Review Article
An Overview of theLaboratory Diagnostic Procedures of Visceral Leishmaniasis (Kala-Azar)
Fakhar, M. (PhD)
Assistant Professor of Parasitology,
Department of Parasitology and
Mycology, Molecular and Cellular
Downloaded from goums.ac.ir at 6:38 +0330 on Sunday March 17th 2019
Biology Research Center, Mazandaran
University of Medical Sciences, Sari,
Iran
Ahmad Pour, E. (MSc)
PhD Student of Parasitology, Department
of Parasitology and Mycology,
Mazandaran University of Medical
Sciences, Sari, Iran
Corresponding Author:Fakhar M
Email:Mahdif53@yahoo.com
Received: 15 Aug 2012
Revised: 19 Nov 2012
Accepted: 26 Nov 2012
This paper should be cited as: Fakhar M, Ahmad Pour E. [An Overview of the Laboratory
)Diagnostic Procedures of Visceral Leishmaniasis (Kala-Azar
Abstract
Visceral leishmaniasis (Kala-azar) is a systemic infection disease that
can be diagnosed by some invasive procedures such as splenic, liver
biopsy or bone marrow aspiration, whichare determined as the gold
standards for diagnosing of this disease. At present, a variety of
noninvasive tests having different specificities and sensitivities are
available for the diagnosis of visceral leishmaniasis. Direct
agglutination test (DAT) can be an appropriate and applicable method
provided that proper antigens are prepared. The rapid rK39 strip test
(for detection of antigen) can be used for diagnosis of visceral
leishmaniasis (VL), which is suitable for acute forms of disease in the
field. Other tests, such as rapid KATEX strip test (for detection of
antigen) and polymerase chain reaction (PCR), which are recently
recommended for diagnosis and prognosis of visceral leishmaniasis,
are the simple, inexpensive and easily available under field
conditions.This review article focuses on different, novel and current
procedures for the diagnosis of visceral leishmaniasis.
Key words: Laboratory diagnosis,visceralleishmaniasis, Kala-
azar,rk39, Katex, PCR
 ‫هزٍری‬ ‫هجلِ علَم آسهبیشگبّی‪ ،‬دٍرُ ّفتن(شوبرُ ‪ )1‬بْبر ‪92‬‬

‫دارای رت ِ علوی – پضٍّشی‬

‫علَم پششکی‬ ‫اس کویسیَى ًشزیب‬
‫کشَر‬

‫هزٍری بز رٍش ّبی تشخیص آسهبیشگبّی لیشوبًیَس احشبیی (کبالآسار)‬

‫هْذی فخبر‬
‫‪Downloaded from goums.ac.ir at 6:38 +0330 on Sunday March 17th 2019‬‬

‫اػتبديبس اًگل ؿٌبػی‪ ،‬گشٍُ اًگل ؿٌبػی ٍ قبسذ‬

‫چکیذُ‬ ‫ؿٌبػی ٍ هشکض تحقیقبت ثیَلَطی ػلَلی ٍ هلکَلی‪،‬‬

‫داًـگبُ فلَم پضؿکی هبصًذساى‪،‬ػبسی‪،‬ايشاى‬
‫لیـوبًیَص احـبيی کبالآصاس ًَفی ثیوبسی ففًَی ػیؼتویک اػت کِ سٍؽ ّبی تْبخوی ثیَپؼی عحبل‪،‬‬
‫کجذ ٍيب آػپیشاػیَى هغض اػتخَاى ثقٌَاى سٍؽ اػتبًذاسد عاليی ثشای تـخیق آى تقییي ؿذُ اًذ‪ .‬دس حبل حبضش‬
‫احسبى احوذپَر‬
‫سٍؿْبی تـخیلی غیش تْبخوی هختلفی ثب ٍيظگی ٍ حؼبػیت ّبی هتفبٍت ثشای تـخیق کبالآصاس ٍخَد‬ ‫داًـدَی دکتشی تخللی اًگل ؿٌبػی‪ ،‬گشٍُ اًگل ؿٌبػی‬

‫داسد‪ .‬دسايي هیبى سٍؽ ػشٍلَطی آگلَتیٌبػیَى هؼتقین )‪ (DAT‬ثِ ؿشط تْیِ آًتی طى هغلَة‪ ،‬سٍؽ هٌبػجی‬ ‫ٍ قبسذ ؿٌبػی‪ ،‬داًـگبُ فلَم پضؿکی هبصًذساى‪،‬ػبسی‪،‬ايشاى‬

‫ثِ هٌؾَس‬ ‫ثَدُ ٍ ثِ آػبًی ٍ دس ؿشايظ فیلذ اًدبم پزيش هی ثبؿذ‪ّ .‬وچٌیي تؼت ًَاسی ٍ ػشيـ ‪rK39‬‬
‫ؿٌبػبيی آًتی ثبدی کِ ثشای تـخیق اؿکبل حبد ثیوبسی کبالآصاس کبسثشد داسد‪ ،‬دس ؿشايظ هیذاًی قبثل اًدبم‬ ‫ًَیسٌذُ هسئَل‪ :‬هْذی فخبر‬

