Universidad Nacional Autónoma de México.

Facultad de Estudios Superiores Zaragoza.

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA

CARRERA: QFB
MICROBIOLOGÍA GENERAL I

MULTIPLICACION BACTERIANA (REQUERIMIENTOS

FISICIQUIMICOS).

GRUPO: 2652

ASESORA:
QFB GEORGINA BERMEJO TORRES.

EQUIPO: 9
ALUMNO: BECERRIL BONILLA JUAN

SEMESTRE: 2019-2
 MULTIPLICACION BACTERIANA (REQUERIMIENTOS FISICIQUIMICOS).

Objetivos:

Identificar las necesidades fisicoquímicas de los microorganismos observando cómo

influyen estos en la multiplicación bacteriana.

Diagramas de flujo:

 Efecto de la temperatura

Dividir en cuatro partes ambas En ambas placas sembrar por

Inicio estría simple, en su respectivo
placas
cuadrante cada cepa.

Cepas:
 Dos placas de medio de Placa 1.Encubar a Placa 2.Encubar a
K. pneumoniae
agar nutritivo. 37ºC por 48 horas. 25ºC por 48 horas.
S.aureus
 Material:
E. coli
Asa bacteriológica.
C.equi

Leer las placas e identificar si hubo o

no crecimiento bacteriano.

Efecto del pH.

Dividir en cuatro partes ambas En ambas placas: sembrar por estría

Inicio cerrada, en su respectivo cuadrante
placas.
cada cepa.

1 placa de medio agar nutritivo a pH 6. Encubar ambas placas a 37ºC por 48

Cepas: horas.
1 placa de medio agar TCBS a pH 9.
9
pH 6 y pH Materiales:
S.aureus Asa bacteriológica.
P. vulgaris
S. typhi Leer las placas e identificar si hubo o no
E. coli crecimiento bacteriano.
 Requerimiento de oxigeno

Dividir las dos placas en tres En ambas placas: sembrar por estría
Inicio
zonas. cerrada, en su respectivo cuadrante
cada cepa.

Cepas: Placa 1.Encubar a una Placa 2.Encubar en

1 placa de medio agar tioglicolato.
E. coli  1 placa de medio agar tioglicolato en
atmosfera sin oxígeno aerobiosis a 37ºC por
 en una caja de 48 horas.
P. aeruginosa caja Petri de plástico.
anaerobiosis por 48
 spp
Clostridium Materiales:
horas.
 Asa bacteriológica.


Leer las placas e identificar si hubo o no

crecimiento bacteriano.

 Efecto de la presión osmótica

En ambas placas: sembrar por estría

Inicio Dividir las dos placas en cuatro
cerrada, en su respectivo cuadrante
zonas.
cada cepa.

Cepas: 1 placa de medio agar nutritivo con Encubar ambas placas a 37ºC por 48
C. equi 7.5% más de sal. horas.

S. aureus 1 placa de medio agar nutritivo normal.
E. coli  Materiales:
Asa bacteriológica.
K. pneumoniae
Leer las placas e identificar si hubo o no
crecimiento bacteriano.

 Efecto de la humedad
 Sembrar S. aureus y E. Coli en agar
Inicio Sembrar ambos tubos de agar nutritivo con 3% de agar con baja
nutritivo uno con S. aureus y otro humedad.
con E. coli.

Cepas:
En dos tubos se pone agar nutritivo con Incubar los 3 tubos a 37ºC por 48 horas.
S. aureus
3% de agar como baja humedad.
E. coli
2 tubos con agar nutritivo.
Materiales:
Asa bacteriológica.
Comparar el desarrollo en ambos tubos.

Resultados

Efectos de la temperatura (cuadro 1)

Cepas Crecimiento Crecimiento Crecimiento observado Crecimiento observado

bacteriana de bacteriano a temperatura a 37 grados de
s utilizadas bacteriano a ambiente siembra de E. coli, K.
a temperatur de siembra de E. coli, pneumoniae, S.
temperatur a de 37 K. pneumoniae , S. aureusCequii.
a ambiente grados aureus, C. equi.
k. Hubo Hubo
Pneumoniae crecimiento crecimiento

S.aureus Hubo Hubo

crecimiento crecimiento
E. coli Hubo Hubo
crecimiento crecimiento
C.equi Hubo Hubo
crecimiento crecimiento

Efectos del pH ( cuadro 2)

Cepas Crecimient Crecimient Crecimiento observado en el Crecimiento observado en
bacteriana o o laboratorio a pH 6 después el laboratorio a pH 9 en
s utilizadas bacteriano bacteriano de incubar de E. coli y P. agar tcbs después de
a pH 6 a ph 9 vulgaris incubar de E. coli y P.
agar tcbs vulgaris
E. coli hubo No hubo
crecimient crecimient
o o

P. vulgaris Hubo Hubo

crecimient crecimient
o o
Coloración
amarilla
Crecimiento observado en
S.aureus hubo hubo el laboratorio a pH 9 en
crecimient crecimient agar tcbs después de
Crecimiento observado en
o o incubar de S. aureus y S.
laboratorio a pH 6 después
coloración typhy
de incubar de
amarilla
S. aureus. y S. typhi

S. thypi Crecimient No hubo

o crecimient
moderado o

Requerimiento de oxigeno ( cuadro 3)

Cepas Crecimiento Crecimiento Crecimiento Crecimiento observado

utilizadas bacteriano en bacteriano en observado en en laboratorio en agar
agar triglicolato agar triglicolato laboratorio en agar triglicolato medio
medio aerobio medio anaerobio triglicolato medio aanaerobio de E. coli,
aerobio de E. coli, P. P. aeruginosa,
E. coli Hubo Hubo
aeruginosa, clostridium spp
crecimiento crecimiento
clostridium spp
P. aeruginosa Hubo No hubo
crecimiento crecimiento

Clostridium No hubo Hubo

spp crecimiento crecimiento

Efecto de la presión osmótica ( cuadro 4)

 Cepas Crecimient Crecimiento Crecimiento observado Crecimiento observado en
utilizadas o observado en agar nutritivo en agar nutritivo en
observado en agar sembrado en cuadrantes sembrado con 7.5 % de
en agar nutritivo con de C. equi, K. sal en cuadrantes de C.
nutritivo 7.5 % de sal pneumoniae, S. aureus, equi, K. pneumoniae, S.
C. equi Hubo No hubo E. coli. aureus, E. coli.
crecimiento crecimiento

K. Hubo No hubo
pneumoniae crecimiento crecimiento

S. aureus Hubo Hubo

crecimiento crecimiento

E. coli No hubo Crecimiento

crecimiento moderado

Efecto de la humedad ( cuadro 5)

Cepas Crecimiento Crecimiento Crecimiento Crecimiento

bacterianas bacteriano observado en bacteriano observado en agar
utilizadas observado en agar nutritivo en observado en agar nutritivo en agar
agar nutritivo en agar nutritivo 3 nutritivo en tubo nutritivo al 5 % de
tubo % de S. aureus S. aureus

S. Aureus Hubo Hubo crecimiento

crecimiento

Crecimiento
E. Coli Hubo Hubo crecimiento Crecimiento observado en agar
crecimiento bacteriano nutritivo en agar
observado en agar nutritivo al 5 % de
nutritivo en tubo E. coli
de E. coli
Anáá lisis de resultádos

Lás bácteriás párá que se multipliquen á demáá s de los nutrientes necesitán

fáctores fisicoquíámicos oá ptimos, táles como: temperáturá, pH, tensioá n de oxíágeno,
presioá n osmoá ticá y humedád. Es por ello que en lá presente prácticá se reálizáron
siembrás de diferentes cepás, sometidás á váriáciones de los fáctores
fisicoquíámicos yá mencionádos ánteriormente, con lá finálidád de identificár lás
necesidádes fisicoquíámicás de los microorgánismos.

Efecto de lá temperáturá.

Lá pruebá de efecto de lá temperáturá se reálizo solo párá Dichás cepás k.

pneumoniáe, S.áureus, E. coli, C.equi sembrádás por iguál en dos plácás de ágár
nutritivo uná plácá se incubo á 37ºC y lá otrá se incubo á 25ºC, todás lás cepás
incubádás crecieron en ámbás temperáturás, los dátos se encuentrán descritos en
el cuádro 1. Se reporto como "hubo crecimiento" con báse en lá observácioá n de
multiplicácioá n bácteriáná (crecimiento), y síá por el contrário está no presento
dichá cárácteríásticá se reporto como no hubo crecimiento.

Como se describe en el cuádro 1 lá cepá de K. pneumoniáe presento multiplicácioá n

en ámbás temperáturás de incubácioá n. El resultádo se átribuye á que está bácteriá
puede crecer á uná velocidád consideráble en un rángo de temperáturá que se hállá
entre los 25º y 45ºC, siendo 37ºC lá temperáturá oá ptimá de crecimiento y
multiplicácioá n. Esto no háce referenciá á que lá bácteriá solo se multiplique á esá
temperáturá, si no que á 37ºC se multiplicá mejor y con máyor velocidád.
En el cáso de E. coli y como se indicá en el cuádro 1 presento multiplicácioá n en
ámbás temperáturás. Los resultádos obtenidos se deben á que dichá bácteriá tiene
lá cápácidád de multiplicárse preferentemente á 37 ºC, pero esto no indicá que solo
á esá temperáturá puedá multiplicárse, si no que es lá temperáturá optimá párá su
crecimiento. A si de está mánerá se átribuye que crecioá á temperáturá ámbiente
porque 25ºC estáá dentro de sus rángos de áceptácioá n.

En el cáso de c. equi como se indicá en el cuádro 1 presento multiplicácion en

ámbás temperáturás. Los resultádos obtenidos se deben á que dichá bácteriá tiene
lá cápácidád de multiplicárse preferentemente á 37 ºC, pero esto no indicá que solo
á esá temperáturá puedá multiplicárse, si no que es lá temperáturá optimá párá su
crecimiento, áun que el rángo de está bácteriá puede váriár de 10°C á 45 °C que
está dentro del rángo del crecimiento párá crecimiento á 25 °C.

Párá S. áureus (con temperáturá oá ptimá de crecimiento de 35 á 40 °C.)

Presentáron multiplicácioá n bácteriáná en ámbás temperáturás como se indicá en el
cuádro 1 tánto á temperáturá de 37 °C, tánto á 25 °C, está bácteriá támbieá n puede
crecer á 25 grádos yá que su rángo de crecimiento vá de 6.5 °C á 65 °C.
fecto del pH.

Se reálizo lá pruebá de multiplicácioá n bácteriáná en relácioá n ál efecto del pH con E.

coli , P. vulgáris, S. typhi y S. áureus. Se llevo á cábo en dos plácás; en ágár nutritivo
pH6 y en ágár nutritivo pH 9 en medio tcbs

Lá determinácioá n del efecto de pH, como se indicá en el cuádro 2,, cádá uná de lás
bácteriá , P. vulgáris, S. áureus se multiplicáron en ámbos pH (tánto pH6 como
pH9). El resultádo se debe á que el pH utilizádo en cádá plácá párá dichá práá cticá,
se encuentrán dentro del rángo estáblecido párá lá clásificácioá n de bácteriás
neutroá filás, es decir, se presento crecimiento en ámbás plácás con pH diferente
pero no porque estás bácteriás seán ácidoá filás o álcoloá filás necesáriámente, si no
que estáá n dentro del rángo de pH párá que estás se multipliquen, áunque su pH
oá ptimo seá de 7.

Lás bácteriás que unicámente crecieron á pH 6 en ágár nutritivo fueron .E.coli y S.

typhi y no crecieron en ph 9, el E. coli yá que puede crecer á ese ph 9 como
máximo pero puede ser que lá bácteriá no tolero el medio o un mál sembrádo del
mismo. Párá S. typhi támbien fue mál sembrádá por que es uná bácteriá que puede
tolerár hástá pH 9.5, pudo háber sido cáusádo por error humáno en sembrádo.

Se utilizo ágár tcbs que es ágár o ágár tiosulfáto citráto bilis sácárosá este ágár se
utilizo por que tiene indicádores como ázul de bromotimol y ázul de timol que ál
producir productos áá cidos virá á ámárillo y ázul ver brillánte indicá que háy
presente álcálinidád, en nuestro cáso P. vulgáris y S. áureus son fermentádores de
sácárosá y producieron esá colorácioá n ámárillá en el medio tcbs.

Requerimiento de oxíágeno.

Lá pruebá de tensioá n de oxigeno, se reálizo con lá finálidád de identificár en E. coli,

P. áeruginosá, Clostridium spp lá cápácidád que tienen de tolerár lá presenciá o
áusenciá de oxigeno, seguá n seá el cáso y como es que repercute respecto á su
multiplicácioá n bácteriáná.
Como se indicá en cuádro 3 se presento multiplicácioá n bácteriáná en ámbás plácás
(condicioá n áerobiá y condicioá n ánáerobiá) de E. coli yá que es uná bácteriá
fácultátivá yá que puede crecer en medio áerobio como ánáerobio, resultádo, lo
que les permite multiplicárse tánto en presenciá de oxigeno como en tolerár
condiciones bájás del mismo, lo qud háce que el ágár trioglicoláto se veá
crecimiento de lá bácteriá .
Respecto á P. áuroginosá es un áerobio estricto que solámente ciertás ocásiones
puede ocupár en el nitráto como podemos observár en el cuádro 3 solo hubo
crecimiento en el ágár trioglicoláto en medio áerobio en medio ánáerobio no hubo
crecimiento.
En lá siembrá de clostridium spp hubo solámente crecimiento en lá plácá de
crecimiento ánáerobio y no en lá de áerobio, eso concluye que el clostridium spp es
ánáerobio unicámente que si coincide por que es uná bácteriá que solámente
puede crecer en medio ánáerobio.

 Efecto de lá presioá n osmoá ticá.

Párá llevár á cábo está pruebá se utilizo se empleo C. equi, S. áureus, E. coli, K.
pneumoniáe se pusieron e uná plácá de ágár nutritivo y otrá plácá de este mismo
pero con 7.5% de sál, esto con lá finálidád de observár si lás bácteriás son cápáces
de tolerár ámbientes con elevádá concentrácioá n de sáles o solutos en generál sin
que este le áfectá á su crecimiento bácteriáno.
Como se obserbá en el cuádro 4 ámbás plácás lás bácteriás síì presentáron
multiplicácion bácteriáná tánto en el ágár nutritivo y el ágár sál 7.5 % párá rá lás
bácteriás E. coli, y S. áureus áun que en menor cántidád en lá plácá de ágár sál 7.5
% con un poco de crecimiento moderádo, puede átribuirse á que en estás bácteriás
sus membránás plásmáticás tienen ciertá toleránciá á concentráciones elevádá de
sál.
El crecimiento de K. pneumoniáe y C. Equi en lá plácá de ágár nutritivo si se llevo
ácábo pero en el ágár nutritivo 7.5 % sál no crecieron esto puede ser debidio á que
K. pneumoniáe solo tolerá uná átmosferá de presion y tiene pocá toleránciá á áltás
concentrácioá n de sál ál iguál que C. equi.

 Efecto de lá humedád.

Los microorgánismos no tienen lá cápácidád de retencioá n de águá, como los

orgánismos superiores, es por ello que su metábolismo y desárrollo depende de un
medio en el que existá águá. Asíá de está formá proporcionáá ndoles un medio con
humedád optimá estos tendráá n uná mejor multiplicácioá n y crecimiento bácteriáno.
Con lá finálidád de observár coá mo es que influye el fáctor de humedád en el
crecimiento bácteriáno, se utilizáron dos cepás: S. áureus y E. coli. que se
sembráron cádá uná en un tubo con medio ágár nutritivo y en tubos con ágár
nutritivo con 1.5 % con bájá humedád se sembro E. coli y S.. áureus en dicho
medios. Como se indicá en el cuádro numero 5 lás cepás S. áureus y E. coli
crecieron y se multiplicáron perfectámente en medio ágár nutritivo, debido á que
poseen los nutrientes y lá humedád optimá párá su multiplicácioá n, pero támbien
en los tubos de ágár 1.5% Posiblemente por que todávíáá contábán con lá humedád
ádecuádá que les permitiá como tál reproducirse.

Conclusiones

Los principáles requerimientos de los microorgánismos párá su multiplicácioá n

bácteriáná oá ptimá, se divide en dos principáles: los requerimientos quíámicos y los
requerimientos fíásicos.
Dentro de los requerimientos quíámicos el máá s importánte es lá tensioá n de oxigeno,
debido á que no todás lás bácteriás necesitán oxíágeno párá multiplicárse
(áerobiás), existen álgunás que pueden multiplicárse en condiciones bájás de
oxigeno o simplemente necesitán uná átmosferá libre de el mismo párá su optimá
multiplicácioá n.

El fáctor de pH es importánte pero que lá máyoriá de lás bácteriás que

determinámos tienen un ámplio rángo crecimiento tánto en medios báá sicos como
áá cidos.

Que támbieá n lás bácteriás que determinámos son mesofilás con temperáturás de
crecimiento dentro del rángo de 30 á 45 grádos centíágrádos.

Se determiná que dependiendo de cádá bácteriá vá requerir ciertás condiciones

párá que puedá sobrevivir.

Referenciás

Mádigán, T. M., Mártinko, M. J., Dunláp, V. P. & Clárk Brock. Biologíáá de los
microorgánismos. (2009). Espánñ á: Peárson Educácioá n, S. A.

Prescott, L. M., Hárley, J. P. y Klein. Microbiologíáá. (1999). Espánñ á: Mc Gráw-

HillInterámericáná.

Tortorá, J.G., Funke, R.B. y Cáse. Introduccioá n á lá microbiologíáá. (2007). Sán

Fráncisco: Peárson Educátion Inc.