UNIVERSIDAD DE ORIENTE

NUCLEO – BOLIVAR
ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD
“Dr. Francisco Battistini Casalta”
DEPARTAMENTO DE BIOANALISIS
CONTROL DE CALIDAD DEL LABORATORIO CLINICO

MÉTODOS DE PURIFICACION DEL AGUA

PROFESORA: BACHILLERES:
LIC. OLGA Da Silva López Olfreidys ci: 24579508
 INTRODUCCION

La calidad de agua que se emplea en laboratorios de

análisis es determinante en la calidad de sus resultados.
Laboratorios de investigación y desarrollo tecnológico en
centros de investigación o en universidades, requieren de
agua de óptima calidad para eliminar variables ocultas en
los resultados de sus análisis. También en análisis
clínicos, en trabajos con cultivos celulares o en fluidos con
componentes bioquímicos es indispensable el uso de
agua de la mejor calidad y pureza.

Pero el agua tiene la capacidad de disolver casi todo

tipo de compuestos químicos y de albergar toda forma de
vida, lo que implica que su calidad está continuamente
bajo la amenaza de cinco tipos de impurezas: partículas
en suspensión, compuestos inorgánicos, moléculas
orgánicas, gases disueltos y microorganismos, incluyendo
sus biomoléculas asociadas. Producir agua de alta pureza
para su uso en el laboratorio, implica someter al agua
potable a una serie de tratamientos de purificación para
eliminar estos diferentes tipos de impurezas. En los
cuales se utilizan diferentes métodos que nos permiten su
purificación y asi estar acta para su utilidad en los análisis
del laboratorio, entre estos se nombran la destilación,
desionizacion y ósmosis inversa.
 CALIDAD DEL AGUA EN EL LABORATORIO

La calidad de agua que se emplea en laboratorios de

análisis es determinante en la calidad de sus resultados.
Laboratorios de investigación y desarrollo tecnológico en
centros de investigación o en universidades, requieren de
agua de óptima calidad para eliminar variables ocultas en
los resultados de sus análisis. Equipos e instrumentos
como cromatógrafos de gases y de líquidos,
espectrómetros de absorción y emisión atómica, deben
operar con agua con la cual se tenga la absoluta certeza
de la ausencia de contaminantes y componentes que
puedan interferir con los resultados del análisis. También
en análisis clínicos, en trabajos con cultivos celulares o
con fluidos con componentes bioquímicos es
indispensable el uso de agua de la mejor calidad y pureza.

El agua es probablemente el material más barato entre

todos los del laboratorio. No obstante es el mas
importante y el que mas se emplea; se emplea en casi
todos los procesos de laboratorio como un médio de
reaccion ; por consiguiente los patrones para la calidad
del agua deben ser tan estrictos como los de cualquier
material que se emplee en análisis. En otras palabras, el
agua empleada en el laboratorio debe ser pura, el agua
corriente contiene distintas cantidades de
microorganismo y de materiales orgánicos e inorgánicos
disueltos o suspendidos en distintas proporciones,
dependiendo de la localización geográfica esto incluye :
sodio, cloruro, dióxido de silicio, magnesio, calcio,
carbonato, sulfato, hierro, etc.
 COMPONENTES DEL AGUA

Las aguas potables que provienen de la red de suministro

en las diferentes ciudades, contienen sólidos disueltos y
sólidos suspendidos. Los sólidos suspendidos son
partículas sólidas que pueden estar presentes en el agua,
aunque siempre en cantidades mínimas, pero que deben
removerse para obtener agua de alta pureza.

