N° UNIDAD Y NOMBRE INSTITUTO TECNOLÓGICO FECHA:

SUPERIOR DE
COATZACOALCOS
CARRERA: INGENIERÍA BIOQUÍMICA GRADO Y GRUPO: 6° “A” PERIODO: FEB-JUN 2019
MATERIA: MICROBIOLOGÍA
ALUMNO: JESÚS ISRAEL VÁZQUEZ MATEO
DOCENTE: ING. ANGELICA GOMEZ MOLINA

Práctica 3: Técnicas microbianas II

Parte A: Preparación de un frotis para tinción:

Con un asa estéril y fría

Limpiar perfectamente una Coloca una gota de agua transporta la cantidad deseada
laminilla y flamearla destilada en la parte media de del cultivo a examinar y hacer
ligeramente la laminilla una suspensión en la gota de
agua

Fija el frotis pasándolo

rápidamente sobre la flama del
Realiza una extensión de 1
Deja secar al aire (el frotis se mechero (en la parte más alta
cm2 aproximadamente con
torna opaco) de la flama) por el lado en que
ayuda del asa.
no esta la extensión de la
muestra.

Deja enfriar y la extensión está Tiñe el frotis durante un

Lávalo con agua
lista para teñirse minuto con azul de metileno

Deposita una gota de aceite de

Observa al microscopio con el
Escurre y dejar secar al aire inmersión sobre el frotis
objetivo de 100X (seco fuerte).
teñido y seco

Nota: una buena extensión no debe tener una cantidad excesiva de bacterias, procure seguir estas
indicaciones con mucho cuidado, ya que de ello depende el éxito de su tinción y observación.
 N° UNIDAD Y NOMBRE INSTITUTO TECNOLÓGICO FECHA:
SUPERIOR DE
COATZACOALCOS
CARRERA: INGENIERÍA BIOQUÍMICA GRADO Y GRUPO: 6° “A” PERIODO: FEB-JUN 2019
MATERIA: MICROBIOLOGÍA
ALUMNO: JESÚS ISRAEL VÁZQUEZ MATEO
DOCENTE: ING. ANGELICA GOMEZ MOLINA

Parte B: Coloración de esporas:

Déjalo actuar 40 a 60
Prepara un frotis de la Cúbrelo con una segundos en frío y a
manera usual (pasos del solución de verde continuación calienta a
1 al 7 de la parte A) malaquita ignición de vapores por
1 minuto

Lávalo con abundante Cúbrelo con safranina Lávalo, escurre y dejar

agua y escurre durante 30 segundos secar al aire

Deposita una gota de

Observa al microscopio
aceite de inmersión
con el objetivo de 100X
sobre el frotis teñido y
(seco fuerte).
seco

Nota: las esporas se observan de color verde y la zona central (celular) de color
roja

C: Coloración de capsula (método de Hiss):

Use una gota de

Cubre con fucsina y
suero sanguíneo Sécalo al aire y
deja actuar 30
para elaborar el fíjalo al calor
segundos
frotis

Lava con una

Calienta a emisión
solución al 20% de Deja secar
de vapores
CuSO4

Deposita una gota Observa al

de aceite de microscopio con el
inmersión sobre el objetivo de 100X
frotis teñido y seco (seco fuerte).
 N° UNIDAD Y NOMBRE INSTITUTO TECNOLÓGICO FECHA:
SUPERIOR DE
COATZACOALCOS
CARRERA: INGENIERÍA BIOQUÍMICA GRADO Y GRUPO: 6° “A” PERIODO: FEB-JUN 2019
MATERIA: MICROBIOLOGÍA
ALUMNO: JESÚS ISRAEL VÁZQUEZ MATEO
DOCENTE: ING. ANGELICA GOMEZ MOLINA

Práctica 4: TINCIÓN DIFERENCIAL.

Parte A. Coloración negativa (Método de la tinta china):

Con el asa estéril y fría, tome

Coloque una gota de tinta
una pequeña muestra del
china en el extremo de un
cultivo por examinar y
portaobjetos perfectamente
mézclelo cuidadosamente
limpio.
con el colorante.

Dejar secar al aire y observar

Con otro cubreobjetos limpio
al microscopio en objetivo de
extienda la suspensión.
inmersión

Parte B. Tinción de Gram.

Con un asa fría esterilizada

Colocar una gota de agua
Limpiar perfectamente el
destilada en la parte media
portaobjetos
del portaobjetos.
transportar la cantidad
deseada del cultivo y hacer
una suspensión en la gota
de agua.

Fijar el frotis pasándolo Teñir durante un minuto

Deje secar al aire. sobre la flama y deje con la solución de cristal
enfriar. violeta, lavar con agua.

Escurra el lugol y lave con

agua, cubra la preparación Cubra la preparación con
Escurra y cubra con lugol
con alcohol acetona 1 safranina por un minuto y
dejándolo actuar 1 minuto.
minuto y lave lave con agua.
abundantemente con agua

Colocar una gota de aceite

de inmersión sobre el frotis
Escurrir y dejar secar al aire
y observar en objetivo
100X
 N° UNIDAD Y NOMBRE
CARRERA: INGENIERÍA BIOQUÍMICA
MATERIA: MICROBIOLOGÍA
ALUMNO: JESÚS ISRAEL VÁZQUEZ MATEO
DOCENTE: ING. ANGELICA GOMEZ MOLINA
Parte C. Coloración de Zhiel Neelsen
Prepara un frotis del esputo, deje
secar al aire y fíjelo al calor
Lave con agua y luego decolore con
alcohol ácido
Lave con agua y deje secar al aire
INSTITUTO TECNOLÓGICO FECHA:
SUPERIOR DE
COATZACOALCOS
GRADO Y GRUPO: 6° “A” PERIODO: FEB-JUN 2019
Cubra la preparación con carbol
fucsina y calienta a emisión de
vapores durante 5 minutos,
cuidando que no hierva el colorante.
Añadir colorante de vez en cuando
para evitar que el éste se seque.
Lave con agua y cubra la preparación
con azul de metileno durante 1
minuto
Coloca una gota de aceite de
inmersión sobre el frotis y observa
en objetivo 100x