Sei sulla pagina 1di 30

GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO:

Responsables del documento

<DMD 202 – Microbiología y laboratorio>


Elaborado / Actualizado por: Revisado por: Aprobado por:

Área responsable: FACULTAD DE ODONTOLOGÍA

Fecha de Implementación: 2018-09-24 Fecha de Vigencia: 2019-03-20

Nombre: ALEXANDRA PAVON Nombre: Nombre:


Cargo: DOCENTE Cargo: Cargo:
Fecha: 2018-06-01 Fecha: Fecha:
Contenido
1 PRESENTACIÓN – PROPÓSITO ........................................................................ 3

2 RESULTADOS DE APRENDIZAJE ...................................................................... 3

3 INSTRUCCIONES Y MEDIDAS DE SEGURIDAD ................................................ 3

4 PRÁCTICAS DE LABORATORIO......................................................................... 5

4.1 Practica No. 001 – Nombre de la práctica – No. Sesiones xx ...................... 5

4.1.1 Tema a desarrollar ........................................................................................... 5


4.1.2 Objetivos de la práctica .................................................................................. 5
4.1.3 Alcance ............................................................................................................... 5
4.1.4 Requisitos previos a la realización de la práctica ................................... 5
4.1.5 Aparatos, equipos e instrumentos .............................................................. 6
4.1.6 Parámetros, magnitudes y rangos a ser determinados¡Error! Marcador
no definido.
4.1.7 Materiales y reactivos ..................................................................................... 6
4.1.8 Recursos adicionales ....................................... ¡Error! Marcador no definido.
4.1.9 Descripción del procedimiento..................................................................... 6
4.1.10 Datos a ser registrados y el método de análisis y de presentación de
resultados. .......................................................................... ¡Error! Marcador no definido.
4.1.11 Referencias cruzadas ....................................... ¡Error! Marcador no definido.
4.1.12 Referencias normativas ................................... ¡Error! Marcador no definido.
5 BIBLIOGRAFÍA..................................................................................................... 7

6 MECANISMOS DE EVALUACIÓN Y ANEXOS .................................................... 7

7 CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES ........................................................ 9

Responsables del documento

Elaborado / Actualizado por: Revisado por: Aprobado por:

Nombre: ALEXANDRA PAVON Nombre: Nombre:


Cargo: DOCENTE Cargo: Cargo:
Fecha: 2018-06-01 Fecha: Fecha:
1 PRESENTACIÓN – PROPÓSITO
La presente Guía para Prácticas de Microbiología ha sido creada con el propósito de facilitar a
Los estudiantes de la asignatura DMD 202 la fácil utilización de materiales, equipos y métodos
a utilizar en el Laboratorio de Microbiología, esta información estará acorde a los temas,
objetivos y resultados de aprendizaje definidos.

En este documento se incluye el proceso de estudio en el laboratorio de experimentación e


investigación, así mismo de ser necesario se cuenta con el apoyo de la Clínica Integral de la
Facultad de Odontología, con los respectivos recursos y resultados esperados, para que el
estudiante pueda desarrollar su práctica-taller y la elaboración de sus evidencias de
aprendizaje, que serán evaluadas con las rúbricas que constan en los anexos.

La Guía presenta una secuencia donde es específica cada sesión de prácticas en laboratorio
con su respectivo proceso didáctico y formativo.

2 RESULTADOS DE APRENDIZAJE

1. Interpreta los conocimientos básicos de la microbiología bucal, componentes


esenciales de la carrera de odontología con una visión global.

2. Clasifica las diversas formas microbianas según su morfología y composición


bacteriana, causantes de enfermedades o patologías que afectan al sistema
estomatognático.

3. Usa el instrumental, equipos, herramientas y los materiales necesarios de uso


odontológico y su aplicación en laboratorio de microbiología

4. Describe el instrumental, equipos, herramientas y los materiales necesarios de uso


odontológico y su aplicación en laboratorio de microbiología

3 INSTRUCCIONES Y MEDIDAS DE SEGURIDAD


3.1 SEGURIDAD EN EL LABORATORIO
Durante el desarrollo de las prácticas de laboratorio es necesario precautelar la
integridad de los usuarios (docentes, estudiantes, investigadores, asistentes,
personal de apoyo y limpieza), puesto que un accidente puede producirse por
negligencia, descuido o por situaciones fuera de control. Cada persona es
responsable de resguardar la seguridad de los laboratorios y el correcto uso de los
bienes de la Universidad.

3.2 PRECAUCIONES BÁSICAS

• Localice los dispositivos de seguridad más próximos como extintores, botiquín,


lavaojos y salidas de emergencia.
• No se pueden realizar prácticas no establecidas por el docente.
• Lea atentamente el manual de la práctica correspondiente. Siempre siga las
indicaciones dictadas por el docente y consulte cualquier inquietud que

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


tenga.
• Los trabajos en el laboratorio deben siempre estar acompañados de
alguien, no en solitario.
• No juegue ni corra dentro del laboratorio.
• Comunique al docente si tiene alguna incompatibilidad con algún reactivo
químico, sufre de asma, alergia o de alguna patología.

3.3 HABITOS Y COSTUMBRES

• Está prohibido fumar, beber o ingerir alimentos dentro del laboratorio.


• Lávese las manos con frecuencia a la entrada y salida del laboratorio;
• Mantenga limpia y en orden su mesa de trabajo con responsabilidad. (Mantener
libre de libros, maletas, ropa, etc.)
• No inhale o pruebe productos químicos.
• No inhale directamente ningún químico, en caso de ser necesario dirija un
poco de vapor con la mano hacia su nariz.
• Infórmese sobre el uso de materiales y equipos, cualquier duda diríjase al
docente o hacia una persona calificada.
• Se le informará sobre el tipo de desechos generados y el método de eliminación de
los mismos.

3.4 VESTIMENTA
• Utilice mandil que cubra la mayor parte de su cuerpo y zapatos cerrados.
• En caso de trabajar con equipos, no lleve prendas sueltas o que cuelguen
(bufandas, corbatas, etc.), y/o bisutería que pueda engancharse.
• Recójase el cabello de ser el caso.

