Universidad Nacional Autónoma de México.

Facultad de Estudios Superiores Zaragoza.

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA

CARRERA: QFB
MICROBIOLOGÍA GENERAL I

MULTIPLICACION BACTERIANA (REQUERIMIENTOS

FISICIQUIMICOS).

GRUPO: 2652

ASESORA:
QFB GEORGINA BERMEJO TORRES.

EQUIPO: 9
ALUMNO: BECERRIL BONILLA JUAN

SEMESTRE: 2019-2
 MULTIPLICACION BACTERIANA (REQUERIMIENTOS FISICIQUIMICOS).

Objetivos:

Identificar las necesidades fisicoquímicas de los microorganismos observando cómo

influyen estos en la multiplicación bacteriana.

Diagramas de flujo:

 Efecto de la temperatura

Inicio En ambas placas sembrar por

Dividir en cuatro partes
ambas placas estría simple, en su respectivo
cuadrante cada cepa.

Cepas:
 Dos placas de medio de Placa 1.Encubar Placa 2.Encubar
K. pneumoniae
agar nutritivo. a 37ºC por 48 a 25ºC por 48
S.aureus
 Material: horas. horas.
E. coli
Asa bacteriológica.
C.equi

Leer las placas e identificar si hubo

o no crecimiento bacteriano.
Efecto del pH.

Dividir en cuatro partes En ambas placas: sembrar por

Inicio estría cerrada, en su respectivo
ambas placas.
cuadrante cada cepa.

Encubar ambas placas a 37ºC por

Cepas: 1 placa de medio agar nutritivo a 48 horas.
pH 6 y pH 9 pH 6.
S.aureus 1 placa de medio agar TCBS a pH 9.

P. vulgaris Materiales:
S. typhi Asa bacteriológica. Leer las placas e identificar si hubo
E. coli o no crecimiento bacteriano.
 Requerimiento de oxigeno

Dividir las dos placas en tres En ambas placas: sembrar por

Inicio
zonas. estría cerrada, en su respectivo
cuadrante cada cepa.

Cepas: Placa 1.Encubar a Placa 2.Encubar

una atmosfera sin en aerobiosis a
E. coli 1 placa de medio agar tioglicolato.
oxígeno en una 37ºC por 48
P. aeruginosa 1 placa de medio agar tioglicolato
 caja de horas.
Clostridium spp en caja Petri de plástico.
anaerobiosis por
 Materiales:
48 horas.
 Asa bacteriológica.

Leer las placas e identificar si hubo

o no crecimiento bacteriano.

 Efecto de la presión osmótica

En ambas placas: sembrar por

Inicio Dividir las dos placas en
estría cerrada, en su respectivo
cuatro zonas.
cuadrante cada cepa.

Encubar ambas placas a 37ºC por

Cepas: 1 placa de medio agar nutritivo con 48 horas.
C. equi 7.5% más de sal.
 1 placa de medio agar nutritivo
S. aureus
 normal.
E. coli
Materiales:
K. pneumoniae Leer las placas e identificar si hubo
Asa bacteriológica.
o no crecimiento bacteriano.
  Efecto de la humedad

Sembrar S. aureus y E. Coli en

Inicio Sembrar ambos tubos de agar nutritivo con 3% de agar
agar nutritivo uno con S. con baja humedad.
aureus y otro con E. coli.

En dos tubos se pone agar nutritivo Incubar los 3 tubos a 37ºC por 48
Cepas:
con 3% de agar como baja horas.
S. aureus
humedad.
E. coli
2 tubos con agar nutritivo.
Materiales:
Asa bacteriológica.
Comparar el desarrollo en ambos
tubos.

