IPN-ENCB Departamento de Bioquímica “Reacciones oscuros que antes, a pesar de no tener enzima, inhibidor o donador de

enzimáticas de óxido-reducción. SDH-Citocromo c

oxidasa” Sección: 2 4QM2 Beltrán Cortés José Ángel electrones.
Paniagua Gustavo
Si observamos nuestras tablas 1, 2, 3 y 4, se aprecia de manera muy clara
Objetivos: cómo, el poner 4 riñones afecta en nuestros resultados, a pesar de que el
-Comprobar si el malonato es un inhibidor competitivo del complejo SDH. corazón posee mayor cantidad de mitcondrias. 4 Fue la mitad de tiempo
-Comprobar que el KCN es un inhibidor que actúa sobre el complejo IV de la
aproximadamente que tardó en denotar la reducción del azul de metileno
cadena de transporte de electrones.
Resultados (Tabla 1 y 2; figura 1) y la misma observación se denotó con el alfa naftol y la
p-fenilen diamina.

Por último, cabe mencionar que si observamos nuestros tubos marcados en

color rojo (en todas las tablas), se aprecia el efecto del inhibidor colocado,
malonato y KCN para el ensayo del complejo II y IV, respectivamente. En
naranja se observa el efecto de no colocar el extracto(enzima) y en verde a
aquellos que no se les colocó donador de sustrato (complejo II) y donador de
electrones (complejo IV); o sea p-fenilendiamina.

Las variables experimentales en este caso fueron el inhibidor, la enzima y

sustrato, su presencia o ausencia de los mencionados, denota una buena o
poca presencia de productos, respectivamente, nos percatamos de la
cantidad de producto, apoyándonos de un método cualitativo y colorimétrico
(un colorante que sirva de indicador óxido reducción).

El malonato es un inhibidor competitivo reversible del complejo SDH, por

Discusiones
“Las reacciones redox que se utilizan en procesos biológicos, que implican la
transferencia de electrones e iones de hidrógeno son los siguientes. Durante
algunas reacciones de oxidación biológica, hay una transferencia simultánea
de iones de hidrógeno con electrones (1).
denotar una mayor coloración azul aquellos tubos que lo tenían.
Es competitivo debido a que tiene una estructura similar a la del sustrato y se
puede revertir aumentando la cantidad de sustrato. Y es reversible por que
presenta una unión débil (no covalente) con la enzima.
El KCN es un inhibidor no competitivo irreversible que actúa sobre el
complejo IV de la cadena de transporte de electrones por denotar en los
ensayos una coloración rosa en aquellos tubos que lo tenían, y los que no
tenían inhibidor son más oscuros.
Es no competitivo debido a que NO tiene una estructura similar a la del
sustrato. Y es irreversible por que presenta una unión covalente con la
enzima.

En otros casos, los iones de hidrógeno pueden perderse por la sustancia que
se oxida mientras se transfieren solo sus electrones a la sustancia que se
reduce (2).

Un tercer tipo de oxidación biológica puede involucrar solo una transferencia

de electrones (3).”1

“Muchas reacciones enzimáticas son reacciones de oxidación-reducción en

las que un compuesto se oxida y otro se reduce. La capacidad de un
organismo para llevar a cabo reacciones de oxidación-reducción depende del
estado de oxidación-reducción del ambiente, o su potencial de reducción (Eh)
”2

En el caso del ensayo con nuestro extracto crudo de SDH se utilizó como
indicador REDOX al azul de metileno debido a que pasa de su forma oxidada
(azul) a su forma leuco (leuco), Ver Fig. 3; funcionando como aceptor final de
electrones artificial.
Fig. 2
En el complejo II (SDH) ocurre una reacción REDOX de tipo (1) 1 y de manera
intrínseca el FADH2 (reducido) pasa a FAD+ (oxidado); tal y como se muestra
Fig. 1
en la Fig. 1. De manera fisiológica el aceptor de electrones son los centros
redox de Fe+22 y S2. Fig. 2

“Las moléculas portadoras utilizadas para transferir electrones en esta etapa

se llaman citocromos, que son una proteína portadora de electrones que
contiene un grupo hemo. El átomo de hierro de cada molécula de citocromo
puede existir en forma oxidada (Fe3 +) o reducida (Fe2 +). Dentro de la
cadena respiratoria terminal, cada molécula portadora alterna entre el
estado reducido y el estado oxidado, con el oxígeno molecular como el
aceptor final de electrones al final.” 3

Hay aproximadamente de 0.22 g a 1g por cada 100 g de riñon y 0.77g a 1.8g

por cada 100 g de corazón (Ensayos con ratas de laboratorio, cepa no
mencionada en el libro). 4

En el ensayo del complejo IV (citocromo c oxidasa) se utiliza como donador Fig. 3

de electrones artificial a la p-fenilen diamina, y como indicador de potencial
reductor (o REDOX) al alfa-naftol, la p-fenilen diamina pasa a p-fenilen
diamiina por la simple oxdiación del O2 y se polimeriza, debido a esto, en un
lapso de tiempo, todos los tubos con p-fenilen diamina pasarán a ser más
 Fig. 4

Fig. 5

Fig. 6

Conclusiones

-El malonato es un inhibidor del complejo SDH.

-El KCN es un inhibidor que actúa sobre el complejo IV de la cadena de transporte
de electrones .
-La actividad enzimática del SDH y el citocromo c oxidasa es mejor con 4 riñones
que con 1 corazón de rata de laboratorio.

Bibliografía

1., 2. y 3. Chemistry LibreTexts. (2012). Biological Oxidation. Disponible en:

https://chem.libretexts.org/Textbook_Maps/Biological_Chemistry/Metabo
lism/Catabolism/Biological_Oxidation [Consultado 19 Nov. 2018].

4. Physiology of Kidney. (2002). 4th ed. New York and London: Academic
Press, p.258.