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2º bachillerato
Unidad 14. Genética molecular
Genética molecular
14
C.E.M HIPATIA-FUHEM
Miguel Ángel Madrid
Biología. 2º bachillerato
Unidad 14. Genética molecular
Genética molecular
14 1. El ADN como depositario de la información
genética.
2. Concepto molecular de gen.
3. Replicación del ADN
1. Etapas de la replicación
2. Diferencias entre el proceso replicativo en
procariotas y eucariotas.
4. Expresión de la información genética:
dogma central de la biología molecular.
5. Transcripción.
6. El código genético
7. Traducción.
8. El genoma de procariotas y eucariotas
9. El proyecto genoma humano.
10. Concepto de proteoma y proteómica.
Aplicaciones en biociencias.
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Biología. 2º bachillerato
Unidad 14. Genética molecular
Interfase
Análisis de los
Cromosomas.
(ADN + proteínas)
“Collar de
perlas”
Fibra de ADN
unida a proteínas
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Interfase
¿Qué molécula
posee la
información
genética?
“Collar de
perlas”
Fibra de ADN
unida a proteínas
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Interfase
¿Las proteínas en
su secuencia de
aminoácidos?
“Collar de
perlas”
Fibra de ADN
unida a proteínas
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Interfase
¿El ADN en su
secuencia de
nucleótidos?
“Collar de
perlas”
Fibra de ADN
unida a proteínas
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Unidad 14. Genética molecular
Primeras evidencias:
Las proteínas. El ADN tiene
una estructura demasiado
sencilla. Las proteínas son más
complejas y tienen funciones
catalíticas.
¿Quién es el
depositario de la 1928. Experimento de
información Griffith (buscando vacuna contra
la neumonía provocada por
genética? Streptococcus pneumoniae)
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Streptococcus
pneumoniae
(presenta dos variantes o cepas
distintas)
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Unidad 14. Genética molecular
Experiencias de F. Griffith
Bacterias S
Bacteria con cápsula muertas por
(virulenta) calor
Tipo S
Bacterias R
Bacteria sin cápsula vivas Bacterias S
(no virulenta) muertas por
Tipo R calor
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CONCLUSIÓN
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Unidad 14. Genética molecular
Descubrieron :
A cada mutante le
faltaba el enzima
específico que
catalizaba algún paso de
la síntesis del
aminoácido al que
habían alterado.
Los mutantes se
diferenciaban de la cepa
salvaje en un solo gen.
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Descubrieron :
Si se altera el gen, no se
fabrica la enzima
correspondiente y la ruta
se bloquea.
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1 gen 1 enzima
1 gen 1 proteína
1 gen 1 cadena
polipeptídica
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REPASEMOS ALGUNOS CONCEPTOS Unidad 14. Genética molecular
El ciclo celular
Fase permanente en células
que no entran nunca en mitosis. Síntesis de proteínas y
Estado de quiescencia. aumento del tamaño celular.
Fase G11
Fase G00
Replicación del ADN y
síntesis de histonas.
Citocinesis
División del
Fase S
citoplasma
Interfase
Fase de
mitosis
División celular
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Unidad 14. Genética molecular
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TEORÍA CONSERVATIVA
TEORÍA DISPERSIVA
ADN copia
Cada una de las dos cadenas hijas contiene fragmentos
de la cadena original y fragmentos de la nueva
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síntesis
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TEORÍA SEMICONSERVATIVA
ADN N14
ADN N14-15
ADN N15
1- Cultivaron bacterias en un medio con N-15 (Las bases nitrogenadas incorporaron el isótopo).
2- Transfirieron las bacterias a un medio con N-14. El ADN obtenido tenia la misma proporción N14,
N15. Cada bacteria había heredado la mitad de ADN de su progenitora y la otra mitad la
sintetizaba de los componentes del medio. C.E.M HIPATIA-FUHEM
3- Aparecían ADN hibrido (N14-N15) y ADN solo con N14 Miguel Ángel Madrid
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Núcleo (eucariotas)
Nucleoide (procariotas)
¿Dónde ocurre? Matriz (mitocondrias)
Estroma (cloroplastos)
FASE S DEL
¿Cuándo ocurre? CICLO CELULAR
(en interfase)
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Principales características de la
replicación
Es semiconservativa.
Se produce por adición de mononucleótidos en sentido 5´ 3`
Es bidireccional. Se forman dos horquillas de replicación que
avanzan en sentidos opuestos.
En virus y bacterias hay un único punto de inicio, mientras que
en eucariotas hay varios.