Para este fin se emplean filtros que por tamizado

mecánico retienen las partículas suspendidas y dejan
pasar el agua clarificada. Los sólidos disueltos no pueden
removerse por medios mecánicos simples y deben
emplearse tecnologías tales como; osmosis inversa,
desmineralización en lechos mixtos de resina catiónica y
aniónica o electrodeionización. En la práctica, para
obtener agua de alta pureza se emplean combinaciones
de uno o más de estos procesos, como pueden ser la
osmosis inversa seguido de la deionización en lechos de
resina mixta. La esterilización del agua también es
importante para evitar la presencia de esporas y para
controlar el crecimiento microbiano, sobre todo cuando
el agua está en almacenamiento en un depósito para ser
empleada cuando sea necesario. Para este fin se debe
disponer de un sistema de recirculación que haga fluir el
agua a través de un esterilizador ultravioleta y un filtro de
1.0 micras o menor diámetro de poros, con la finalidad de
remover esporas y desinfectar continuamente el agua con
irradiación UV de 254 nm de longitud de onda. Los
accesorios y componentes de un equipo de producción de
agua ultrapura y algunas de las sustancias presentes en el
agua causan que ésta contenga trazas de materia
orgánica que es irrelevante cuando se determinan
metales o el agua se emplea para preparación de
soluciones para uso del laboratorio pero que son
indeseables en análisis por cromatografía de gases o de
líquidos, o en cultivo y desarrollo de tejidos celulares y
por esto es necesario su remoción. Para esto se emplea
una lámpara UV que emite principalmente la banda
ultravioleta de 185 nm que reacciona fotoquímicamente
con los componentes químicos residuales de la materia
orgánica y los convierte a CO2 y H2O. En forma conjunta
con este tratamiento, se emplea un filtro de carbón
activado, el cual tiene la propiedad de adsorber
compuestos orgánicos presentes en al agua.
El ciclo natural del agua tiene diferentes compuestos que
se consideran impurezas. Estas impurezas presentes en el
agua se pueden clasificar en tres grandes Grupos:
 Iónicas: Disueltas (inorgánicos): Cationes: Ca2+,
Mg2+,Na+,K+, etc.

Aniones: HCO3-, OH-,CI-, etc.

 No iónicas: Insolubles (orgánicos, microorganismos,

pirógenos, partículas): Turbidez, color, materia
orgánica, bacterias.

 Gaseosas : CO2, H2S, NH3, O2

 ESTÁNDARES DE CALIDAD EN AGUA GRADO REACTIVO

En la actualidad los laboratorios que usan agua, tienen

establecidos requisitos de calidad o pureza, así como
métodos de producción y análisis de agua donde deben
establecerse el ó los procesos para su purificación, y de la
cual se clasifican en tipo 1,2,3

Requisitos necesarios del agua para el uso en

laboratorios, partiendo de las características establecidas
por reconocidas instituciones u organismos
internacionales que se dedican específicamente al
establecimiento de los parámetros de referencia para la
calidad del agua, tales como: American Society for
Testing and Materials (ASTM); British Standards
Institution (BSI); International Organization for
Standardization (ISO).

Los estándares establecidos, determinan la calidad del

agua por su conductividad que se expresa en
micosiemens por centímetro (µS/cm) y que es una
medida indirecta del contenido de sales que contiene el
agua. La resistividad es lo inverso y sus unidades para el
agua de alta pureza son megaohms (MΩ).

ESPECIFICACIONES SEGÚN ASTM D1193-06 (2001)

Parámetros fisicoquímicos TIPO I** TIPO II** TIPOIII* TIPO IV

Conductividad eléctrica valor 0.056 1.0 0.25 5.0

máximo a 25ºC µS/cm
 Resistividad mínima a 25°C MΩ 1 18 1.0 4.0 0.2
pH a 25°C …….. ………. …….. 5.0 a 8.0
Carbono Orgánico Total (COT) valor 50 50 200 NL
máximo µg/L
Sodio valor máximo µg/L 1 5 10 50
Cloruros valor máximo µg/L 1 5 10 50
Sílice Total valor máximo µg/L 3 3 500 NL

Estas especificaciones cubren los requisitos para el agua

apropiada para el uso en métodos de ensayos químicos y
físicos, la selección de uno o varios grados esta designado
por el método o el investigador.

NOTAS:
TIPO I*: Requiere el uso de filtro de membrana de 0.2
TIPO II**: Preparada por destilación
TIPO II**I: Requiere el uso de filtro de membrana de 0.45

Cuando se necesitan controlar los niveles bacterianos, los

tipos de grado reactivos deben tener los siguientes
niveles:

Parámetro TIPO A TIPO B TIPO C

microbiológico
Mesofílicos aerobios 1/100 mL 10/100 mL 1000/100 Ml
cuenta máxima
Endotoxinas, UE/ml 0.03 0.25 No es aplicable

Clasificación del agua de acuerdo a su característica

fisicoquímica. Especificaciones según ISO 3696: 1987 y la
NC-ISO 3696: 2004.
Parámetros TIPO I TIPO II TIPO III
fisicoquímicos
Conductividad eléctrica 0.1 1 5
valor máximo a 25 ºC,
μS/cm
Resistividad, Mâ 10 1 0.25
Absorbancia (UA a 254 0.001 0.01 --
nm)
Sílice Total valor 0.01 0.02 1
máximo mg/L
PH ------- ------- 5.0 A 7.5

PRUEBAS EN LA VERIFICACION DE PUREZA DEL AGUA

 Conductividad Específica: Es la conductividad

eléctrica entre las dos caras opuestas de un
cubo de un centímetro de una disolución
acuosa, en este caso agua, medida en
micromhos a 25ºC. Los sólidos y gases disueltos
que se ionizan en disolución conducen la
electricidad. A mayor cantidad de materiales
ionizables en agua, mayor conductividad. La
conductividad es una medida indirecta de la
pureza del agua. A mayor conductividad, más
pura es el agua.

 Resistencia Específica: Es la resistencia eléctrica

entre las dos caras opuestas de un cubo de un
centímetro de una disolución acuosa, en este
caso agua, medida en megohms a 25ºC. El agua
 sin especies ionizadas se opone al paso de la
electricidad, por consiguiente, el grado de
resistencia es proporcional al grado de pureza
del agua. A mayor resistencia específica, más
pura el agua.

Los sólidos, líquidos o gases no ionizables

disueltos en el agua no contribuyen a la
conductividad eléctrica o la resistencia del agua,
en otras palabras, una muestra de agua podría
dar una alta resistividad y baja conductividad,
indicando alta pureza, incluso cuando la
muestra de agua es impura por contaminación
procedente de solidos no ionizables.

Otros parámetros que caracterizan el tipo de agua son el

pH, el Carbono Orgánico Total, Sodio, Cloruros y Sílice. De
estos parámetros los que son más fáciles de medir y de
controlar es la conductividad o la resistividad, los cuales
se miden con un conductímetro.

El pH no es un parámetro de calidad del agua ya que

medir correctamente el pH al agua de alta pureza no es
fácil y se requiere de un electrodo especial o se deben
agregar sales al agua para poder establecer una
diferencia de potencial entre el electrodo y la solución.

La sílice es muy importante como parámetro de calidad

del agua, ya que adicionalmente a la conductividad, la
presencia de sílice, no solo afecta la calidad del agua, sino
que la sílice se encuentra en solución como ácido silícico
que se disocia de la siguiente manera:

H2SiO4 ⇒ H+ + HSiO3 - Ka=1.7×10-10

El ácido silícico tiene una constante de disociación muy

pequeña, por lo que no se disocia fácilmente, Si el agua se
trata con una resina catiónica/aniónica, el HSiO3 - se
adhiere a la resina y es removido. La ausencia o presencia
mínima de ácido silícico, es evidencia de que el agua es de
alta pureza ya que este ión es el más persistente.

CLASIFICACION DE LOS TIPOS DE AGUA SEGÚN

ASTM 1193: 2001
 TIPO I: Usada para procedimiento que
requieren de máxima exactitud y precisión;
tales como espectrometría atómica, fotometría
de llama, enzimología, gas en la sangre,
soluciones buffer de referencia y reconstitución
de materiales liofilizados usados como
estándares. El agua Tipo I, debe seleccionarse
siempre que en la prueba sea esencial un nivel
mínimo de componentes ionizados o cuando se
preparan soluciones para análisis de rastreo de
Metales.

 TIPO II: Recomendada para la mayoría de las

pruebas analíticas y generales de laboratorio,
tales como los análisis hematológicos,
serológicos y microbiológicos; así como para
métodos químicos en los que específicamente
 no se indique o se haya comprobado que
requieren agua de calidad Tipo I. La ASTM
especifica que el agua Tipo II sea preparada por
destilación y como factor importante
recomienda que esté siempre libre de
impurezas orgánicas.

 TIPO III: Satisfactoria para algunas pruebas

generales de laboratorio; para la mayoría de los
Análisis cualitativos, tales como uroanálisis,
procedimientos histológicos y parasitológicos;
Para el enjuague de muestras analíticas;
preparación de soluciones de referencia; y para
el lavado o enjuague de cristalería (el enjuague
final de la cristalería debe hacerse con el tipo de
agua especificado para el procedimiento
realizado).