3.5 EQUIPOS DE PROTECCIÓN INDIVIDUAL


• Es responsabilidad suya la utilización de los equipos de protección
individual.
• Use guantes, mascarilla y gafas siempre que se encuentre en un laboratorio
o que esté trabajando con reactivos y/o materiales que necesiten manipulación
especial. Infórmese o pregunte al docente.

3.6 PRECAUCIONES EN LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

• Lave bien sus manos con jabón y gel antibacterial.


• Usar guantes, mascarillas y gafas de seguridad al momento de manipular muestras
biológicas, para evitar contaminaciones.
• Realice los procedimientos con precaución para evitar salpicaduras o
esparcimiento de microrganismos.
• Procurar mantener cerradas las válvulas de los mecheros hasta que se inicie la
práctica y al salir asegurarse de cerrarlas todas.
• Manipular con cuidado los microscopios y dejarlos limpios luego de usarlos, con el lente
de 4x, condensador abajo, diafragma abierto, cabezal virable y tela protectora.
• Si se van a observar imágenes con el lente de 100x siempre utilizar aceite de inmersión,
luego utilizar papel limpiador de microscopio destinado para el aseo de este lente y
dejar el microscopio como se detalla en el punto anterior.
• Todo material cortopunzante debe ser colocado en los contenedores

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


adecuados para evitar accidentes.
• Descontamine la mesa de trabajo al final de la práctica, con una solución de Hipoclorito
de Sodio al 10%.
• Colocar los portaobjetos y cubreobjetos sucios en los recipientes con hipoclorito de sodio.
• Todo material contaminado debe ser puesto en los contenedores respectivos
según las normas de bioseguridad, para posteriormente ser
descontaminados.

4 PRÁCTICAS DE LABORATORIO
4.1 Practica No. 001 – Normas básicas de trabajo e instrumental básico del
laboratorio de microbiología – No. Sesiones 03
4.1.1 Tema a desarrollar

La protección de la vida dentro y fuera del laboratorio se logra a través del cumplimiento de
normas y medidas que reducen los factores de riesgo. El riesgo biológico es el que se debe
controlar principalmente dentro del laboratorio de microbiología clínica. La infraestructura y
equipamiento estandarizado de cada uno de los niveles de bioseguridad están adecuados para
que el personal capacitado pueda tener un acercamiento y manejo de los microorganismos sin
provocar infecciones.

4.1.2 Objetivos de la práctica

 Conocer los principios básicos, actitudes y comportamientos de bioseguridad, para


realizar actividades dentro del laboratorio de Microbiología.
 Conocer el uso adecuado de los diferentes equipos y materiales del laboratorio.
 Aprender la colocación de barreras de protección y relacionarlas con la práctica
odontológica.

4.1.3 Alcance

En esta práctica se incluirá las normas de bioseguridad que se aplican en el laboratorio de


Microbiología. Así como normas a seguir durante la manipulación de los diferentes materiales
y equipos que puede encontrar en el laboratorio.

4.1.4 Requisitos previos a la realización de la práctica

El estudiante deberá completar como trabajo autónomo:


Lectura del capítulo 31, Págs. 526 - 531 (Negroni, 2009). Normas básicas de trabajo e
instrumental básico del laboratorio de microbiología

Los alumnos analizaran el vídeo antes de clase:


Seguridad en el Laboratorio-merck) subido en aula virtual:
Link: https://www.youtube.com/watch?v=X09tFwCCssY

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


4.1.5 Aparatos, equipos e instrumentos

Aparatos, equipos e Cantidad Requisitos técnicos


instrumentos
Microscopio 1 SOLA PARA QUE LOS ESTUDIANTES OBSERVEN
Mechero bunsen 1

4.1.6 Materiales y reactivos

 Botiquín de primeros auxilios: con todos los elementos médicos


 Basurero con identificación
 Bolsas de basura rojas
 Vaso de precipitación
 Probetas
 Matraz Erlenmeyer
 Tubos de ensayo
 Cajas petri
 Portaobjetos
 Cubreobjetos
 Gradillas

El estudiante debe traer:


 Mandil blanco manga larga
 Guantes de látex
 Mascarilla
 Gorro
 Gafas de protección

4.1.7 Descripción del procedimiento

El estudiante ingresa con el mandil al laboratorio, el docente realizará una explicación


introductoria práctica indicando algunos de los principales factores de riesgo por el incorrecto
uso de las barreras de protección, enfatizando su importancia en el laboratorio de
Microbiología y su relación con la consulta odontológica; se hará una explicación,
reconocimiento y uso adecuado del instrumental y equipos usados en el Laboratorio de
Microbiología y el debido comportamiento dentro del mismo.

Durante la práctica los estudiantes realizarán un reconocimiento de las instalaciones del


laboratorio docente para determinar el nivel de bioseguridad que se debe aplicar, llenarán las
actividades en la guía de laboratorio indicadas por el docente y realizarán un mapa conceptual
o mental sobre los niveles de Bioseguridad, detallando el tipo de muestras y microorganismos
que se puede analizar en cada uno. Manera adecuada de colocarse y retirarse la vestimenta
para trabajar en el laboratorio y las características físicas e infraestructura de los laboratorios
según el nivel de bioseguridad.
Una vez terminado se realizará un debate de todos los temas tratados en clase, los estudiantes
se colocaran las barreras de protección y mediante forma aleatoria se observarán falencias en

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


la colocación de las mismas, empezaran a reconocer los materiales y equipos a utilizar, luego
se procederá a realizar gráficos de todo lo aprendido, entendiendo la importancia de mantener
la bioseguridad en todo momento y se despejaran todo tipo de dudas.

5 BIBLIOGRAFÍA
Referencias Principales.

1. Negroni M. (2010). Microbiología estomatológica. (2a ed.). Buenos Aires, Argentina:


Panamericana.
2. Nelson, A. y FOCUS Workgroup. (2008). Niveles de bioseguridad en el
Laboratorio. Focus on Field Epidemiology en Español. 5(1), 1-6.
https://nciph.sph.unc.edu/focus/vol5/issue1/5-1BiosafetyLevels_espanol.pdf

6 MECANISMOS DE EVALUACIÓN Y ANEXOS


La evaluación en esta práctica está dada por la asistencia al laboratorio, la presentación de
todo el material, la adecuada presencia, las actividades realizadas y la presentación del trabajo
de laboratorio que será evaluado todo con una nota sobre 10.

