BIOTECNOLOGÍA II

PARAMETROS
BIOLÓGICOS

Lic. Nayade Maciel

Marzo - 2019
La ley de conservación de materia establece que la
materia no se crea ni se destruye…..

Solo se transforma
¿Qué se necesita para realizar un bioproceso?

Medio de Cultivo

Producto

Microorganismos
 ESTEQUIOMETRIA DEL CRECIMIENTO
MICROBIANO

Formación de Agotamiento de Final del

Crecimiento de Consumo de
Biomasa y nutriente Proceso de
microorganismos nutrientes
Productos limitante Crecimiento

Concentración final de biomasa y productos depende de la concentración y composición

del medio de cultivo.
Biomasa promedio
C H1.79 O0.50 N0.20 (FORMULA MINIMA)
Representa el 95% del peso v/v de la célula

¿EL 5% RESTANTE A QUÉ CORRESPONDE?

Peso de 1 Carbono mol (C-mol) de Biomasa Promedio

(12x1) + (1x1,8) + (16x0,5) + (14 x0,2) = 24,6 g
5 % de sales

24,6 g / 0,95 = 25,89 g

C-mol
Concepto que se aplica para cada elemento implicado en una reacción
biológica

Por lo que….
Glucosa = C6H12O6 = CH2O
(12x1) + (1 x 2) + (16x1) = 30 g

Calcular Peso de 1-Cmol de los siguientes sustratos:

- Metanol (CH3OH):
- Glicerol (C3H8O3):
Rendimiento
S: Concentración de la fuente de carbono (g/L)
X: Concentración celular o Biomasa (g/L)

Relación entre ΔX y ΔS Rendimiento celular: Y x/s

 Ecuación Estequiométrica
CHa2Ob2 + a NH3+b O2 YX/S CH1,8O0,5N0,2 + YCO2/S CO2 + YP/S CHa3Ob3Nc3 + W H2O + Calor
FC FN Biomasa CO2 Producto

a = moles NH3 / C-mol S

YX/S = C-moles X / C-mol S Rendimiento Celular

YCO2/S = C-moles CO2 / C-mol S Rendimiento de CO2

YP/S = C-moles P / C-mol S Rendimiento de Producto COEFICIENTES

ESTEQUIOMETRICOS
b = moles O2 / C-mol S

W = moles H2O /C-mol S

BALANCES
• Balance de Carbono:
Cada C-mol de Sustrato se distribuye entre la Biomasa, el CO2y el Producto
1= YX/S + YCO2/S + YP/S

Si la fuente de N también aporta Carbono Ej: Urea = CO(NH2)2

1+a = YX/S + YCO2/S + YP/S

• Balance de Nitrógeno :
a = 0,2 YX/S + c3 YP/S
Grado de Reducción
Número de electrones que se transfieren al oxígeno cuando se oxida 1 C-mol de un
compuesto dado.

CHaOb +nO2 gCO2 + WH2O

Balance de H: a = 2 W
Balance de C: 1 = g
Balance de O: b + 2n = 2g + W
Balance de N: c =k
Grado de Reducción
• Ejemplos:
- Grado de Reducción de la Glucosa
CH2O
γ= 4 + 2 – (2x1) γ= 4

- Grado de Reducción de la Biomasa Promedio

CH1,8 O0,5 N0,2
γ= 4 + 1,8 - (2x0,5) - (3x0,2) γ= 4,2
 Balance del Grado de Reducción
CHa2Ob2 + a NH3+b O2 YX/S CH1,8O0,5N0,2 + YCO2/S CO2 + YP/S CHa3Ob3Nc3 + W H2O

γS + a γNH3 -4b = yX/S γX + yCO2 /S γCO2 + yP/S γP + W γH2O

γS - 4b = yX/S γX + yP/S γP

γS = yX/S γX + yP/S γP + 4b
• Resultados experimentales deben encontrarse dentro de los
siguientes intervalos:

Menor a 0,93 Posible formación de producto

Mayor a 1,07 Posible error de cálculo
Rendimiento de Biomasa Máximo Teórico
2 CASOS PARA RENDIMIENTO MÁXIMO TEÓRICO
Todo el C de la FCE se usa para la síntesis de Biomasa por lo que NO se forma CO2 ni
Producto
Rendimiento de Biomasa Máximo Teórico
Se supone que todos los electrones (toda la Energía) de la FCE son transferidos a la
Biomasa
Rendimiento Real
Regla del 0,6: En la Práctica se observa aprox un 60 % del rendimiento máximo
teórico.
Sandoval, W., 2017
Ejemplos

La reacción general para la conversión microbiana de glucosa a ácido L-

glutámico es:
C6H1206 + NH 3 + 3/2 02 --+ C5H9NO4 + CO2 + 3 H20

¿Cuánto oxígeno se requiere para producir 15 g de ácido glutámico?

Se cultivó la levadura Candida tropicales en un medio de cultivo
definido conteniendo glucosa, (NH4)2SO4 y sales. El cultivo se evalúo
desde el tiempo 0 hasta las 12 hs. El nivel inicial de biomasa (X0) fue de
0,53 g/L y la concentración inicial de glucosa (S0) fue de 20,2 g/L. A las
12 hs de cultivo la biomasa alcanzó un valor de 6,07 g/L (Xt), mientras
que la glucosa descendió a 10 g/L (St). Además, a las 12hs de cultivo se
consumieron 0,123 moles O2/L y se produjeron 0,124 C-mols CO2/L. La
composición elemental de C. tropicales presenta la fórmula
CH1,87O0,55N0,2 y 5% de sales. Determinar si se generó algún producto y
escribir la ecuación estequiométrica.
• Se requiere realizar el crecimiento de la levadura Yarrowia lipolytica
en un medio de cultivo que contiene glucosa, NH4Cl y sales. La
ecuación estequiométrica que representa al proceso es:
CH2O + a NH4Cl + b O2 0,56 CH1,8O0,5N0,2 + YCO2/S CO2 + d HCl +
W H2O

- Calcular el valor de los otros coeficientes estequiométricos: a, b,

YCO2/S, d, W
- Calcular el pH final si se quiere obtener 10 g/L de biomasa (el medio
no tiene buffer)
- Determinar la cantidad de H2O que se genera en el proceso para 10
g/L de biomasa.
• El objetivo de estos experimentos será producir biomasa de Klebsiella
aerogenes en condiciones aeróbicas utilizando glicerol como fuente
de carbono y amonio como fuente de nitrógeno. Sabemos que la
biomasa contiene un 8% de cenizas y se generan 0.40 gramos de
biomasa por gramo de glicerol consumido, y no hay otros
subproductos. Por favor calcule la demanda total de oxígeno en
masa?
La ecuación estequiométrica general para el crecimiento:

C3H8O3 + a NH3 + b O2 → Ύx CH1.75O0.43 N0.22 + ‘Yco2 CO2 + eH2O

• Un microorganismo que crece anaeróbicamente en un medio de
cultivo que contiene glucosa como fuente de carbono y energía, NH3
como fuente de nitrógeno y NO3 como aceptor de electrones. El
rendimiento molar Ύx = 0.35 C-mol / C-mol. El NO3- es reducido por
el organismo a N2. ¿Qué cantidad de NO3 se requerirá para obtener
6,7 g de biomasa?

• El grado de reducción de glucosa= 4.00.

• El grado de reducción γNO3- = -5
• El grado de reducción γx = 4,19
BIBLIOGRAFÍA
• Clases Tecnologías de la Fermentación – Módulo 2 de la Maestría en
Biotecnología Industrial – Dr. Diego Noseda
• Clases Diseño de Bioprocesos – Módulo 6 de la Maestría en
Biotecnología Industrial – Dr. José Bruno Barcena