 TIPO IV: Agua con una conductividad final

máxima de 5,0 μS/cm. Sirve para la preparación
de soluciones y para el lavado o enjuague de
cristalería

CLASIFICACION DE LOS TIPOS DE AGUA SEGÚN

NC-ISO 3696: 2004

Grado 1-Exenta básicamente de contaminantes

constituidos por iones disueltos o coloidales y
materias orgánicas. Es apropiada para los
requisitos de análisis más exigentes, incluyendo
la cromatografía liquida de alta definición. SE
puede preparar por un tratamiento adicional
 del agua de grado 2 (por ejemplo osmosis
inversa o desionización seguida de filtrado a
través de una membrana con tamaño de poro
de 0,2 μm para separar las partículas, o por
redestilación en un aparato de sílice fundido).

Grado 2-Con muy pocos contaminantes

inorgánicos, orgánicos o coloidales. Es
apropiada para análisis delicados, incluyendo la
espectrometría de absorción atómica (EAA) y la
determinación de componentes en cantidades
mínimas. Se puede preparar por destilación
múltiple o por desionización u osmosis inversa
seguida de destilación.

Grado 3-
Apropiada para la mayoría de los trabajos de
química en laboratorios por vía húmeda y la
preparación de soluciones de reactivos. Se
puede preparar mediante una sola destilación,
por desionización o por osmosis inversa. Salvo
indicación en contrario, se puede utilizar para el
trabajo normal de análisis

MÉTODOS DE PURIFICACION DEL AGUA

Esta agua corriente no es adecuada para su empleo en el

laboratorio clínico. Su purificacion implica la eliminación
de todo el material disuelto y suspendido que no sea
H2O, hace algún tiempo el agua de lluvia era pura, esto
no ocurre ahora asi, especialmente en las grandes
ciudades donde el agua elimina el polvo y la
polimerización de la atmosfera.

Los principales métodos de purificacion son los

siguientes:

1. Destilación: Es una técnica física para purificar el

agua que la convierte en vapor que luego se
condensa, a la vez que se retienen las sustancias no
volátiles contenidas en el agua original, como las
impurezas orgánicas e inorgánicas y los
microorganismos, que de esta forma se eliminan. En
cambio la destilación no consigue el mismo
resultado con las impurezas volátiles como el CO2, el
cloro el amoniaco y algunos compuestos orgánicos.

2. Desionizacion: Se logra al pasar el agua a través de

resinas de intercambio iónico. Los cambiadores
pueden ser de aniones o de cationes, pero nunca de
ambos simultáneamente, con el uso las resinas van
perdiendo su capacidad de intercambio debido a los
contaminantes presentes en el agua, por
consiguiente en el agua purificada de comprobarse
periódicamente si hay presente contaminación
bacteriana, asi como la resistencia específica para
asegurarse que la columna esté funcionando
correctamente. Algunas veces se tiene que cambiar
la columna prematuramente cuando la
comprobación indica algún deterioro.
 El intercambio iónico no puede emplearse con
provecho para purificar el agua corriente ( de grifo),
se emplea más bien para “pulir” o mejorar el grado
del agua destilada o del agua procedente de una
unidad de osmosis inversa. Las columnas de
desionizacion también funcionan como una bomba
de circulación, la cual recircula el agua
continuamente por las columnas a todas horas.

Este sistema tiene dos ventajas: primero, el agua se

hace más pura cada vez que circula; segundo, un
flujo continuo evita el posible crecimiento de
bacterias en el agua estancada.

Pero tiene dos desventajas: primero, el proceso no

elimina los componentes orgánicos, partículas
materiales ni microorganismos; segundo, solo opera
con agua que ha pasado una purificacion preliminar.

3. Osmosis inversa: Es el proceso por el cual se fuerza

el agua a pasar a través de una membrana
semipermeable que actúa como un filtro molecular.
La membrana elimina entre un 95 y 99% de la
materia orgánica, las bacterias y las demás materias
particuladas, y entre el 90 y el 97% de todos los
minerales ionizados o disueltos. Sin embargo elimina
menos las impurezas gaseosas. La osmosis no es
adecuada como sistema de purificacion de agua para
laboratorio, pero es buena como purificacion
preliminar del agua que va alimentar a una unidad
desionizadora.
 BIBLIOGRAFIA

Bolaño-Guillén A, Pérez-López M, Garza-Cano E.

Tutorial de análisis de agua. [Sitio en Internet]
Tripod.Disponibleen:http://arturobola.tripod.com/gl
osa.htm. Acceso 13 de mayo 2010.

ASTM 1193: 2001 Standard specification for reagent

water.

BS 3978: 1987 British Standard Specification for

water for laboratory use.