Es semidiscontinua. En una cadena (llamada conductora) se
sintetizan fragmentos bastante grandes de forma continua,
mientras que en la otra (llamada retardada) la síntesis es
discontinua, es decir, se sintetizan pequeños fragmentos de forma
separada y después se unen (los llamados fragmentos de
Okazaki). Ello se debe a que las dos cadenas son antiparalelas y a
que la síntesis es siempre en sentido 5´ 3´
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¿Qué necesitamos?
- ADN molde
- Nucleótidos: ATP, GTP,CTP,TTP
- Proteínas SSB (impiden que se enrede el ADN)
- Enzimas:
- Helicasas: rompen puentes de H entre las dos cadenas complementarias
- Topoisomeras (girasas). Desenrollan ADN, evitan tensiones
- ADN ligasas (unen fragmentos ADN mediante enlaces fosfodiéster). Así sellan el
hueco entre dos fragmentos de Okazaki.
- ARN polimerasas (también llamadas primasas). Sintetizan fragmentos de ARN
(llamados ARN cebador) usando como molde ADN y actúa como iniciador de la
síntesis de ADN.
- Nucleasas. Rompen enlaces fosfodiéster entre nucleótidos, escinden ARN cebador y
reparan lesiones en el ADN.
- ADN polimerasas. Catalizan la formación de enlaces fosfodiéster entre
nucleótidos.
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Sintetiza el ARN
ARN POLIMERASA
cebador usando
(primasa)
como molde el ADN
ARN polimerasa
3`
5`
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ARN polimerasa
3`
5`
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En procariotas distinguimos:
ADN POLIMERASA I
(Retira fragmentos ARN cebador: exonucleasa
Sintetiza ADN en los huecos: polimerasa
Es correctora, ya que repara errores de la síntesis de
ADN)
ADN POLIMERASA II
(Interviene en procesos de reparación del ADN
Tiene actividad polimerasa en sentido 5` 3´y
exonucleasa en 3´ 5´)
RECUERDA
La ADN polimerasa:
Precisa ARN cebador
Lee en sentido 3´ 5
Sintetiza en sentido 5´ 3´
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RECUERDA
La actividad polimerasa
consiste en catalizar la
unión de nucleótidos a la
cadena de ácido nucleico
que se está sintetizando.
La actividad exonucleasa
consiste en escindir
nucleótidos de los extremos
de los ácidos nucleicos.
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EXONUCLEASA POLIMERIZACIÓN
POLIMERASA INICIACIÓN
dirección función dirección función
elimina
5’→ 3’
I cebador
5’→ 3’ síntesis no
3’→ 5’ reparación
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Fase de iniciación
Fase de elongación
Fase de terminación
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La replicación empieza en un
punto del ADN donde abundan
las secuencias de bases
GATC (Ori C)
En él se separan las dos
cadenas de ADN por acción
de las enzimas.
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Proteínas SSB
Helicasa
Las proteínas
específicas se
unen al punto La helicasa rompe los
de iniciación enlaces de hidrógeno
entre las bases y abre la
doble hélice
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RECUERDA
La ADN polimerasa III:
Precisa ARN cebador
Lee en sentido 3´ 5
Sintetiza en sentido 5´ 3´
Burbuja
de
replicación
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3’
5’
Una de las hebras se
5’ sintetiza de modo contínuo
3’ por la ADN polimerasa III.
Fragmentos de Es la conductora o lider.
5’ Okazaki
3’ 3’
3’
5’ 3’
La ADN polimerasa III necesita
un fragmento de ARN (cebador
o primer) con el extremo 3’
libre para iniciar la síntesis.
5’
C.E.MTema 6: Estructura
HIPATIA-FUHEM 43 y
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3’
5’
FRAGMENTO DE OKAZAKI
( 1000 – 2000 nucleótidos) Cadena
retardada
5’
3’
3’
La ADN
5’ plomimerasa III
sintetiza un corto
fragmento de ADN
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Primasas
Cebador
3 La primasa sintetiza un nuevo cebador sobre 4 La ADN polimerasa III comienza a sintetizar un
cada hebra retardada. fragmento de ADN a partir del nuevo cebador.
Hebra retardada
Hebra retardada
5 Cuando la ADN polimerasa III llega al cebador 6 La ligasa une los fragmentos de ADN.
de ARN, lo elimina y lo reemplaza por ADN.