Actividad #1:

● Lea individualmente las normas de bioseguridad.


Normas de Bioseguridad en el Laboratorio
Las siguientes normas están establecidas para proteger tu salud y disminuir los riesgos
de contaminación de los materiales y productos del laboratorio, para evitar accidentes
que pongan en riesgo su integridad y la de personas ajenas al trabajo del laboratorio,
así como al funcionamiento de los equipos del laboratorio.
Atuendo
● Usar mandil y guantes para realizar cualquier actividad dentro del laboratorio
● Llevar zapatos cerrados y evitar el uso de ropa que deje la piel al descubierto y fuera
de la protección del mandil
● No abandonar el laboratorio con el mandil puesto y no usarlo de saco o suéter para
salir a la calle y otros espacios públicos
● Trabajar siempre con el cabello recogido
Comportamiento
● No correr dentro del laboratorio
● No comer, fumar o tomar bebidas, masticar chicles y golosinas
● No maquillarse, ni cepillar el cabello
● No emplear ningún equipo de laboratorio (refrigeradores, horno microondas) para
almacenar o preparar alimentos
● No almacenar material biológico vivo
● No se permite la entrada de mascotas
● Cualquier accidente (material roto, derrame de sustancias, cortes, quemaduras)
debe ser informado inmediatamente al docente responsable de los laboratorios
● Los usuarios no podrán invitar a otras personas a que desarrollen sus propios
proyectos o prácticas sin previa autorización del docente responsable del laboratorio

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


Materiales, Reactivos y Equipos
● Dejar todo lo que se use en su sitio
● No sacar ningún material, reactivo o equipo del laboratorio
● Verificar que se cuente con todas los materiales y reactivos antes de comenzar
cualquier experimento
● Los usuarios no podrán tomar temporal o permanentemente los materiales o
reactivos de otros usuarios, sin previo aviso
● Etiquetar todos los frascos en los que se deposite cualquier sustancia. El etiquetado
debe incluir: Nombre de la sustancia, Nombre de quien depositó la sustancia y fecha
● Antes de destapar cualquier frasco se debe leer su etiquetado
● No dejar destapados frascos que contengan sustancias químicas, tubos, puntas y
cualquier otro material estéril, o material potencialmente tóxico
● Cuando se destape un frasco la tapa debe ser colocada sobre la mesa boca arriba
para evitar contaminación del área de trabajo
● No oler directamente el contenido de ningún frasco
● No degustar el contenido de ningún frasco
● No utilizar recipientes vacíos de sustancias tóxicas, inflamables o irritantes de
mucosas y piel para almacenar otras sustancias químicas o material biológico
● No manipular sustancias tóxicas, irritantes, inflamables, cancerígenas o mutagénicas
fuera de las áreas destinadas para estos usos
● Todo el material y reactivos se almacenarán estrictamente en los espacios
destinados para ello
● El material de vidrio roto debe ser depositado inmediatamente en el contenedor y
área destinada para este fin
● Todo el equipo y material de vidrio utilizado debe entregarse perfectamente limpio
● Desechar los residuos tóxicos (tanto sustancias como materiales) únicamente en las
áreas destinadas para ello. Preguntar antes de desechar soluciones por la alcantarilla
● No operar equipos cuyo manejo esté autorizado únicamente al docente responsable
del laboratorio
● Solicitar asesoría para el manejo adecuado de los equipos
● En caso de que un equipo se haya descompuesto debido al mal uso y manejo, el
usuario deberá informar inmediatamente al responsable del laboratorio
Áreas individuales de trabajo
● Mantener limpias y ordenadas las áreas que ocuparon durante su trabajo
● Limpiar el espacio personal de trabajo antes y después de haber terminado los
experimentos
● Mantener cerradas las puertas del laboratorio
● Mantener en funcionamiento óptimo llaves de agua y extintores
● Mantener libres de obstáculos las salidas normales y de emergencia
● Permitir el libre paso entre las mesas de trabajo y las salidas del laboratorio
● Ante una situación de urgencia mantener la calma y abandonar tranquilamente el
laboratorio, sin correr, empujar o gritar
Los usuarios que infrinjan alguna de las normas descritas serán amonestados a criterio
del docente responsable del laboratorio.

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


Actividad # 2:
Forme grupos de 5 personas. Conversen y relacionen las normas de Bioseguridad en el
laboratorio leídas anteriormente que deberían tomar en cuenta dentro de la clínica
Odontológica. Anote 4 normas que serían comunes a ambos lugares y 1 norma que
solo se aplicaría en la clínica Odontológica
Normas comunes en el laboratorio y la clínica Odontológica:
 ______________________________________________________________
 ______________________________________________________________
 ______________________________________________________________
 _______________________________________________________________
Norma que se aplica a la clínica Odontológica:
 ___________________________________________________

TAREA PARA EL AULA VIRTUAL: el estudiante deberá subir la tarea al aula virtual y
entregar el respaldo físico

Actividad # 3:
Lea el documento adjunto y realice un mapa conceptual o mapa mental que incluya las
ideas principales respecto a los niveles de bioseguridad:
Nelson, A. y FOCUS Workgroup. (2008). Niveles de bioseguridad en el Laboratorio.
Focus on Field Epidemiology en Español. 5(1), 1-6. Recuperado el 16 de febrero de
2016 de
https://nciph.sph.unc.edu/focus/vol5/issue1/5-1BiosafetyLevels_espanol.pdf

Actividad # 4: IDENTIFIQUE

De forma individual, identifique cada uno de los materiales y equipos de


laboratorio que se mencionan en la lista a continuación, explique usos y realice
el grafico correspondiente.

Material de laboratorio

Nombre GRAFICO Usos

Probetas

Vaso de precipitación (o de
precipitados)

ErlenMeyer (o matraz)

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


Matraz aforado

Cajas Petri

Tubos de ensayo

Gradilla

Pinzas

Portaobjetos y
Cubreobjetos

Mechero de Bunsen

Piseta

Equipos de Laboratorio

Nombre GRAFICO Utilidad

Microscopio

Baño María

Centrífuga

Incubadora

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


Autoclave

Balanzas

Actividad # 5: INVESTIGUE

1. ¿Explique qué representan los siguientes símbolos?


SIMBOLO SIGNIFICADO

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


7 CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
En todos los casos, el estudiante deberá incluir las conclusiones y recomendaciones en los
métodos de presentación de los resultados establecidos para cada práctica. Estas deberán
estar relacionadas con los hallazgos o resultados de cada práctica con base en fundamentos
técnico – científicos.

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


8 Practica No. 002 – Microscopía y Métodos de Observación de los
microorganismos – No. Sesiones 03
8.1.1 Tema a desarrollar

El microscopio es un instrumento de ampliación de imágenes y de gran utilidad en el


laboratorio de microbiología, pues nos permite identificar organismos y elementos pequeños
que a simple vista no pueden ser observados. Dependiendo de los procedimientos usados para
identificar bacterias, inclusiones víricas en tejidos o parásitos hay varias técnicas de
microscopía. Pero existen dos tipos básicos de microscopio: Simple es aquel que utiliza una
sola lente biconvexa para ampliar la imagen y los detalles de los objetos observados, siendo el
microscopio más básico, y el compuesto que utiliza dos lentes separados por lo cual el
resultado es un mayor aumento. El microscopio compuesto está constituido por tres sistemas:
óptico, mecánico e iluminación.

8.1.2 Objetivos de la práctica

 Identificar las partes fundamentales del microscopio óptico y sus funciones.


 Fortalecer el manejo y los cuidados al usar el microscopio óptico.
 Observar preparaciones en fresco y con coloración de bacterias.

8.1.3 Requisitos previos a la realización de la práctica

Trabajo Autónomo:

Previo a la clase el estudiante deberá:

Leer el capítulo 31 Microscopia


2da parte Págs. 533-542(Negroni 2009)
Los alumnos analizaran el vídeo antes de clase:

Observación de vídeo: Técnicas básicas en el laboratorio de Microbiología.


Microscopio óptico
https://www.youtube.com/watch?v=0Tunrrm3OlM

Antes de comenzar el estudiante deberá dominar lo siguiente:

Uso y Manejo del microscopio óptico compuesto

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


PARTES DE UN MICROSCOPIO ÓPTICO

Sistema óptico

 OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador. Amplía la imagen del objetivo
 OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de ésta
 CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación
 DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador
 FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador

Sistema mecánico

 SOPORTE: Mantiene la parte óptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo
 PLATINA: Lugar donde se deposita la preparación
 CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular, binocular, etc
 REVÓLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los
 objetivos
 TORNILLOS DE ENFOQUE: Macrométrico (aproxima el enfoque) y micrométrico (consigue
el enfoque correcto)

MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO

1. Colocar el objetivo de menor aumento en posición de empleo y bajar la platina


completamente. Si el microscopio se guardó correctamente en el uso anterior, ya debería
estar en esas condiciones

2. Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas

3. Comenzar la observación con el objetivo de 4x o colocar el de 10 aumentos (10x) si la


preparación es de bacterias

4. Para realizar el enfoque:

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


a. Acercar al máximo la lente del objetivo a la preparación, empleando el tornillo
macrométrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a través del ocular, ya
que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparación pudiéndose dañar
alguno de ellos o ambos

b. Mirando, ahora sí, a través de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la


preparación con el macrométrico y, cuando se observe algo nítida la muestra, girar el
micrométrico hasta obtener un enfoque fino

5. Pasar al siguiente objetivo. La imagen debería estar ya casi enfocada y suele ser suficiente
con mover un poco el micrométrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo
se perdió por completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y
repetir la operación desde el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la
preparación y por ello es fácil que ocurran dos tipos de percances: incrustarlo en la
preparación si se descuidan las precauciones anteriores y mancharlo con aceite de
inmersión si se observa una preparación que ya se enfocó con el objetivo de inmersión

6. Empleo del objetivo de inmersión:

a. Bajar totalmente la platina

b. Subir totalmente el condensador para ver claramente el círculo de luz que nos indica la
zona que se va a visualizar y donde habrá que echar el aceite

c. Girar el revólver hacia el objetivo de inmersión dejándolo a medio camino entre éste y
el de 40x

d. Colocar una gota mínima de aceite de inmersión sobre el círculo de luz

e. Terminar de girar suavemente el revólver hasta la posición del objetivo de inmersión

f. Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la lente toque
la gota de aceite. En ese momento se nota como si la gota ascendiera y se adosara a la
lente

g. Enfocar cuidadosamente con el micrométrico. La distancia de trabajo entre el objetivo


de inmersión y la preparación es mínima, aún menor que con el de 40x por lo que el
riesgo de accidente es muy grande

h. Una vez se haya puesto aceite de inmersión sobre la preparación, ya no se puede


volver a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se mancharía de aceite. Por tanto, si
desea enfocar otro campo, hay que bajar la platina y repetir la operación desde el paso
3

i. Una vez finalizada la observación de la preparación se baja la platina y se coloca el


objetivo de menor aumento girando el revólver. En este momento ya se puede retirar

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


la preparación de la platina. Nunca se debe retirar con el objetivo de inmersión en
posición de observación

j. Limpiar el objetivo de inmersión con cuidado empleando un papel especial para óptica.
Comprobar también que el objetivo 40x está perfectamente limpio

MANTENIMIENTO Y PRECAUCIONES

1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posición de
observación, asegurarse de que la parte mecánica de la platina no sobresale del borde de la
misma y dejarlo cubierto con su funda

2. Cuando no se está utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda
para evitar que se ensucien y dañen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe
guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del polvo

3. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente
con un papel de filtro o, mejor, con un papel de óptica

4. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se está utilizando el microscopio

5. Después de utilizar el objetivo de inmersión, hay que limpiar el aceite que queda en el
objetivo con pañuelos especiales para óptica o con papel de filtro (menos recomendable). En
cualquier caso se pasará el papel por la lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha
llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de alcohol-
acetona (7:3) o xilol. No hay que abusar de este tipo de limpieza, porque si se aplican estos
disolventes en exceso se pueden dañar las lentes y su sujeción

6. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macrométrico, micrométrico,


platina, revólver y condensador)

7. El cambio de objetivo se hace girando el revólver y dirigiendo siempre la mirada a la


preparación para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de objetivo
agarrándolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se está observando a través del ocular

8. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algún líquido,
secarlo con un paño. Si se mancha de aceite, limpiarla con un paño humedecido en xilol

9. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesión práctica y, al


acabar el curso, encargar a un técnico un ajuste y revisión general de los mismos

La unidad básica de longitud que se utiliza con el microscopio de luz es el micrómetro, aunque
existen otras medidas que también pueden usarse:

1000 µm = 1mm
1000 nm = 1 µm
10000 Å = 1 µm

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


A medida que el poder de amplificación o la magnificación del microscopio aumentael espacio
observado bajo el campo óptico disminuye

8.1.4 Aparatos, equipos e instrumentos

Aparatos, equipos e Cantidad Requisitos técnicos


instrumentos
Microscopios Ópticos 12
Olimpus CX21

8.1.5 Materiales y reactivos

 Placas de bacterias 30 unidades: con diferentes morfologías bacterianas, Gram


positivas y Gram negativas
 Aceite de inmersión

El estudiante debe traer:


 Mandil blanco manga larga
 Guantes de látex
 Mascarilla
 Gorro
 Gafas de protección

8.1.6 Descripción del procedimiento

El estudiante ingresa con el mandil al laboratorio, el Docente realizará una explicación


introductoria de la práctica indicando algunos de los principales factores de riesgo por el
incorrecto, uso irresponsable del microscopio, su correcta manipulación y los cuidados que se
deben tener, para ello se observará todos los componentes ópticos, mecánicos y lumínicos del
microscopio.
Una vez finalizada la intervención del docente se despejan dudas del tema tratado y empieza
el estudiante a reconocer las partes del microscopio, de forma individual; procederá a realizar
el enfoque de varias placas microbiológicas identificando estructuras bacterianas. Se realizará
la observación de preparaciones fijas proporcionadas por el docente. El estudiante buscara y
realizara el enfoque de estructuras con morfología definida en la muestra con lente 4x, colocará
una gota de aceite y pasará a observar en100x.

8.1.7 Referencias cruzadas

Ver referencia Practica N° 001 Normas básicas de trabajo e instrumental básico del laboratorio
de microbiología

9 BIBLIOGRAFÍA
Referencias Principales.

1. Negroni M. (2010). Microbiología estomatológica. (2a ed.). Buenos Aires, Argentina:


Panamericana.

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


10 MECANISMOS DE EVALUACIÓN Y ANEXOS
La evaluación en esta práctica está dada por la asistencia al laboratorio, la presentación de
todo el material, la adecuada presencia, las actividades realizadas y la presentación del trabajo
de laboratorio que será evaluado todo con una nota sobre 10.

 Lección sobre el tema: el estudiante deberá traer impresa la rúbrica para la evaluación
PRACTICA N°:
NOMBRE :
PARALELO:
poco
3 1 no
5 Excelente 4 MUY BUENO satisfactorio
CRITERIOS satisfactorio satisfactorio
2
9-10 8-7 6-5 4-3 3-1
Logra
Enfoque con Logra enfocar enfocar No logra
Logra enfocar con los No ubica
los objetivos solamente con tres solamente enfocar con
lentes objetivos: 4x, ningún lente
de 4x, 10x, y de los cuatro lentes con dos ningún lente
10x, 40x y 100x. objetivo
40x objetivos. lentes objetivo.
objetivos.
Limpia el
Limpia el
lente de
lente de
100x con el
100x con el
papel
Limpia el lente de Limpia el lente de papel
correcto,
100x con el papel 100x con el papel incorrecto,
Limpieza del baja la
correcto, baja la correcto, baja la pero no baja
microscopio intensidad No realiza la
intensidad de luz y la intensidad de luz y la la intensidad
al terminar de luz pero limpieza del
platina, y deja el platina, pero no deja de luz ni la
la no baja la microscopio
microscopio en el el microscopio en el platina, ni
observación platina ni
lente de menor lente de menor deja el
deja el
aumento. aumento. microscopio
microscopio
en el lente
en el lente
de menor
de menor
aumento.
aumento.

Ubica Ubica
Ubica partes del No ubica
Ubica todas las algunas las algunas
microscopio y partes del
partes del partes del partes del
Partes del funciones de todas microscopio,
microscopio, conoce microscopio, microscopio,
microscopio sus partes, pero no y no conoce
su función y maneja y conoce y no conoce
maneja la función de
correctamente algunas la función de
correctamente todas
funciones todas.

TAREA PARA EL AULA VIRTUAL: el estudiante deberá subir la tarea al aula virtual y
entregar el respaldo físico

 Resolver el siguiente cuestionario:


1. Investigar sobre el trasplante de células madre dentales
2. Explicar ¿cuál es la función del azul de metileno en el área de la salud?

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


11 CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
En todos los casos, el estudiante deberá incluir las conclusiones y recomendaciones en los
métodos de presentación de los resultados establecidos para cada práctica. Estas deberán
estar relacionadas con los hallazgos o resultados de cada práctica con base en fundamentos
técnico – científicos.

12 Practica No. 003 – Métodos de observación de los microorganismos – No.


Sesiones 04
12.1.1 Tema a desarrollar

Para el estudio de muestras microbiológicas es necesario realizar el examen microscópico que


nos proporciona datos como la presencia de bacterias, su morfología, movilidad y
características tintoriales y estructurales.

12.1.2 Objetivos de la práctica

 Conocer los métodos de observación de los microorganismos


 Identificar los materiales e instrumentos del laboratorio para su manipulación
 Realizar una observación en fresco de las muestras, extendido, fijación, con el
conocimiento de las técnicas de tinción y enfoque de placas.

