasadora (A)
3. Ventana máquina envasadora (A)
4. Pared (B)
5. Piso (B)
6. Puerta (B)
 g. Los resultados fueron reportados en los formatos respectivos de Control de
Calidad y presentados en el presente protocolo.

h. Finalmente al término de la primera evaluación se emitió el informe

correspondiente, con el consolidado de los resultados y las conclusiones
pertinentes.

g. Métodos de Muestreo:

10.1 Para Control de Ambientes:

Las placas deberán ser expuestas de la siguiente manera:

10.1.1 Usar una placa en cada posición identificada en los diferentes

ambientes.

10.1.2 La exposición deberá realizarse por 4 horas

10.1.3 Al término de la exposición, se incubarán las placas con agar en

forma invertida (para prevenir la condensación de gotas de agua
sobre la superficie del medio) a 32,5 ºC ±2,5 ºC por 48 horas.

10.1.4 Seguidamente se realizarán las lecturas para observar crecimiento

de Mesófilos Aerobios.

10.1.5 Posteriormente, se incubarán a 22,5 ºC ± 2,5 ºC por 72 horas, de

modo similar, en forma invertida (para prevenir la condensación de
gotas de agua sobre la superficie del medio).

Finalmente se realizarán las lecturas para observar crecimiento de Hongos

y Levaduras.

10.2 Para Control de Superficies:

10.2.1 Se colocará la superficie de la placa con medio de cultivo en contacto
con la superficie crítica a muestrear por unos segundos.
 10.2.2 Inmediatamente después de muestrear con cada placa, se cerrará para
evitar sobreexposición.

10.2.3 Al término de los muestreos se incubarán las placas:

a. A 32.5 ºC ± 2.5 ºC por 48 horas para observar el crecimiento de
Mesófilos Aerobios.

b. 22.5 ºC ± 2.5 ºC por 72 horas, para observar el crecimiento de

Hongos y Levaduras.

h. Criterios de Aceptación:

 Zonas de mayor frecuencia de tránsito.

 Zonas de mayor intervención y manipulación por el personal operario.
 Zonas donde se hace difícil el movimiento del flujo de aire.

11.2.1 Control de Ambientes:

*Placas de Sedimentación **Hongos
Área Grado (Diámetro 90 mm) Filamentosos y/o
UFC/4 Horas Levaduras
A < 1 UFC / Placa < 1 UFC / Placa
B ≤ 5 UFC / Placa ≤ 2 UFC / Placa
C ≤ 50 UFC / Placa ≤ 6 UFC / Placa
D < 100 UFC / Placa ≤ 30 UFC / Placa
Fuente:
- (*) Informe 45 (OMS) – 2011 (Pág. 268).
- (**) Según resultados históricos de Control de Calidad. Cumplen recomendaciones de
contaminacion microbiana según OMS - Informe 45.

11.2.2 Control de Superficies (Ambientes y Equipos):

*Placas de contacto **Hongos
Área Grado (Diámetro 55 mm) Filamentosos y/o
UFC/placa Levaduras
A ≤1 UFC / Placa < 1 UFC / Placa
B ≤5 UFC / Placa ≤ 2 UFC / Placa
C ≤ 25 UFC / Placa ≤ 2 UFC / Placa
D ≤ 50 UFC / Placa ≤ 20 UFC / Placa

Fuente:
- (*) Informe 45 (OMS) – 2011 (Pág. 268).
- (**) Según resultados históricos de Control de Calidad. Cumplen recomendaciones de
contaminacion microbiana según OMS - Informe 45.

Donde (según OMS – Informe 45, pág. 264):

 Grado A (Clase 100):
Zona local para operaciones de alto riesgo, por ejemplo, estaciones
de llenado y conexiones asépticas.
Normalmente, estas condiciones se logran mediante el uso de
estaciones de trabajo con flujo de aire unidireccional.
Los sistemas de flujo de aire unidireccional deben proporcionar una
velocidad de aire homogénea de 0,36 m/s a 0,54 m/s, en una posición
de prueba definida de 15 cm a 30 cm por debajo del filtro terminal o
el sistema de distribución de aire.
La velocidad a nivel de la zona de trabajo no debe ser inferior a
0,36 m/s.

Grado C (Clase 10 000) y Grado D (Clase 100 000):

Zonas limpias para realizar operaciones menos críticas en la
fabricación de productos estériles, o llevar a cabo actividades es las
que el producto no está expuesto directamente.

i. Reporte de Resultados:

12.1 Control Ambiental:

j. Dictamen de Validación:
13.1. Al vencimiento de la vigencia del presente protocolo de validación (3 años)
se procederá a su revisión. De no existir modificación crítica alguna (previa
evaluación) se ampliará su validez, adjuntando un informe sustentatorio de
dicha revisión y aprobación.

13.2. Caso contrario, de existir cambios o modificaciones que generen impacto

directo en el proceso de limpieza y sanitización (procedimiento,
desinfectantes, diseño de áreas, ingreso nuevos equipos, etc), se deberá
proceder a una re-validación. Su evaluación preliminar recaerá en el Comité
de Validaciones.