Resultados

Efectos de la temperatura (cuadro 1)

Cepas Crecimiento Crecimiento Crecimiento observado Crecimiento observado

bacterianas de bacteriano a temperatura ambiente a 37 grados de
utilizadas bacteriano a de siembra de E. coli, siembra de E. coli, K.
a temperatura K. pneumoniae , S. pneumoniae, S.
temperatura de 37 aureus, C. equi. aureusCequii.
ambiente grados
k. Hubo Hubo
Pneumoniae crecimiento crecimiento

S.aureus Hubo Hubo

crecimiento crecimiento
E. coli Hubo Hubo
crecimiento crecimiento
C.equi Hubo Hubo
crecimiento crecimiento

Efectos del pH ( cuadro 2)

Cepas Crecimiento Crecimiento Crecimiento observado en el Crecimiento observado en
bacterianas bacteriano bacteriano laboratorio a pH 6 después el laboratorio a pH 9 en
utilizadas a pH 6 a ph 9 agar de incubar de E. coli y P. agar tcbs después de
tcbs vulgaris incubar de E. coli y P.
E. coli hubo No hubo vulgaris
crecimiento crecimiento

P. vulgaris Hubo Hubo

crecimiento crecimiento
Coloración
amarilla

S.aureus hubo hubo Crecimiento observado en

crecimiento crecimiento el laboratorio a pH 9 en
coloración agar tcbs después de
amarilla Crecimiento observado en
laboratorio a pH 6 después incubar de S. aureus y S.
de incubar de typhy
S. aureus. y S. typhi

S. thypi Crecimiento No hubo

moderado crecimiento

Requerimiento de oxigeno ( cuadro 3)

Cepas Crecimiento Crecimiento Crecimiento Crecimiento observado

utilizadas bacteriano en bacteriano en observado en en laboratorio en agar
agar triglicolato agar triglicolato laboratorio en agar triglicolato medio
medio aerobio medio anaerobio triglicolato medio aanaerobio de E. coli,
aerobio de E. coli, P. P. aeruginosa,
E. coli Hubo Hubo aeruginosa, clostridium spp
crecimiento crecimiento clostridium spp
P. aeruginosa Hubo No hubo
crecimiento crecimiento

Clostridium No hubo Hubo

spp crecimiento crecimiento

Efecto de la presión osmótica ( cuadro 4)

 Cepas Crecimient Crecimiento Crecimiento observado Crecimiento observado en
utilizadas o observado en agar nutritivo en agar nutritivo en
observado en agar sembrado en cuadrantes sembrado con 7.5 % de sal
en agar nutritivo con de C. equi, K. en cuadrantes de C. equi,
nutritivo 7.5 % de sal pneumoniae, S. aureus, K. pneumoniae, S. aureus,
C. equi Hubo No hubo E. coli. E. coli.
crecimiento crecimiento

K. Hubo No hubo
pneumoniae crecimiento crecimiento

S. aureus Hubo Hubo

crecimiento crecimiento

E. coli No hubo Crecimiento

crecimiento moderado

Efecto de la humedad ( cuadro 5)

Cepas Crecimiento Crecimiento Crecimiento Crecimiento

bacterianas bacteriano observado en bacteriano observado en agar
utilizadas observado en agar nutritivo en observado en agar nutritivo en agar
agar nutritivo en agar nutritivo 3 % nutritivo en tubo de nutritivo al 5 % de S.
tubo S. aureus aureus

S. Aureus Hubo crecimiento Hubo crecimiento

Crecimiento
E. Coli Hubo crecimiento Hubo crecimiento Crecimiento observado en agar
bacteriano nutritivo en agar
observado en agar nutritivo al 5 % de E.
nutritivo en tubo de coli
E. coli
Análisis de resultados

Las bacterias para que se multipliquen a demás de los nutrientes necesitan factores
fisicoquímicos óptimos, tales como: temperatura, pH, tensión de oxígeno, presión
osmótica y humedad. Es por ello que en la presente practica se realizaron siembras
de diferentes cepas, sometidas a variaciones de los factores fisicoquímicos ya
mencionados anteriormente, con la finalidad de identificar las necesidades
fisicoquímicas de los microorganismos.

Efecto de la temperatura.

La prueba de efecto de la temperatura se realizo solo para Dichas cepas k.

pneumoniae, S.aureus, E. coli, C.equi sembradas por igual en dos placas de agar
nutritivo una placa se incubo a 37ºC y la otra se incubo a 25ºC, todas las cepas
incubadas crecieron en ambas temperaturas, los datos se encuentran descritos en
el cuadro 1. Se reporto como "hubo crecimiento" con base en la observación de
multiplicación bacteriana (crecimiento), y sí por el contrario esta no presento dicha
característica se reporto como no hubo crecimiento.

Como se describe en el cuadro 1 la cepa de K. pneumoniae presento multiplicación

en ambas temperaturas de incubación. El resultado se atribuye a que esta bacteria
puede crecer a una velocidad considerable en un rango de temperatura que se halla
entre los 25º y 45ºC, siendo 37ºC la temperatura óptima de crecimiento y
multiplicación. Esto no hace referencia a que la bacteria solo se multiplique a esa
temperatura, si no que a 37ºC se multiplica mejor y con mayor velocidad.
En el caso de E. coli y como se indica en el cuadro 1 presento multiplicación en ambas
temperaturas. Los resultados obtenidos se deben a que dicha bacteria tiene la
capacidad de multiplicarse preferentemente a 37 ºC, pero esto no indica que solo a
esa temperatura pueda multiplicarse, si no que es la temperatura optima para su
crecimiento. A si de esta manera se atribuye que creció a temperatura ambiente
porque 25ºC está dentro de sus rangos de aceptación.

En el caso de c. equi como se indica en el cuadro 1 presento multiplicacion en ambas

temperaturas. Los resultados obtenidos se deben a que dicha bacteria tiene la
capacidad de multiplicarse preferentemente a 37 ºC, pero esto no indica que solo a
esa temperatura pueda multiplicarse, si no que es la temperatura optima para su
crecimiento, aun que el rango de esta bacteria puede variar de 10°C a 45 °C que esta
dentro del rango del crecimiento para crecimiento a 25 °C.

Para S. aureus (con temperatura óptima de crecimiento de 35 a 40 °C.) Presentaron

multiplicación bacteriana en ambas temperaturas como se indica en el cuadro 1
tanto a temperatura de 37 °C, tanto a 25 °C, esta bacteria también puede crecer a 25
grados ya que su rango de crecimiento va de 6.5 °C a 65 °C.
fecto del pH.

Se realizo la prueba de multiplicación bacteriana en relación al efecto del pH con E.

coli , P. vulgaris, S. typhi y S. aureus. Se llevo a cabo en dos placas; en agar nutritivo
pH6 y en agar nutritivo pH 9 en medio tcbs

La determinación del efecto de pH, como se indica en el cuadro 2,, cada una de las
bacteria , P. vulgaris, S. aureus se multiplicaron en ambos pH (tanto pH6 como pH9).
El resultado se debe a que el pH utilizado en cada placa para dicha práctica, se
encuentran dentro del rango establecido para la clasificación de bacterias
neutrófilas, es decir, se presento crecimiento en ambas placas con pH diferente pero
no porque estas bacterias sean acidófilas o alcolófilas necesariamente, si no que
están dentro del rango de pH para que estas se multipliquen, aunque su pH óptimo
sea de 7.

Las bacterias que unicamente crecieron a pH 6 en agar nutritivo fueron .E.coli y S.

typhi y no crecieron en ph 9, el E. coli ya que puede crecer a ese ph 9 como maximo
pero puede ser que la bacteria no tolero el medio o un mal sembrado del mismo.
Para S. typhi tambien fue mal sembrada por que es una bacteria que puede tolerar
hasta pH 9.5, pudo haber sido causado por error humano en sembrado.

Se utilizo agar tcbs que es agar o agar tiosulfato citrato bilis sacarosa este agar se
utilizo por que tiene indicadores como azul de bromotimol y azul de timol que al
producir productos ácidos vira a amarillo y azul ver brillante indica que hay
presente alcalinidad, en nuestro caso P. vulgaris y S. aureus son fermentadores de
sacarosa y producieron esa coloración amarilla en el medio tcbs.

Requerimiento de oxígeno.