Nuevo cebador
Ligasas
Nuevo cebador
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VOLVER
Síntesis de nuevas cadenas de ADN
Horquillas observadas
5’ 3’
3’ 5’
Origen de
Crecimiento Crecimiento
replicación
continuo discontinuo
5’ 3’
5’
3’
Fragmentos
de Okazaki
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Fases de terminación
Tiene lugar cuando las dos horquillas de replicación del cromosoma circular de E. coli
se encuentran, y se han formado dos cromosomas completos que permanecen ligados
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Burbuja de
replicación
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Telómero
Cuando se elimina el último 3’
cebador, la ADN polimerasa 5’ 3’ 5’
no podrá rellenar el hueco, 5’
5’
al no poder sintetizar en Cebador Último cebador
dirección 3’ - 5’.
Debido a esto el extremo del 3’
5’
cromosoma (telómero) se va
acortando cada vez que la
célula se divide. Esto se 5’
La ADN polimerasa polimeriza Eliminación
asocia al envejecimiento y
desde el extremo 3’ libre de cebadores
muerte celular.
3’
Hebra más corta
5’
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Hebra
Horquilla
retardada
de replicación
Hebra
retardada
Burbujas de replicación
Nucleosomas
Hebra
conductora
Nuevos nucleosomas
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LA TELOMERASA
En las células que se dividen continuamente
(células madre de los gametos, células
embrionarias y células cancerosas) hay
una enzima, denominada telomerasa, que
impide el acortamiento de los telómeros. .
Se forma por una porción proteica y ARN que
actúa como molde.
A partir de este molde, la enzima sintetiza
ADN para completar la hebra retardada.
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ARNt
Este esquema fue considerado durante muchos años el “dogma central de la biología molecular”.,
pero los cirus son una excepción a este dogma
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Transcriptasa
inversa ADNc
ADNc
(complementario)
bicatenario
ARN
vírico
Transcriptasa
Envoltura inversa
RETROVIRUS
Transcriptasa Transcriptasa
inversa inversa
ADNc
Membrana plasmática Degradación monocatenario
de la célula huésped del ARN
Transcripción
ADN ARN PROTEÍNAS
Transcripción Traducción
inversa
Replicación Replicación
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Transcripción Traducción
ADN ARNm Proteína
Transcripción
inversa
Duplicación
Duplicación
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DOGMA
DOGMACENTRAL
CENTRALDE
DELA
LABIOLOGÌA
BIOLOGÌAMOLECULAR
MOLECULAR Biología. 2º bachillerato
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3´ 5´
Hebra
Hebramolde
molde
Transcripción
Transcripción
5´ 3´
Traducción
Traducción
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TRIPLETE
¿Qué es un triplete y un codon?
ADN
AATTCGAGCTAGCAGCCACTTACGAGTACGTA
C
ARN
ACUUUCCCGACGCAAAACGUUUUUCGAACUU
CODON
Triplete: Cada una de las secuencias posibles de tres
nucleótidos en el ADN.
Codon: Secuencia de tres nucleótidos en el ARN
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Bases
Ribosa
Ribonucleótido
trifosfato
RECUERDA
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Fase de iniciación
Fase de elongación
Fase de terminación
Fase de maduración
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El proceso de la transcripción
1 INICIACIÓN
La ARN-polimerasa reconoce los centros promotores (ricos
en A y T). Cola poli-A
NO OLVIDES
La ARN polimerasa lee en dirección
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Cadena inactiva de ADN
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LA LUPA AMPLÍA
5. Transcripción: maduración en procariotas LA IMAGEN
Promotor ARN-polimerasa
5’ 3’
3’ 5’ No existe maduración del
ARNm, se unen a los
ribosomas y se traducen
Iniciación
5’ 3’
3’ 5’
Los ARNr y ARNt (transcritos
ARN primarios) precisan de un
Elongación proceso de maduración
5’
3’
3’ para ser funciones
5’
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5’ 3’
3’ 5’
Iniciación
5’ 3’
3’ 5’
ARN
Elongación
5’ 3’
3’ 5’
Finalización
5’ 3’
3’ 5’
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5’ 3’
Iniciación
3’ 5’
ARN
ARN-polimerasa
1. Tras la unión de
los 30 primeros
ribonucleótidos 5’ 3’
se añade una 3’ 5’
caperuza de
metilguanosina
en 5´ m7-Gppp
5’ 3’
3’ 5’
CONTINUAR
m7-Gppp
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Unidad 14. Genética molecular
Transcripción en eucariotas
5’ 3’
Finalización
3’ 5’
2. Después de
PoliA-polimerasa
la separación
del ARN, una
m7-Gppp enzima la poliA-
polimerasa
Capucha 5' añade una
OH
secuencia de
unos 200
nucleótidos de
adenina (cola
de poli A)
ARN heterogéneo
nuclear
Cola de poli-A
m -Gppp
7 OH
Capucha 5'
CONTINUAR
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Proteína
RNPpn
Espliceosoma.
