ALUMNOS: ANGELES LEON MAGDALENA; ESQUIVEL ROJAS GUSTAVO

GRUPO: 4QM1 SECCION: 02

PRACTICA: “DETERMINACION DE AMINOACIDOS TERMINALES CON GRUPO ALFA
AMINO LIBRE”
METODO DE SANGER
Objetivos de la practica: Por el método de Sanger, y una vez finalizado el
proceso de cromatografía en cámara los
 Demostrar que, por la metodología descrita
resultados obtenidos fueron los siguientes:
es posible la identificación del aminoácido
terminal de la hemoglobina bovina.
 Aprender como es que el grupo amino
terminal, interacciona con el reactivo de
sanger.

Resultados:

DNP- Fm (cm) Fs(cm) Rf

Aminoacido
DNP-ala 23.9 38.2 0.6256
DNP-phe 24.15 39.1 0.6176
DNP-val 29.8 39.3 0.7582
DNFB 20.5 39.5 0.5190
Problema 17.2 39.2 0.4388
mancha 1
Problema 28.9 39.2 0.7372
mancha 2
 ALUMNOS: ANGELES LEON MAGDALENA; ESQUIVEL ROJAS GUSTAVO
GRUPO: 4QM1 SECCION: 02
PRACTICA: “DETERMINACION DE AMINOACIDOS TERMINALES CON GRUPO ALFA
AMINO LIBRE”
METODO DE SANGER
Discusión de los resultados:
Se obtuvo que, con base en la metodología de Sanger,
el aminoacio N-terminal de la hemoglobina bovina es 𝑣𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑒𝑥𝑝𝑒𝑟𝑖𝑚𝑒𝑛𝑡𝑎𝑙 0.7372
valina, se puede afirmar esto ya que en el proceso de % 𝐸𝑟𝑟𝑜𝑟 = 𝑣𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑡𝑒𝑜𝑟𝑖𝑐𝑜
(100)= 0.75 (100) =
cromatografía, fue suministrada una muestra del 98.29
aminoácido antes mencionado, en estado puro, lo cual
Por lo tanto, se concluye que los objetivos plasmados
permitio que se tomara como referencia conforme al
al inicio de la practica se cumplieron, ya que por
problema que se coloco sobre el papel
medio de la reacción del método de Sanger y el
cromatografico. Aproximadamente los (Rf´s) de
proceso experimental, se logro determinar que
valina y el problema, coinciden de cierto modo
aminoácido conformaba el N- amino libre.
experimentalmente, esto queda comprobado al buscar
en la bibliografía de consulta el índice de Rf de la
valina, que se encuentra en la tabla inmediata superior
al inicio de la discusión, encontramos que dicho Bibliografia de consulta:
aminoácido tenia como valor de Rf: 0.75, lo cual
RANT Gregory A., Crankshaw Mark W., Gorka
coincide con la muestra experimental del corrimiento
John.; Edman sequencing as tool for characterization
cromatografico.
of syntretic peptides. Methods in Enzimology.
Por lo tanto para identificar que aminoácido era el que (1997). Pags. 289:395-414
se tenia en la muestra, conforme a los cálculos que a
Owen R. Fennema. Introducción a la ciencia de los
continuación mostramos, determinamos que ”valina”
alimentos, Volumen 1, 3° edición 2004, Pag 158-160.
es el aminoácido N-terminal:
𝐹𝑚
𝑅𝑓 = ≤1
𝐹𝑠
29.8
𝑅𝑓 𝑉𝑎𝑙 = = 0.7582
39.3
Rf Valina experimental: 0.75

28.9
𝑅𝑓 𝑃𝑟𝑜𝑏𝑙𝑒𝑚𝑎 = = 0.7372 ≈ 0.7582
39.2
Conclusiones:
Conforme a lo visto en la practica se concluye que el
método de Sanger para determinar el aminoácido N-
terminal de una proteína globular, en este caso la
hemoglobina bovina, es un método útil, que confirma
datos bibliográficos ya asentados y con un % de error
minimo que no supera el 3 %, esto lo concluimos
porque: