Controle do Ciclo Celular

Características
Controle Intracelular
Controle Intracelular

Fase S
– Mecanismo que desencadeia a replicação do DNA

Estudos com células humanas fusionadas

S G1 S G2 G1 G2

Início da replicação

– Origens de replicação

Estudo em
Leveduras

Início da G1

Complexo de
Reconhecimento da
Origem (CRO)

Cdc6

– Proteínas Mcm

Complexo Pré-
replicativo (pré-RC)

Ativação da S-Cdk

S-Cdk
– Inicia a replicação;

– Impede re-replicações

Dissociação da Cdc6 do pré-RC

Dissociação do pré-RC

Fosforilação e consequente ubiquitinação da Cdc6 pelo

complexo SCF

Fosforilação de algumas proteínas Mcm

– Sua atividade permanece alta durante a fase G2 e início da

mitose

– A M-Cdk também fosforila a Cdc6 e Mcm durante a mitose.

– A G1/S-Cdk induz a exportação da Mcm para fora do núcleo.


Fase M
– Ativação da M-Cdk

Acúmulo de M-Ciclina (ciclina B em vertebrados)

– Síntese de M-ciclina é constante em embriões

– Aumenta durante G2 e M – Aumento da transcrição

– Forma complexos M-Cdk que se acumulam no estado:

Cdk fosforilada pela CAK

Cdk Inibida pela Wee1

Final da fase G2

– Ativação da fosfatase Cdc25

Pólo-quinase e M-Cdk

M-Cdk inibe Wee 1


Ativação da M-Cdk envolve uma
retroalimentação positiva

Ponto de checagem da replicação do DNA
– Bloqueio da ativação da M-Cdk em caso de erro
na replicação do DNA

Inibição da fosfatase Cdc25

M-Cdk
– Responsável por quase todos os eventos do
início da mitose:

Reunião do fuso mitótico e ligação dos cromossomos no
fuso

Rompimento do envelope nuclear


Condensação dos cromossomos

– M-Cdk ativa o complexo condensina

Reorganização dos microtúbulos

– M-Cdk fosforila proteínas de regulação dos microtúbulos

Coesão das cromátides-irmã

– Complexo de coesão

Separação das cromátides-irmã

– Complexo Promotor da Anáfase (APC)

Ubiquitina-ligase

Destruição de proteínas mitóticas (proteólise)

Alvo: Securina, que é inibidora da Separase


Ponto de checagem da fixação do fuso
– Cinetocoro

Cinetocoro mal fixado no fuso

– Bloqueio da ativação do Cdc20 – APC

– Sinalização – Mad2

Finalização da Mitose
– Defosforilação nas proteínas que impediam a mitose

Inativação da M-Cdk

Ativação das fosfatases


Fase G1
– Em células que não tem fase G1

M-Cdk inativada pelo APC-Cdc20

M-Cdk estimula a atividade do APC-Cdc20, logo:

Inativação da atividade de APC

Rápido acúmulo de M-ciclinas

– Em células que possuem fase G1

Retardo da fase S: para crescimento e sinais extracelulares

1º Mecanismo:
– Hct1-APC é inibido pela
M-ciclina

– Cdc20-APC inativa M-
ciclina (Hct1-APC 1
liberado)

2º Mecanismo:
– Leveduras de brotamento

– Semelhante ao 1º mecanismo, no entanto:

Atividade da M-Cdk fica estavelmente inibida em G1 por
um aumento na CKI (Sic 1) (proteína Cdk inibitória).

CKI durante a mitose era inibida pela M-Cdk por

fosforilação e inibição do gene da CKI.

Saída da fase G1 e entrada na fase S:
– Acúmulo de G1-ciclinas

Não são inibidas por Hct1 – APC e pela CKI Sic1.

Em animais: sinais extracelulares para proliferação celular.

– Aumento na atividade da G1-Cdk:

Desencadeia transcrição dos genes da G1/S-ciclina

Formação dos complexos G1/S-Cdk (Hct1-APC e Sic

resistentes):

– Entrada na fase S, transcrição dos genes da S-ciclina,

formação de S-Cdk.

– G1/S-Cdk e S-Cdk fosforilam e inativam Sic1 e Hct1-APC.

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Mitose