5’ 3’
3. Eliminación Mecanismo de
de intrones splicing
(segmentos de
ARN que son se
traducen)
Intrón
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¿ LO SABÍAS?
La toxicidad de la Amanita phalloides (provoca diarreas,
vómitos, dolores abdominales e incluso la muerte) se debe
a una sustancia, 1 alfa amanitina, que no se destruye con
la cocción y se comporta como un inhibidor de la ARN
polimerasa II en eucariotas, lo que bloquea la síntesis de
ARNm
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COMPARACIÓN TRANSCRIPCIÓN
PROCARIOTAS EUCARIOTAS
Localización Nucleoide (citoplasma) Núcleo
Genes Continuos Fragmentos (intrones y
exones)
ADN Bajo grado de Muy empaquetado
empaquetamiento
ARN polimerasa 1 ARN polimerasa que ARN poli I: ARNr
sintetiza ARNm, ARNr, ARN poli II: ARNm
ARNt… ARN poli III: ARNt
Tipos de genes Policistrónicos Monocistrónicos
Maduración ARNr y ARNt ARNm
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6. El código genético
¿Cómo se pasaba de un
lenguaje de cuatro
letras a otro lenguaje
formado por 20
elementos distintos?
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El código genético
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El código genético
3 bases
43 = 64 aa
SUFICIENTE, pero sobran
palabras, lo que significa
que varios tripletes son
sinónimos, porque
codifican (significan) el
mismo aminoácido
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EL CÓDIGO GENÉTICO
AUG
El código genético
El código genético
establece una
relación de
correspondencia
entre las bases
nitrogenadas del ARN
y los aminoácidos
que codifica
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Posibilidad de solapamiento
Met Gli Tre His Ala Fen Ala
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EL PROCESO DE TRADUCCIÓN
ocurre
RIBOSOMAS LA SÍNTESIS DE PROTEÍNAS
necesita
ENZIMAS Y ARN DE
RIBOSOMAS AMINOÁCIDOS ARN MENSAJERO ENERGÍA TRANSFERENCIA
VOLVER
La traducción. Biosíntesis de proteínas
ARNt
Aminoacil-ARNt
Subunidad mayor
Anticodón
3’
5’
ARNm
Subunidad menor
(Unión a la (Unión al
peptidil- ribosoma)
transferasa en
el ribosoma
H C NH2 Aminoácido
(serina)
CH2
ARNt
Anticodón
U C G
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Aminoacil-ARNt
Aminoacil-ARNt-sintetasa
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Unidad 14. Genética molecular
Fase de iniciación
Fase de elongación
Fase de terminación
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Iniciación de la síntesis
3’
U
5’
A C Metionina
5’ A
U 3’
G
ARNt iniciador
E
A
GDP
GTP
3’ 3’
5’ 5’
Subunidad
menor
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Aminoácido
El aminoácido se Se libera el ARNt que ha
Enlace traslada al otro ARNt cedido el aminoácido
Anticodón peptídico
ARNt
P A P P
A
E A
E
E
GDP GDP
GTP GTP 3’
3’ 3’ 3’
5’
5’ 5’ 5’
Complementariedad El ribosoma se
entre codón trasloca un codon
y anticodón
CONTINUAR
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Finalización de la síntesis
Polipéptido
libre
Último ARNt
P
A
E
3’
3’
5’
5’
Factor de
El codón de finalización liberación
puede ser UAA, UAG o UGA
Polirribosomas en eucariotas
Si el ARN a traducir es lo suficientemente largo puede ser leído por más de un
ribosoma a la vez, formando un polirribosoma o polisoma. La síntesis ocurre a razón
de unos (15 aminoácidos unidos por segundo. Una proteína media (300 aa) se
sintetizaría en unos 15 segundos. Después, el RNAm es destruído ARNm
Proteína en
formación
¿ LO SABÍAS?
Determinados antibióticos se utilizan como dardos para
destruir bacterias, al actuar sobre dianas moleculares
relacionadas con la traducción y bloquear algunas etapas
de la síntesis e proteínas
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Unidad 14. Genética molecular
C.E.M HIPATIA-FUHEM
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ADN NO CODIFICANTE
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ADN de intrones
Gen
Gen
regulador
Intrones
Operador Exones: secuencias
codificantes
Promotor
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C.E.M HIPATIA-FUHEM
Miguel Ángel Madrid
Biología. 2º bachillerato
Unidad 14. Genética molecular
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Unidad 14. Genética molecular
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