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UNIVERSIDAD DE LA SALLE
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
PROGRAMA DE MEDICINA VETERINARIA
BOGOTÁ
2009
1
DETERMINACIÓN DE HEMATOCRITO (Hto), PROTEINAS PLASMÁTICAS
TOTÁLES (ppt) Y ALBÚMINA (Alb) EN CABALLOS DE SALTO ANTES Y
DESPUES DE CADA ENTRENAMIENTO EN BOGOTÁ.
Trabajo de grado
Director:
DRA. CLAUDIA AIXA MÚTIS
UNIVERSIDAD DE LA SALLE
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
PROGRAMA DE MEDICINA VETERINARIA
BOGOTÁ
2009
2
UNIVERSIDAD DE LA SALLE
DIRECTIVOS
Vicerrector de Promoción y
Desarrollo Humano Hno. Carlos Pabón Meneses
Decano de la Facultad de
Ciencias agropecuarias Dr. Luis Carlos Villamil Jiménez
Director Programa
Medicina Veterinaria Dr. Pedro Pablo Martínez
Méndez
3
Nota de aceptación:
_______________________________
Dra. Claudia Aixa Mutis
Director
_______________________________
Dr. Ernesto A. Dalmau B.
Jurado
_______________________________
Dr. Andrey Galindo
Jurado
4
5
TABLA DE CONTENIDO
pág.
INTRODUCCIÓN 133
1.1 COMPOSICIÓN SANGUÍNEA DEL CABALLO ATLETA 14
1.1.1 Eritrocitos: 15
1.1.2 Leucocitos: 15
1.1.3 Plaquetas: 18
1.1.4 Plasma: 18
1.2 VOLUMEN CELULAR AGLOMERADO (VCA) / HEMATOCRITO 19
1.3 PROTEÍNAS PLASMÁTICAS TOTALES 21
1.3.1 Albúmina 22
1.4 PERDIDA DE FLUIDOS V.S TERMOREGULACIÓN 24
2. DISEÑO METODOLÓGICO 27
2.1 LOCALIZACIÓN 27
2.2 POBLACIÓN Y MUESTRA 27
2.3 VARIABLES 27
2.4ANÁLISIS ESTADÍSTICO 28
2.5 MÉTODOS Y PROCEDIMIENTOS 29
3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 31
3.1 HEMATOCRITO 31
3.2 PROTEINAS PLASMÁTICAS TOTALES 33
3.3 ALBÚMINA 35
4. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES 37
BIBLIOGRAFÍA 38
6
LISTA DE FIGURAS
pág.
7
LISTA DE TABLAS
pág.
8
GLOSARIO
9
.
PROTEÍNAS: son macromoléculas formadas por cadenas lineales de
aminoácidos.
10
RESUMEN
11
ABSTRACT
This research has a study about the variation in the hematocritc (Hto), total
plasmatic proteins (ppt) and albumin (Alb) levels in jump horses before and
after each training in Bogota D.C. They were used 12 equines (with ages
between 5 and 9 years old) of the School of Horsemanship of the National Army
of Colombia (EEE), as a methodology, blood samples were took directly from
the jugular vein of the equines, submitted to exercise monitored and timed (30
minutes) in 3 specific moments: In rest (T1), immediately when the training was
over (T2) and at 6 hours post-training (T3), during a total period of 2 months.
These captures were realized in day 0, day 15, day 30, day 45 and day 60,
under the parameters before mentioned; the results were analyzed using the
program EXCEL and STATISTIX, with an analysis of descriptive statistics and a
significative comparison by Tukey test, with a level of significance of p <0.05;
which determined statistically significant differences between T1 and T2 and
between T1 and T3 in the same day of sampling for hematocritc, In contrast
with the seric levels of total plasmatic proteins and albumin that showed
significant differences between the values obtained in the different days of
sampling (0, 15, 30, 45, 60); indicating that the synthesis of seric proteins can
be affected by environmental factors, nutritional factors, pathology acute and
chronicles, physiological factors as the age, hormonal changes, extrinsic factors
and for stress. By these different samplings we can conclude that the significant
differences between the days of sampling for albumin, this can be related to
factors as low availability of water, increase of the environmental temperature,
among others.
12
INTRODUCCIÓN
13
1. GENERALIDADES DEL CABALLO ATLETA
14
de sangre de manera comparativamente más sencilla que obtenerla de
órganos y tejidos más densos (Voigt, 2003).