12.1.3 Requisitos previos a la realización de la práctica


Trabajo Autónomo:

Previo a la clase el estudiante deberá:


Leer el capítulo 31, Parte 3, Métodos de observación de los microorganismos
Págs. 544-549(Negroni, 2009)

Revisar vídeo antes de la clase:


Técnicas Básicas en el Laboratorio de Microbiología. Tinciones
Link:
https://www.youtube.com/watch?v=1Zu6HHcEXSA&index=3&list=PL4EBA24D9040C2A18
Revisar video antes de la clase: Tinción de Gram.
Link: https://www.youtube.com/watch?v=FceD8FFhuew

12.1.4 Aparatos, equipos e instrumentos

Aparatos, equipos e Cantidad Requisitos técnicos


instrumentos
Microscopios Ópticos 12
Olimpus CX21
Placas microbiológicas 30
preparadas

12.1.5 Materiales y reactivos

Los materiales a utilizarse son por cada sesión de práctica del laboratorio

✓ Placas porta objetos

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


✓ Placas cubreobjetos
✓ 1 Caja de Fósforos
✓ 1 caja de Palillos de dientes
✓ Kit de tinción Gram (100 ml de cristal violeta, 100 ml de lugol, 100 ml de alcohol
cetona, 100 ml de fucsina/safranina)
✓ 1000 ml Agua destilada
✓ 12 Mecheros bunsen
✓ 12 Pinzas para tinción
✓ 30 Placas microbiológicas preparadas

 Muestra de placa dental


 Muestra de E.coli, Salmolella, S.aureus, S.epidermidis

El estudiante debe traer:


 Mandil blanco manga larga
 Guantes de látex
 Mascarilla
 Gorro
 Gafas de protección
 Caja de pinturas, lápiz, borrador, esfero

12.1.6 Descripción del procedimiento

SESION 01: toma de muestra de placa dental

El estudiante ingresa con el mandil al laboratorio, se iniciará con el docente que realizará una
explicación práctica introductoria sobre técnicas de observación y como realizar las diferentes
técnicas de tinción, así como la explicación práctica indicando algunos de los principales
errores, posteriormente, se encenderá el mechero de bunsen y cada estudiante se colocará
las barreras de protección con las normas de bioseguridad aprendidas anteriormente y
empieza a realizar la práctica.

Cada estudiante colocará un campo estéril sobre la mesa de trabajo y sobre él un palillo de
dientes, dos portaobjetos estériles, en uno de ellos por su parte posterior y con ayuda de un
marcador se realizará un circulo que nos indicará cual es nuestra área de trabajo, luego se
pondrá sobre el porta objetos una gota de agua destilada.

Se hará la toma de muestras con la ayuda de un palillo, para ello trabajaran en parejas,
colocamos la muestra de placa dental sobre el portaobjetos que previamente hemos
preparado y se la homogenizará con la gota de agua destilada estéril. Dejamos secar y fijamos
con el calor del mechero.
Se incinerara la punta contaminada del palillo de dientes y se desechara el resto.

Se realizará la tinción Gram:

a) cubrir la muestra por 1 minuto con cristal violeta (colorante inicial)


b) se lava con agua destilada
c) cubrir por 1 minuto con lugol (mordiente)
b) se lava con agua destilada

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


d) gotear alcohol cetona hasta que el preparado deje de perder color (decolorante)
e) se lava con agua destilada
f) cubrir 1 minuto en fucsina básica (colorante de contraste)
g) se lava con agua corriente
h) se seca suavemente y sin frotar con papel de filtro

Una vez que la preparación está totalmente seca, se procederá a su observación. Poner una
gota muy pequeña de aceite de cedro (inmersión) y observar al microscopio con el objetivo de
inmersión.
Se identificaran microorganismos Grampositivos y Gramnegativos de las placas obtenidas y de
las preparadas. Una vez finalizada la observación se retirará las placas y dejara correctamente
al microscopio sobre las mesas de trabajo.
Los estudiantes realizaran los pasos previamente mencionados y mediante forma aleatoria se
observarán falencias en la realización de la práctica corrigiendo cada una de estas, así como
también se despejarán cualquier tipo de dudas.

SESION 02: toma de muestra de agar EMB –E.coli y agar sangre S. aureus

Se hará la toma de muestras con la ayuda de una asa microbiológica esterilizada, proveniente
del agar con el microorganismo correspondiente proporcionada por el laboratorio, para ello
trabajaran en parejas, colocamos la muestra sobre el portaobjetos que previamente hemos
preparado y se la homogenizará con la gota de agua destilada estéril. Dejamos secar y fijamos
con el calor del mechero.
Se realizará la tinción Gram previamente descrita en la sesión anterior.
Una vez que la preparación está totalmente seca, se procederá a su observación. Poner una
gota muy pequeña de aceite de cedro (inmersión) y observar al microscopio con el objetivo de
inmersión.

SESION 03: toma de muestra de agar Salmonella-Shigella y agar manitol S.


epidermidis

Se hará la toma de muestras con la ayuda de una asa microbiológica esterilizada, proveniente
del agar con el microorganismo correspondiente proporcionada por el laboratorio, para ello
trabajaran en parejas, colocamos la muestra sobre el portaobjetos que previamente hemos
preparado y se la homogenizará con la gota de agua destilada estéril. Dejamos secar y fijamos
con el calor del mechero.
Se realizará la tinción Gram de acuerdo a las sesiones de prácticas anteriores. Una vez que la
preparación está totalmente seca, se procederá a su observación. Poner una gota muy
pequeña de aceite de cedro (inmersión) y observar al microscopio con el objetivo de
inmersión.

