Universidad Autónoma

de Ciudad Juárez

Instituto de Ciencias Biomédicas

Médico Cirujano

Laboratorio de microbiología II
Profesora Bertha Alicia Borrego Ponce

Practica #7
Diagnóstico del virus de la Rubeola

Domínguez Ruvalcaba Aniela

Matricula 128964
11 de Marzo de 2015
RESUMEN.

La rubeola es una enfermedad exantemática (erupción en piel), febril, contagiosa,

benigna si se contrae después del nacimiento. Pero en las mujeres embarazadas, el feto
puede sufrir una infección crónica, sobre todo en los
primeros meses de gestación, con graves
malformaciones y/o abortos espontáneos. Se
presenta en cualquier época de la vida. Es más
frecuente en primavera y en niños de 2-10 años. Hoy
en día, la mayoría de las infecciones de rubéola se
dan en adultos jóvenes no vacunados, más que en la
población infantil, lo que puede poner en peligro a
los hijos que pudieran tener en el futuro.

El virus de la rubeóla es el único miembro del

género Rubivirus de la familia Togaviridae que esta
formada por un grupo de agentes virales pequeños
que contienen ácido ribonucléico en su genoma
(RNA) y una envoltura lipídica "Toga". El virus de la
rubéola tiene como único reservorio al hombre. Es el único miembro del género
Rubivirus ssRNA polaridad positiva, 60 nm
de diámetro, nucleocápside de 33nm,
simetría icosaédrica, aspecto pleomórfico,
con envoltura, 3 proteínas estructurales; E1
y E2 unidas a las glicoproteínas de
membrana y proteína C de la cápside. Sólo
hay un serotipo de virus de la rubéola. Tiene
6 determinantes antigénicos distintos; 4
asociados con la hemaglutinación, y 2 con la
neutralización. El Virus de la rubéola infecta
varios primates y otros mamíferos por ejemplo, monos, chimpancés, conejos y ratones.

Para esta practicase realizaron los siguientes pasos:

1.- Los reactivos deben haber estado un rato a temperatura ambiente

2.- Diluir 1 mL del buffer de lavado con 9 mL agua destilada
3.- Preparar una dilución 1:40 de muestras del suero problema y controles. Para el
efecto se mezclan 5µL de suero y 200 µL de diluyente
4.- Colocar 100 µL de muestra diluída en los pozos de reacción
5.- Incubar a temperatura ambiente por 30 minutos a 37°
6.- Lavar tres veces con buffer diluído
7.- Agregar 100 µL de la enzima conjugada a cada pozo
8.- Incubar a temperatura ambiente por 30 minutos
9.- Lavar tres veces con el buffer diluído
10. Agregar 100 µL de sustrato cromogénico a cada pozo
11. Incubar a temperatura ambiente por 30 minutos en la oscuridad
12. Agregar 100 µL de solución stop, para detener la reacción
15.- La intensidad de color marcará la positividad

RESULTADOS.

DISCUSIÓN.
Existen muchas técnicas diagnósticas para la rubeola, el médico debe conocer estas
técnicas ya que es una de las enfermedades que sigue causando grandes estragos
patológicos sobre todo en las mujeres embarazadas y sus productos.

La técnica utilizada nos ofrece un diagnostico eficaz, rápido y muy certero para la
rubeola. Básicamente, se empleó la técnica utilizada anteriormente con los demás
diagnósticos para virus, la prueba de ELISA. Una prueba sencilla que consiste en buscar
el anticuerpo en el suero del paciente esto a través de la formación del complejo
antígeno-anticuerpo. En el pocillo se encontraba el antígeno vírico, el practicante
administro una muestra del suero a estudiar y se diluyo para posteriormente incubar a
temperatura ambiente por 30 minutos y así dar tiempo a que el complejo se forme por
completo. Al concluir la incubación se lavó tres veces teniendo demasiado cuidado, esto
para que solo el diluyente se extrajera y no así el complejo. Luego, se agregó el
conjugado, el cual detectaría el propio anticuerpo IgG del paciente, esta solución se
incubo de nuevo para permitir igualmente la unión y formación de este complejo.
Después como ya se había llevado a cabo anteriormente se lavó con cierto cuidado para
poder conservar los complejos. En este punto la prueba ya había obtenido los
resultados solo era cuestión de “revelarlos”, para esto el practicante agrego
100microlitros de solución cromógenica y se incubo en la oscuridad para que los rayos
de la luz no afectaran en el resultado. Al terminar esta última incubación el practicante
agrego una solución stop, la cual como su nombre lo dice detiene la reacción ya que en
estas pruebas los tiempos de reacción o, lo que es lo mismo, los tiempos de incubación
son de suma importancia para brindarnos un resultado confiable. Al tener una prueba
positiva la muestra presento un color amarillo.

A este punto de su formación profesional el practicante ya conoce el fundamento de los

anticuerpos (IgG e IgM en este caso). En el laboratorio se manejó ambos anticuerpos y
en el caso particular del practicante se trabajó con IgG un anticuerpo que en resumen,
se produce a largo plazo después de la infección con el antígeno. La aparición de este
anticuerpo en las pruebas nos indica que el individuo estudiado ya había sido
inmunizado. Además, el mismo paciente agrego que en efecto, ya había recibido la
vacuna.

En el laboratorio también se realizó la prueba en busca de la IgM la cual tiene como

base el mismo fundamento pero el procedimiento es diferente. Este procedimiento
difiere en que el pozo contiene un anti anticuerpo y no el propio antígeno, además la
prueba de IgM tarda un poco más ya que los tiempos de incubación deben de ser
mayores. De caso de dar positivo tendríamos una infección reciente, con lo cual se
tendría que brindar un tratamiento. Es de suma importancia mantener en contexto los
resultados dados en la prueba, como ejemplo, si se encuentra IgM en un recién nacido
se habla de una enfermedad congénita.
CONCLUSIÓN.

Es de suma importancia el diagnóstico de la rubeola ya que es entidad patológica que

requiere de tratamiento rápido. Existe una gran variedad de técnicas para su diagnóstico
pero es necesario conocer el fundamento de cada una de ellas asi como sus variantes.
En este caso se utilizó la prueba de ELISA en dos variantes lo cual nos ayuda a explicar la
importancia del conocimiento de estas dos variantes ya que una nos hablaba de
patología mientras que otra nos hablaba de inmunidad.

El practicante como médico en formación se debe comprometer a conocer y dominar

estos fundamentos. Además el practicante aprendió que detalles tan vanos como lo es
un tiempo de incubación inadecuado influye totalmente en los resultados.

CUESTIONARIO.

1. Investigue cuál es la incidencia de la Rubeola en México.

2. Qué otros virus causan síntomas semejantes al de la rubeola.

Escarlatina , sarampión , varicela

3. Qué otras técnicas se conocen para el diagnóstico de la rubeola, y diga

brevemente en qué consisten. Comparar su sensibilidad y especificidad. . El
diagnóstico materno se debe realizar por métodos serológicos como inhibición de la
hemoaglutinación, ELISA, RIA o aglutinación pasiva. La detección de IgG es útil para
determinar infección reciente cuando se demuestra una seroconversión o aumento
significativo de los títulos (cuatro diluciones) iniciales. Sin embargo, esta situación se
puede obsevar también en reinfecciones con bajo riesgo de transmisión al feto. La
determinación de IgM anti rubeola en un plazo de 30 días desde la aparición del
exantema es de gran utilidad para confirmar el diagnóstico.