La sangre del caballo es un líquido que contiene, en volumen
aproximadamente 45% de eritrocitos, glóbulos rojos o hematíes, 1% de células
blancas (leucocitos) y plaquetas, y un 54% de plasma. La sangre puede
separarse en sus componentes celular y líquido mediante centrifugación. La
fase líquida de la sangre es mucho más ligera que las células, este líquido
acelular o extracelular de la sangre se denomina plasma, (Mutis y Ramírez,
2003).
15
sustancias extrañas o agentes infecciosos. Se originan en la médula ósea y en
el tejido linfático, (Mutis y Ramírez, 2003).
Tipos de leucocitos
Neutrófilos
Son la primera línea de las defensas del organismo. Forman aproximadamente
un 60% del total de glóbulos blancos, o entre 3.500 a 6.000 en número por ml.
Reaccionan rápidamente, en unas cuatro horas, ante cualquier problema. Con
ciertos tipos de infecciones severas pueden aumentar en número, hasta
40.000. Sin embargo, sus números bajan ante problemas relacionados con
estrés fuerte o algún virus. Si se ve un aumento en el número del neutrófilo
segmentado, quiere decir que el animal está experimentando un estrés agudo y
está utilizando incluso los neutrófilos inmaduros producidos recientemente por
la médula ósea. Se pueden ver también bajo un microscopio cambios en la
estructura celular, que pueden indicar un problema de infección o inflamación
(Thrall, 2004).
16
Eosinófilos:
Son células grandes de color rojo, que reaccionan ante problemas relacionados
con alergias o irritaciones en el sistema respiratorio. Una variación por debajo
de lo normal sólo sale al principio de un problema, cuando los eosinófilos han
salido de la sangre para ir al tejido afectado, y no ha pasado suficiente tiempo
para producir más (Thrall, 2004).
Basófilos
Linfocitos
Existen varios tipos que funcionan como la segunda línea de defensa, después
de los neutrófilos. Los linfocitos transportan las proteínas del sistema y tienen
un papel en la producción de anti-cuerpos. Su número baja ante problemas
relacionados con estrés crónico, crecimiento, lesiones o un caballo con carácter
nervioso, aumentan ante problemas crónicos, como cáncer o infecciones. Si los
17
linfocitos no se regeneran después de un descanso o cuando se disminuye el
trabajo del caballo, quiere decir que hay un estrés en el organismo, crónico y
persistente. En este estado, el caballo no puede llegar a su máximo nivel de
forma física hasta que se encuentre la causa real del problema (Thrall, 2004;
Boffi, 2007).
Monocitos
1.1.3 Plaquetas: Los trombocitos son porciones del citoplasma de una gran
célula que se encuentra en la médula ósea (megacariocito) y presenta una gran
variedad de tamaños y formas; son pequeños, de tinción suave y pueden
contener gránulos. Su función es la de contribuir al proceso de coagulación
cuando se dañan los vasos sanguíneos; hay aproximadamente 400.000
plaquetas/mL de sangre con una vida media de 9 a 11 días. Un ejercicio
extenuante incrementaría la agregabilidad plaquetaria de los equinos; sin
embargo, se ha demostrado una reacción significativamente menor de la
agregabilidad plaquetaria en caballos con una historia clínica de hemorragia
pulmonar inducida por el ejercicio que en aquellos caballos sin esos
antecedentes (Boffi, 2007).
18
pálido característico y por otras sustancias que se disuelven y quedan
suspendidas en el plasma mismo, como glucosa, grasas, aminoácidos,
vitaminas, hormonas, electrolitos y anticuerpos (Mutis y Ramírez, 2003). El
plasma, sin contenido de agentes coagulantes (proteínas) se denomina suero
(Boffi, 2007). De esta forma se distribuyen los componentes de la sangre (Fig.
1)
19
árabe) respectivamente. Si los niveles están por debajo o por encima de lo
anterior, indica que hay algún problema.
Perro 45 37-55
Caballo
Sangre Caliente 43 32 – 55
Sangre Fría 35 24 – 44
Bovino 35 24 – 46
Hembra Humana 42 ---
Varón Humano 47 ---
Fuente: Voigt Gregg l., Conceptos y técnicas hematológicas para técnicos veterinarios (2003).
Cuanto más se haya ejercitado el caballo, mayor será el Hto, hasta un máximo
de aproximadamente 0,65 a 0,70% con relación al valor normal. El Hto
aumenta con el ejercicio como consecuencia de la movilización esplénica de
los hematíes producidos por dicho ejercicio, y hay una menor proporción de
este incremento que es debido a la pérdida de líquidos producto de la
sudoración durante los ejercicios prolongados. En efecto, existe una relación
directa entre el valor de Hto y la velocidad de carrera hasta el máximo del Hto.
Lleva entre 30 y 60 segundos para que se produzca una movilización esplénica
como consecuencia de una mayor concentración de adrenalina circulante. El
bazo secuestra la mayoría de los glóbulos rojos dentro de los primeros 30
minutos, aunque la mayor caída del Hto se observa dentro de los primeros 5
minutos. (Boffi, 2007).
20
hemoglobina y un número de glóbulos rojos más elevado que otras razas, una
vez iniciado el entrenamiento para las carreras. El bazo equino reacciona a las
catecolaminas liberadas durante el ejercicio con la contracción y liberación de
un gran número de eritrocitos, esto causa una policitemia a corto plazo con el
objetivo de satisfacer una mayor demanda de oxigeno requerida por los
músculos activos (Boffi, 2007).
21
de las proteínas plasmáticas es el hígado y el segundo lugar de síntesis
principal es el sistema inmunitario (Duncan y Prasse´s, 2005).
Las proteínas presentes en el plasma son la albúmina, las globulinas y el
fibrinógeno. Las albúminas generalmente se utilizan para ligar hormonas
esteroideas, mientras que las globulinas en algunos casos forman los
anticuerpos usados en la defensa contra las enfermedades; y el fibrinógeno
que se disuelve en el plasma, es el responsable de la coagulación en presencia
del calcio. (Boffi, 2007). Las proteínas conceden al plasma su color amarillo
pálido característico. Las proteínas plasmáticas se sintetizan en el hígado y se
añaden al torrente sanguíneo cuando éste pasa por los capilares hepáticos
(Mutis y Ramírez, 2003).
1.3.1 Albúmina
22
En el síndrome nefrótico, esta propiedad es menor, y se pierde gran cantidad
de albúmina por la orina (Duncan & Prasse´s 2005). .
23
fluido intracelular. Después de este periodo aumentan las proteínas
plasmáticas totales, representado en la perdida continua de agua corporal por
la sudoración y la ventilación, con reducción subsecuente del volumen del
fluido intracelular. El estudio del hematocrito y de las proteínas plasmáticas del
equino (entre otros parámetros) determina un valor objetivo importante que
junto a la observación clínica del paciente ofrecen una información muy
valedera sobre el estado de hidratación del mismo. Es sabido que un
desequilibrio tanto en el estado hidroeléctrolitico, como en el equilibrio ácido
básico del equino es el responsable de una sucesión de alteraciones que se
desencadenan en forma de cascada que terminan alterando las grandes
funciones del caballo atleta, el rendimiento del mismo y algunas veces
responsables de estados irreversibles que llevan a la muerte del equino
(Flaminio and Rush, 1998).
24
aumentan más de 110 °F es una indicación de condiciones inapropiadas para
el entrenamiento exponiendo al caballo a un riesgo de cansancio (Ecker Gl,
1996).
La arteria pulmonar y carótida tienen el papel de promover la perdida de calor
desde la circulación pulmonar (Hodgson, 1993). Un 30% del calor corporal se
pueden disipar por mecanismos pulmonares a un 40% del consumo máximo de
oxigeno. Esta ruta de disipación de calor se puede comprometer por la
deshidratación debido al aumento de la viscosidad de la sangre. Una
frecuencia respiratoria aumentada puede ser una línea de defensa secundaria
y costo metabólica contra la hipertermia y también contribuye a la perdida de
fluidos. (Ecker Gl, 1996)
La deshidratación tiene un costo predictivo en un atleta. Durante el ejercicio
grandes volúmenes de sangre son requeridos por los músculos para el
intercambio gaseoso, para la suplencia de energía y la remoción de desperdicio
metabólico. La hipertermia resulta en un gasto cardíaco aumentado por una
frecuencia cardíaca aumentada debido al aumento de la circulación periférica
extra para la disipación de calor. Algunos caballos tienen un patrón de
respiración especial para la humedad y los días calurosos. Estos animales
tienden a actuar con una mayor frecuencia cardíaca, pero muestran una tasa
de recuperación normal a pesar de la inversión (frecuencia respiratoria mayor
que la frecuencia cardíaca) (Naylor, 1993).
Se recomienda evaluar la temperatura rectal y la habilidad de control de la
hipertermia y deshidratación. La disipación de calor puede ocasionar un fluido
de sangre inadecuado a los sistemas que lo requieren.
El ejercicio puede disminuir el fluido sanguíneo a otras áreas como el tracto
digestivo lo que induciría cólico. Con deshidratación continua la perfusión de
órganos vitales y músculos es reducida por un aumento de la viscosidad
sanguínea lo que disminuiría la actividad de trabajo, energía necesaria y
producción de calor. Si las indicaciones de peligro de fatiga no son
consideradas el cansancio puede ocurrir rápidamente.