La prueba de tensión de oxigeno, se realizo con la finalidad de identificar en E. coli,

P. aeruginosa, Clostridium spp la capacidad que tienen de tolerar la presencia o
ausencia de oxigeno, según sea el caso y como es que repercute respecto a su
multiplicación bacteriana.
Como se indica en cuadro 3 se presento multiplicación bacteriana en ambas placas
(condición aerobia y condición anaerobia) de E. coli ya que es una bacteria
facultativa ya que puede crecer en medio aerobio como anaerobio, resultado, lo que
les permite multiplicarse tanto en presencia de oxigeno como en tolerar
condiciones bajas del mismo, lo qud hace que el agar trioglicolato se vea crecimiento
de la bacteria .
Respecto a P. auroginosa es un aerobio estricto que solamente ciertas ocasiones
puede ocupar en el nitrato como podemos observar en el cuadro 3 solo hubo
crecimiento en el agar trioglicolato en medio aerobio en medio anaerobio no hubo
crecimiento.
En la siembra de clostridium spp hubo solamente crecimiento en la placa de
crecimiento anaerobio y no en la de aerobio, eso concluye que el clostridium spp es
anaerobio unicamente que si coincide por que es una bacteria que solamente puede
crecer en medio anaerobio.

 Efecto de la presión osmótica.

Para llevar a cabo esta prueba se utilizo se empleo C. equi, S. aureus, E. coli, K.
pneumoniae se pusieron e una placa de agar nutritivo y otra placa de este mismo
pero con 7.5% de sal, esto con la finalidad de observar si las bacterias son capaces
de tolerar ambientes con elevada concentración de sales o solutos en general sin
que este le afecta a su crecimiento bacteriano.
Como se obserba en el cuadro 4 ambas placas las bacterias sì presentaron
multiplicacion bacteriana tanto en el agar nutritivo y el agar sal 7.5 % para ra las
bacterias E. coli, y S. aureus aun que en menor cantidad en la placa de agar sal 7.5 %
con un poco de crecimiento moderado, puede atribuirse a que en estas bacterias sus
membranas plasmaticas tienen cierta tolerancia a concentraciones elevada de sal.
El crecimiento de K. pneumoniae y C. Equi en la placa de agar nutritivo si se llevo
acabo pero en el agar nutritivo 7.5 % sal no crecieron esto puede ser debidio a que
K. pneumoniae solo tolera una atmosfera de presion y tiene poca tolerancia a altas
concentración de sal al igual que C. equi.

 Efecto de la humedad.

Los microorganismos no tienen la capacidad de retención de agua, como los

organismos superiores, es por ello que su metabolismo y desarrollo depende de un
medio en el que exista agua. Así de esta forma proporcionándoles un medio con
humedad optima estos tendrán una mejor multiplicación y crecimiento bacteriano.
Con la finalidad de observar cómo es que influye el factor de humedad en el
crecimiento bacteriano, se utilizaron dos cepas: S. aureus y E. coli. que se sembraron
cada una en un tubo con medio agar nutritivo y en tubos con agar nutritivo con 1.5
% con baja humedad se sembro E. coli y S.. aureus en dicho medios. Como se indica
en el cuadro numero 5 las cepas S. aureus y E. coli crecieron y se multiplicaron
perfectamente en medio agar nutritivo, debido a que poseen los nutrientes y la
humedad optima para su multiplicación, pero tambien en los tubos de agar 1.5%
Posiblemente por que todavía contaban con la humedad adecuada que les permitia
como tal reproducirse.

Conclusiones

Los principales requerimientos de los microorganismos para su multiplicación

bacteriana óptima, se divide en dos principales: los requerimientos químicos y los
requerimientos físicos.

Dentro de los requerimientos químicos el más importante es la tensión de oxigeno,

debido a que no todas las bacterias necesitan oxígeno para multiplicarse (aerobias),
existen algunas que pueden multiplicarse en condiciones bajas de oxigeno o
simplemente necesitan una atmosfera libre de el mismo para su optima
multiplicación.

El factor de pH es importante pero que la mayoria de las bacterias que

determinamos tienen un amplio rango crecimiento tanto en medios básicos como
ácidos.

Que también las bacterias que determinamos son mesofilas con temperaturas de
crecimiento dentro del rango de 30 a 45 grados centígrados.

Se determina que dependiendo de cada bacteria va requerir ciertas condiciones para

que pueda sobrevivir.

Referencias

Madigan, T. M., Martinko, M. J., Dunlap, V. P. & Clark Brock. Biología de los
microorganismos. (2009). España: Pearson Educación, S. A.

Prescott, L. M., Harley, J. P. y Klein. Microbiología. (1999). España: Mc Graw-

HillInteramericana.

Tortora, J.G., Funke, R.B. y Case. Introducción a la microbiología. (2007). San

Francisco: Pearson Education Inc.