Sei sulla pagina 1di 2

INTRODUCCION proteínas, lo que refleja las

diferencias básicas en la estructura


La obtención de ácido
de estos dos tipos de
desoxirribonucleico (ADN), es el
macromoléculas, el método de
punto de partida para la mayoría de
extracción de ADN más utilizado es
análisis genéticos; incluso contando
digestión proteica, seguida de una
con pequeñas cantidades de ADN,
extracción orgánica de ADN
es posible amplificar genes
mediante fenol cloroformo-alcohol
específicos in vitro a través de la
isoamílico; la técnica requiere de la
reacción en cadena de la polimerasa
adicción de reactivos como
(PCR por sus siglas en Inglés :
Proteinasa K para lisar las células y
Polymerase Chain Reaction) (1).
remover las proteínas que protegen
Esta revolucionaria técnica le valió a
el ADN como las histonas cuya
su inventor, Kary B. Mullis, el premio
función es empacar el ADN para que
Nobel de química en 1993; el ADN
adquiera la forma de cromosoma (3)
es el código genético universal
(Del Valle, 2002); donde el fenol se
presenta una estructura general de
mezcla con el sobrenadante
doble -elice en donde se encuentran
resultante de la lisis (fase acuosa) y
las bases nitrogenadas las cuales
desnaturaliza las proteínas de la
brindan características genéticas a
muestra, que pasan a la fase fenólica
cada individuo, estas fases se unen
mientras que los ácidos nucleicos
a través de enlaces químicos
permanecen solubles en la fase
generando tripletes formando cerca
acuosa, el cloroformo disuelve los
de 89 aminoácidos esenciales para
lípidos, mejora la eficiencia de las
la vida. Dichos tripletes se -hayan
extracciones debido a su capacidad
dispuestos de una manera lineal y
para desnaturalizar proteínas y para
continua, de manera que en ellos no
eliminar posibles restos de fenol en
exista algún espacio para alguna
la fase acuosa, la diferente densidad
otra estructura diferente a la que
de las fases acuosa y orgánica (fenol
conforma este ácido nucleico. (2).
y cloroformo) permite su separación
La extracción del DNA geonómico por centrifugación de una manera
sigue ciertas pautas para su correcta fácil y rápida (4).(Fernández, 2000)
purificación que son muy diferentes ; además las técnicas moleculares
a los empleados en la purificación de requieren de protocolos que
permitan determinar los niveles de de ADN con la que se comparan
variación genética dentro de las muestras de ADN de concentración
poblaciones, en diferentes desconocida. El cálculo de las
condiciones ambientales y la concentraciones se hace bajo la luz
caracterización de los recursos ultravioleta según la fluorescencia.
fitogenéticos. Es esencial contar con Debe evitarse la exposición
métodos adecuados de aislamiento y prolongada a la luz ultravioleta,
purificación del ADN que permita la incluso con máscara de protección.
aplicación de diversas técnicas de La estimación de las
biología molecular, así como de concentraciones de ADN puede
eficientes protocolos para la realizarse sobre una fotografía digital
amplificación del ADN mediante del gel tomada bajo luz ultravioleta si
marcadores (5) Sanchez,Coello se cuenta con un analizador de
,et,al. Para la cuantificación del ADN imágenes (6). (Posso y Ghneimop
utiliza una secuencia de cit.).
concentraciones de solución patrón

BIBLIOGRAFIA
1. Saiki RK, Gelfand DH, Stoffel S, Scharf SJ, Higuchi R, Horn GT, Mullis KB, Erlich HA. Primer-
directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA polymerase. Science.
1988;239(4839):487-91.
2. Castellanos ,Solano Extracción de ADN, Facultad de Ciencias y
educación Universidad Distrital Francisco José de Caldas.
3. DEL VALLE, C. 2002. Comparación de Tres Métodos de Extracción de
ADN Tesis Bach en Ingeniería en Biotecnología, San José de Costa Rica.
Instituto Tecnológico de Costa Rica. 91p.

4. FERNÁNDEZ, E. 2000. Polimorfismos de ADN mitocondrial en


poblaciones antiguas de la cuenca mediterránea. Tesis Doctorado en
Biología, Barcelona, España. Universidad de Barcelona. 144p.
5. Sanchez-Coello, N.; Luna-Rodriguez, M.; Vazquez-Torres, M.; Rafael
Sanchez-Velasquez, L.; Santana-Buzzy, N.; Octavio-Aguilar, P. y
Georgina Iglesias-Andreu, L. ‘‘Optimization of a protocol for dna isolation
and issrpcr amplification system for ceratozamia mexicana brongn
(Zamiaceae)’’. Revista Chapingo Serie Ciencias Forestales y del
Ambiente, vol. 18, no. 1, 2012, pp. 127–137, ISSN 2007-3828.

Potrebbero piacerti anche