El estado de hidratación se puede evaluar por el examen físico, la cantidad de
sudor producido, grave depresión y anorexia.
25
El sudor del caballo es hipertónico al plasma por iones de Na, K, Cl, Ca y Mg
CARLSON (1083), ROSE (1990). Durante el ejercicio prolongado esta
diferencia disminuye como la concentración de electrolitos séricos por la
perdida constante de fluido (Snow, 1991).
Algunos caballos no beben agua en las primeras 20 millas de recorrido por lo
que no es raro encontrar signos clínicos de deshidratación al inicio de la
carrera. (Ecker Gl, 1994, 1996). Interesantemente la ansiedad disminuye con
las millas recorridas y el consumo de agua tiende a aumentar como indicador
de mejor hidratación en los chequeos veterinarios tardíos.
26
2. DISEÑO METODOLÓGICO
2.1 LOCALIZACIÓN
2.3 VARIABLES
27
Además de estimar la correlación existente entre las características
evaluadas.
28
Escuela de Equitación del Ejército Nacional como continuación de la
investigación inicial del proyecto POLAR.
Para determinar las proteínas totales se utilizó el equipo STATFAX 3000, con
reactivo SPINREACT (Biuret) y T PROTEIN CAL (patrón primario) donde en
medio alcalino, las proteínas dan un intenso color violeta azulado en presencia
de sales de cobre; contiene yoduro como oxidante. La intensidad del color
formado es proporcional a la concentración de proteína total en la muestra.
29
Los caballos fueron sometidos (día 0, 15, 30, 45, 60) a los ejercicios de
entrenamiento, en horas de la mañana.
30
3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
3.1 HEMATOCRITO
Tabla 2. Días de muestreo con sus respectivos números de observaciones (N), medias (M) y
desviaciones estándar (DE) para hematocrito (%).
DIA N M ± DE *
Hematocrito
0 36 42.27± 4.58 A
15 36 43.61± 5.08 A
30 36 42.66± 5.01 A
45 36 42.86± 5.14 A
60 36 42.33± 3.78 A
* Letras diferentes indican diferencias significativas (P<0,05) por el Test de Tukey
31
los obtenidos por (Islas et al,. 2007), los cuales en una evaluación realizada en
caballos mestizos pura sangre ingles, sometidos a entrenamiento de
resistencia, encontraron que existen diferencias significativas (P≤0,05) entre T2
(5 minutos post ejercicio) y T3 (15 minutos post ejercicio) con el tiempo de
reposo. No obstante; también fueron diferentes a los resultados presentados
por (Paz, 2007), quien encontró que entre T2 (5 minutos post ejercicio) y T3 (15
minutos post ejercicio) se dieron diferencias significativas (P ≤ 0,05). Por otro
lado, (Galindo-Orozco, 2007), encontró que no hubo diferencias
estadísticamente significativas entre las muestras tomadas en reposo y las que
se tomaron una y seis horas después del ejercicio.
Tabla 3. Horario del muestreo: reposo (T1), inmediatamente después del ejercicio (T2), seis
horas después del ejercicio (T3), con sus respectivos números de observaciones (N), medias
(M) y desviaciones estándar (DE) para hematocrito (%).
HORA N M±DE*
Hematocrito
T1 60 41.24 ± 4.14 B
T2 60 43.66 ± 4.59 A
T3 60 43.33 ± 5.09 A
*Letras diferentes indican diferencias significativas (P<0,05) por el Test de Tukey
32
sangre se da por la contracción esplénica, debido a la respuesta propia del
organismo frente al estrés fisiológico o para este caso el estrés producido por el
ejercicio.
Conforme con Inoue et al, 2005, citado por Galindo-Orozco, 2007, existe una
relación directa entre el valor del hematocrito, la velocidad del entrenamiento y
las distancias recorridas durante las pruebas, llevando aproximadamente entre
30 y 60 segundos para que se liberen catecolaminas y se de la contracción del
bazo, haciendo que se liberen los hematíes a la circulación sanguínea para su
utilización por parte del sistema nervioso central y de la musculatura
esquelética.
Los valores encontrados para proteínas totales (Tabla 4), muestran las
variaciones estadísticamente significativas entre los valores obtenidos en los
diferentes días de muestreo, variando de 4.92± 0.93 g/dL hasta 6.10± 0.83
g/dL. Estos resultados difieren de los encontrados por (Galindo–Orozco, 2007),
quien trabajando caballos Pura Sangre Árabes, realizó tres evaluaciones en
diferentes tiempos, encontró que existió diferencia significativa entre la primera
prueba y la última (día 0 y día 90). Sin embargo entre las dos ultimas pruebas
(día 45 y día 90) no hubo diferencias significativas. Al igual que la albúmina,
estas variaciones pueden deberse más a condiciones de manejo y ambientales
que a las propias del animal. Sin embargo, según Harkins et al., 1993 y
Pellegrini et al., 2000, citados por Galindo-Orozco, 2007, recomiendan
relacionar otros factores que pueden interferir en los resultados hematológicos
como son la conducta y temperamento del animal, edad, tipo de entrenamiento,
nutrición, hora de la toma de la muestra, transporte adecuado hacia el
laboratorio de las muestras, análisis e interpretación laboratorial.
33
Tabla 4. Días de muestreo con sus respectivos números de observaciones (N), medias (M) y
desviaciones estándar (DE) para proteína total (g/dL)
DIA N M ± DE*
Proteína total
0 36 6.10± 0.83 A
15 36 5.83± 1.06 A B
30 36 5.61± 0.64 A B
45 36 4.92± 0.93 C
60 36 5.40± 0.91 B C
*Letras diferentes indican diferencias significativas (P<0,05) por el Test de Tukey
Tabla 5. Horario del muestreo: reposo (T1), inmediatamente después del ejercicio (T2), seis
horas después del ejercicio (T3), con sus respectivos números de observaciones (N), medias
(M) y desviaciones estándar (DE) para proteína total (g/dL)
HORA N M±DE*
Proteína total
T1 60 5.53 ± 1.02 A
T2 60 5.66 ± 1.09 A
T3 60 5.54 ± 0.98 A
*Letras diferentes indican diferencias significativas (P<0,05) por el Test de Tukey.
Según Islas et al. 2007, los equinos no presentan cambios significativos en las
proteínas plasmáticas después de los ejercicios realizados, lo que se debe a
que los caballos fueron sometidos a un ejercicio de corta duración y de
intensidad moderada, a diferencia de lo expuesto por Adams and Sojka (1999),
quienes sustentan que en pruebas de resistencia (enduro) de larga duración se
observa un aumento de la concentración de proteínas plasmáticas debido a
deshidratación.
34
De esta manera con el experimento realizado, se pudo comprobar que las
condiciones de manejo pueden influir en el resultado de las proteínas
plasmáticas totales, ya que se observo diferencias significativas entre los días,
pero no entre las tomas de muestras en un mismo día; esto puede estar dado
principalmente por factores externos como la temperatura, la disponibilidad de
agua en las caballerizas, tipo de alimentación, ubicación geográfica entre otras.
3.3 ALBÚMINA
Tabla 6. Días de muestreo con sus respectivos números de observaciones (N), medias (M) y
desviaciones estándar (DE) para albúmina (g/dL)
DIA N M ± DE*
Albúmina
0 36 3.22± 0.75 A B
15 36 2.88± 0.69 B C
30 36 3.32± 0.64 A
45 36 2.73± 0.55 C
60 36 2.64± 0.52 C
*Letras diferentes indican diferencias significativas (P<0,05) por el Test de Tukey
35
Al no existir estudios acerca de los parámetros estándar de la concentración
albúmina en la sangre de los equinos, se dificulta realizar una comparación
entre el por qué los valores bajan en los días 45 y 60 con relación a los
iníciales, y así arrojar un resultado más claro; de aquí la importancia de
establecer parámetros y rangos específicos para esta especie, llevando a la
generación de nuevas rutinas de alimentación, entrenamiento y condiciones
ambientales que mejoren la condición de los animales.
Es importante resaltar que durante las pruebas realizadas no se observaron
diferencias estadísticamente significativas entre los valores de albúmina,
tomados en diferentes tiempos en un mismo día (Tabla 7), sin embargo, los
valores fueron menores en el reposo y aumentaron un poco después del
ejercicio. Este aumento puede deberse muy posiblemente a la necesidad del
organismo de reponer la energía utilizada por medio de los ácidos grasos, los
cuales son transportados por la albúmina para ser después degradados en el
tejido muscular, produciendo energía (Duren, 2000)
Tabla 7. Horario del muestreo: reposo (T1), inmediatamente después del ejercicio (T2), seis
horas después del ejercicio (T3), con sus respectivos números de observaciones (N), medias
(M) y desviaciones estándar (DE) para albúmina (g/dL).
HORA N M±DE*
Albúmina
T1 60 2.89 ± 0.66A
T2 60 2.92 ± 0.68 A
T3 60 3.07 ± 0.71 A
*Letras diferentes indican diferencias significativas (P<0,05) por el Test de Tukey
36
4. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
37
BIBLIOGRAFÍA
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