SESION 04: OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA DE HONGOS CON AZUL DE LACTOFENOL

EXAMEN EN FRESCO PARA LEVADURAS

Colocar una gota de azul de lactofenol en un portaobjetos


De la cepa en Sabouraud proporcionada por el laboratorio tomar una asada y colocarla en el
porta objetos con el azul de lactofenol
Cubrir con un cubreobjetos y observar al microscopio y observar a 40X

FRESCO EN MOHOS

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


Colocar una gota de azul de lactofenol en un portaobjetos
De la cepa en Sabouraud proporcionada por el laboratorio tomar la muestra con cinta scotch y
colocarla en el porta objetos con el azul de lactofenol
Observar al microscopio y observar a 40x

12.1.7 Referencias cruzadas

Ver referencia Practica N° 001 Normas básicas de trabajo e instrumental básico del laboratorio
de microbiología.
Ver referencia Practica No. 002 – Microscopía y Métodos de Observación de los
microorganismos

13 BIBLIOGRAFÍA
Referencias Principales.

1. Negroni M. (2010). Microbiología estomatológica. (2a ed.). Buenos Aires, Argentina:


Panamericana.
2. Marsh, P. y Martin M. (2011). Microbiología oral. (5ª ed.). Oxford, Gran Bretaña:
Amolca
3. Gamazo C., López-Goñi I. y Díaz R. (2005). Manual práctico de microbiología. (3ª ed.).
Barcelona, España: Elsevier Masson.

14 MECANISMOS DE EVALUACIÓN Y ANEXO


La evaluación en esta práctica está dada por la asistencia al laboratorio, la presentación de
todo el material, la adecuada presencia, las actividades realizadas y la presentación del trabajo
de laboratorio que será evaluado todo con una nota sobre 10. La práctica se utilizará una
rúbrica

Actividad N°1: anote y dibuje los resultados observados en la práctica

100x

Actividad 2: cuestionario
1. Describa con sus propias palabras el procedimiento de las técnicas realizadas
en esta práctica, los materiales y equipos utilizados.

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


2. ¿Qué forma tienen las bacterias observadas?
3. ¿Las bacterias aparecen aisladas o agrupadas? En caso de que aparezcan
agrupadas indicar el tipo de asociación. Indica tipo de Gram
4. ¿Cómo son aplicables estos conocimientos en el área de Odontología?

Rubrica para la práctica: el estudiante deberá traer impresa la rúbrica para la evaluación

POCO
EXCELENTE (5) MUY BUENO (4) SATISFACTORIO SATISFACTORIO NO
(3) (2) SATISFACTORIO (1)

CRITERIOS 9-10 8 -7 6-5 4-3 3-1

GRAFICO Realiza el gráfico, Realiza el gráfico, Realiza el gráfico, Realiza el gráfico, No realiza el
utiliza los colores utiliza los colores utiliza los colores no utiliza los gráfico.
adecuados, ejecuta adecuados, no adecuados, no colores
apropiadamente la ejecuta la forma, ejecuta adecuados, no
forma y tamaño de pero si el tamaño apropiadamente la ejecuta
las bacterias. de las bacterias. forma, ni el apropiadamente la
tamaño de las forma, ni el
bacterias. tamaño de las
bacterias.

CUESTIONARIO Contesta Contesta Contesta Contesta No contesta nada.


claramente todas claramente tres claramente dos claramente una
las preguntas. preguntas. preguntas pregunta.

TAREA PARA EL AULA VIRTUAL: el estudiante deberá subir la tarea al aula virtual y
entregar el respaldo físico

 Investigue 3 tipos de tinción para bacteriología, exceptuando la de Gram, como


se realizan y para que microorganismos son aplicables.

15 CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
En todos los casos, el estudiante deberá incluir las conclusiones y recomendaciones en los
métodos de presentación de los resultados establecidos para cada práctica. Estas deberán
estar relacionadas con los hallazgos o resultados de cada práctica con base en fundamentos
técnico – científicos.

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


16 Practica No. 004 – Observación e identificación de los distintos tipos de
morfologías y agrupaciones bacterianas – No. Sesiones 06
16.1.1 Tema a desarrollar
Uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos es observar su
crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los
microorganismos es el Cultivo.

16.1.2 Objetivos de la práctica

 Conocer técnicas de preparación de medios de cultivo, métodos de siembra y técnicas


anexas para identificación microbiana
 Realizar siembras microbiológicas
 Entender que es un medio de cultivo y su uso adecuado

16.1.3 Requisitos previos a la realización de la práctica

El estudiante deberá completar como trabajo autónomo:


La lectura y comprensión de todos los temas tratados hasta la actualidad, tanto en teoría como
en práctica, ya que solo de esta manera podrá relacionar lo aprendido hasta el momento.

Siembras y cultivos
El estudiante debe conocer:
Sembrar es colocar una muestra de inóculo, en un medio de cultivo para obtener el
crecimiento de los microorganismos. Para ello se extiende la muestra sobre caja de
Petri, que contiene un gel (Agar) al que se han añadido las substancias que necesitan los
microorganismos para crecer. A esto lo llamamos medio de cultivo. A veces se añaden otras
clases de sustancias; por ejemplo, para impedir el crecimiento de otras bacterias que podrían
contaminar el cultivo. La siembra se puede hacer en otros tipos de medios de cultivo, como
tubos de vidrio con gel, frascos con líquidos nutritivos para los microorganismos.
A continuación se procede a la "incubación" del medio ya sembrado. En cada caso se hace en
condiciones particulares de presión de oxígeno, temperatura, agitación, duración, etc. Muchas
de las bacterias patógenas crecen bien a temperaturas cercanas a los 37ºC habituales de
nuestro organismo.

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


16.1.4 Aparatos, equipos e instrumentos

Aparatos, equipos e Cantidad Requisitos técnicos


instrumentos
Microscopios Ópticos 12
Olimpus CX21
Placas microbiológicas 30
preparadas
Incubadora 1

16.1.5 Materiales y reactivos

✓ 100 Hisopos estériles


✓ 1000 ml Agua destilada
✓ 12 Mecheros bunsen
✓ 30 Placas microbiológicas preparadas
✓ Agar sangre
✓ Agar salino manitol

 Muestra faringea

El estudiante debe traer:


 Mandil blanco manga larga
 Guantes de látex
 Mascarilla
 Gorro
 Gafas de protección
 Caja de pinturas, lápiz, borrador, esfero

16.1.6 Descripción del procedimiento

El estudiante ingresa con el mandil al laboratorio, se iniciará con el docente que realizará una
explicación práctica introductoria sobre siembras y medios de cultivos, así como la explicación
práctica indicando algunos de los principales errores.

SESION 01: PREPARACION DE AGAR NUTRITIVO, GELATINA, EMB, MANITOL


¿QUÉ ES UN MEDIO DE CULTIVO?
Es una solución líquida o gelatinosa que contiene los nutrientes necesarios para el crecimiento
de los microorganismos.

¿COMO SE PREPARAN LOS MEDIOS DE CULTIVO?


La base para su elaboración es un medio deshidratado, un medio que está en polvo al cual hay
que disolver en agua y esterilizar.

1. Pesar los medios de cultivo


Bacterias: 23g de agar nutritivo para un litro de agua destilada

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


Hongos: agar, dextrosa y papa y extracto de levadura para un litro de agua destilada.
2. Colocar el medio de cultivo en polvo en un matraz erlenmeyer y agregar agua
destilada
3. Calentar en la parrilla de agitación hasta que el medio este totalmente cristalino.
4. Retirar de la parrilla y colocar un tapón hecho con algodón envuelto en gasas. El tapón
debe quedar fijo pero no apretado.
5. Colocar el medio en la autoclave y esterilizar a 121 C durante 20 minutos.
6. Pasados los 20 minutos sacar el medio de cultivo y dejar enfriar solo un poco
7. Vaciar el medio de cultivo en cajas petri dentro de un campo estéril. En cada caja
vaciar aproximadamente 30 ml.

SESION 02: PRACTICA DE TOMA SANGRE


Procedimiento:

Verificar que los elementos por usar estén listos y que el paciente se sienta
cómodo
Aplicar el torniquete aproximadamente cuatro dedos por encima de la flexión
del codo o a 10 cm del codo y sujetar con un medio nudo.

Limpiar la zona con una torunda de algodón embebida en alcohol en un área de 2


pulgadas.

Con sistema Vacutainer®:


1. Se destapa la aguja por el lado de la guarda que no tiene color y se enrosca en la
base.

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


2. Una vez armada la base, se accede a la vena con la aguja, en forma horizontal, y se
introduce con el bisel hacia arriba

3. Cuando la sangre fluya por la aguja, se debe de realizar la aspiración, colocando el


tubo dentro de la base y haciéndolo que se perfore el tapón con la otra parte de la
aguja, para que el vacío que contiene el tubo aspire la sangre necesaria.

4. Al llenarse el tubo, se retira de la base, procurando no mover la aguja de su posición.


5. Colocar la torunda sobre el lugar de punción, retirar el torniquete y extraer la aguja.

6. Agitar el tubo de 4 veces, suavemente, para homogeneizar la muestra con el


anticoagulante.

SESION 03: ANÁLISIS DE UNA MUESTRA DE FARINGE

En el tracto respiratorio existe una abundante microbiota que se establece, normalmente,


sin causar daños al hospedador.
El objetivo de la práctica consiste en tomar una muestra del tracto respiratorio
superior (faringe) para tratar de identificar cocos Gram positivos.

Tomar una muestra de faringe con un hisopo estéril y la ayuda de un baja lenguas
también estéril. Sembrar la muestra en dos placas (nº1 y nº2) de agar sangre y en
una de agar salino manitol:
 Placa nº 1 de Agar Sangre: se descarga el hisopo en una zona próxima al borde
(zona densa) y se siembra el resto de la placa por estrías continuas. Incubar 48
horas a 37ºC.

 Placa nº 2 de Agar Sangre: con un asa estéril se toma un inóculo de la zona


densa
de la placa nº 1 y se siembra la placa por estrías continuas. Incubar 48 horas a
37ºC.
 Placa de Agar Salino Manitol: sembrar por estrías continuas con el mismo hisopo que
se ha sembrado la placa nº 1. Incubar 48 horas a 37º C.

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


SESION 04: ANTIBIOGRAMA METODO DE KIRBY BAWER –DIFUSION EN AGAR
Se hará la toma de muestras con la ayuda de un asa microbiológica esterilizada, proveniente
del agar con el microorganismo proporcionada por el laboratorio (pseudomonas,
enterobacterias, staphylococus).
Colocamos la muestra en un tubo de ensayo con solución salina y procedemos a calibrarlo
según la escala de Mc Farland en el turbidimetro obteniendo nuestra muestra a 0,5 Mc
Farland.
Con la ayuda de un hisopo estéril tomados la muestra del tubo de ensayo humedeciéndolo una
sola vez para poder realizar la siembra en césped (estrías horizontales, verticales y diagonales)
en el agar Muller Hilton que es un medio de cultivo para realizar pruebas de susceptibilidad a
los antibióticos, tiene 4 mm de espesor.
Se procede a la colocación de los discos antibióticos en el agar con ligera presión tomando en
cuenta que deben tener un espacio adecuado entre disco y disco.
Finalmente llevar a incubar de 24 a 48 horas y observar los resultados

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


16.1.7 Referencias cruzadas

Ver referencia Practica N° 001 Normas básicas de trabajo e instrumental básico del laboratorio
de microbiología.
Ver referencia Practica No. 002 – Microscopía y Métodos de Observación de los
microorganismos

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ


17 BIBLIOGRAFÍA
Referencias Principales.

4. Negroni M. (2010). Microbiología estomatológica. (2a ed.). Buenos Aires, Argentina:


Panamericana.
5. Marsh, P. y Martin M. (2011). Microbiología oral. (5ª ed.). Oxford, Gran Bretaña:
Amolca
6. Gamazo C., López-Goñi I. y Díaz R. (2005). Manual práctico de microbiología. (3ª ed.).
Barcelona, España: Elsevier Masson.

18 MECANISMOS DE EVALUACIÓN Y ANEXO


La evaluación en esta práctica está dada por la asistencia al laboratorio, la presentación de
todo el material, la adecuada presencia, las actividades realizadas y la presentación del trabajo
de laboratorio que será evaluado todo con una nota sobre 10. La práctica se utilizará una
rúbrica

19 CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
En todos los casos, el estudiante deberá incluir las conclusiones y recomendaciones en los
métodos de presentación de los resultados establecidos para cada práctica. Estas deberán
estar relacionadas con los hallazgos o resultados de cada práctica con base en fundamentos
técnico – científicos.

Guía de Prácticas de Laboratorio – Coordinación de laboratorios LACBYQ

Potrebbero piacerti anche