‫اػت‪ .‬اص سٍؿْبی ديگشی کِ ا یشاَ ثشای تـخیق ٍ ثشآٍسد پیؾ آگْی ثیوبسی لیـوبًیَص احـبيی عشاحی ؿذُ‬ ‫تلفي‪09122522782:‬‬
‫اًذ هی تَاى ثِ تؼت ًَاسی ‪ (KATEX‬ثِ هٌؾَس ؿٌبػبيی آًتی طى ٍ سٍؽ ّبی هلکَلی ػبدُ‪ ،‬اسصاى ٍ قبثل‬
‫پست الکتزًٍیک‪mahdif53@yahoo.com:‬‬
‫دػتشع دس فیلذ اؿبسُ ًوَد‪ .‬دس ايي هقبلِ هشٍسی ثِ اًَاؿ سٍؽ ّبی تـخیلی سايح ٍ ًَيي لیـوبًیَص احـبيی‬
‫اؿبسُ ؿذُ اػت‪.‬‬ ‫آدرط‪:‬ػااابسی‪ ،‬کیلاااَهتش ‪ 18‬خااابدُ اااضس‬
‫آثااابد‪،‬هدتوـ داًـاااگبّی پیااابهجش افؾااان ف‬
‫ٍاصُ ّبی کلیذی‪ :‬تـخیق آصهبيـگبّی ‪،‬لیـوبًیَص احـبيی‪ ،‬کبالآصاس ‪PCR ، KATEX ،rk39 ،‬‬
‫‪،‬داًـااکذُ پضؿااکی‪ ،‬كااٌذٍ پؼااتی‪-1665:‬‬
‫‪48175‬‬

‫ٍصَل هقبلِ‪91/5/25:‬‬
‫اصالح ًْبیی‪91/8/29:‬‬
‫پذیزش هقبلِ‪91/9/6:‬‬

‫آدرط هقبلِ‪:‬‬
‫فخبس م‪ ،‬احوذپَس ا" هشٍسی ثش سٍؽ ّبی تـخیق آصهبيـگبّی لیـوبًیَص احـبيی کبالآصاس "‪.‬هدلِ فلَم آصهبيـگبّی ثْبس‬
‫‪،1392‬دٍسُ ّفتن ؿوبسُ ‪45-54: 1‬‬

‫ؿبهل سٍؽ ّبی پبساصيتَلَطی‪ ،‬ايوًََلَطی‪ ،‬ػشٍلَطی‪،‬‬
‫هلکَلی‪ ،‬ثیَؿیویبيی ٍ ػبيش سٍؽ ّب هی ثبؿٌذ‪.‬‬
‫رٍش ّبی پبراسیتَلَصی‪:‬‬
‫الف‪ -‬سٍؽ تْیِ گؼتشؽ هؼتقین ‪ : Direct Smear‬دس ايي‬
‫سٍؽ اص ًوًَِ ّبی آػپیشاػیَى هغض اػتخَاى‪ ،‬عحبل ٍ کجذ‬
‫‪Downloaded from goums.ac.ir at 6:38 +0330 on Sunday March 17th 2019‬‬
‫گؼتشؽ ّبی توبػی يب ‪ (Impression smear‬تْیِ هی ؿَد‬
‫ٍ پغ اص تثجیت ثب هتبًَل تَػظ سًگ ّبی گیوؼب ٍ سايت‪،‬‬
‫سًگ آهیضی هی گشدد‪ .‬حؼبػیت سٍؽ تْیِ اػویش اص هغض‬
‫اػتخَاى ‪ 60‬تب ‪ ٍ %85‬عحبل ثیؾ اص ‪ % 95‬هی ثبؿذ ‪-10‬‬
‫‪ . 12‬الجتِ ثب ٍخَد حؼبػیت ثبالی آػپیشاػیَى عحبل‪ ،‬ثِ‬
‫فلت اػپلٌَهگبلی ًبؿی اص ثیوبسی ٍ دس ًتیدِ احتوبل پبسگی‬
‫عحبل ٍ ايدبد ًَشيضی ؿذيذ‪ ،‬دس حبل حبضش اص ايي سٍؽ‬
‫اػاتفبدُ ًاوی ؿاَد‪ً .‬اواًَاِ ّبی ثیَپؼی کجذ ٍ عحبل سا‬
‫هی تَاى ثب سًگ ّبی سٍتیي ثبفت ؿٌبػی هبًٌذ‬
‫ّوبتَکؼیلیي ‪ -‬ائَصيي سًگ آهیضی ًوَد‪ .‬دس سٍؽ هؼتقین‪،‬‬
‫آهبػتیگَت ّبی اًگل لیـوبًیب سا هی تَاى دس دا ل‬
‫هبکشٍفبطّب يب بسج اص آًْب هـبّذُ ًوَد کِ داسای يک‬
‫ّؼتِ ٍ يک کیٌتَپالػت هـخق هی ثبؿٌذ‪.‬‬
‫ة ‪ -‬سٍؽ کـت ‪ : Culture Method‬ثشای کـت اًگل‬
‫لیـوبًیب‪ ،‬هقذاسی اص ًوًَِ حبكل اص آػپیشاػیَى سا کِ قجال"‬
‫دس گاؼتاشؽ هاؼتقاین تَضیح دادُ ؿذ‪ ،‬هی تَاى ٍاسد‬
‫هحیظ ّبی کـت ًوَد‪ .‬هحیظ ّبی کـت هَسد اػتفبدُ‬
‫‪، M199، Schneider's، Evans، RPMI1640‬‬ ‫هقوَل ؿبهل‬
‫‪ ٍ Grace's، N.N.N‬غیشُ هی ثبؿٌذ‪ .‬دهبی هٌبػت خْت‬
‫ًگْذاسی اًگل لیـوبًیب دس هحیظ کـت‪ 22 ،‬تب ‪ 24‬دسخِ‬
‫ػبًتیگشاد هی ثبؿذ‪ .‬ثقضی اص هحیظ ّبی کـت فَ الزکش‬
‫اص خولِ ‪ Grace's ٍ M199, RPMI, Schneider’s‬تک‬
‫فبصی ثَدُ ٍ ثیـتش ثِ هٌؾَس کـت اًجَُ اًگل اص آًْب اػتفبدُ‬
‫هی ؿَد ٍ ثش ی ديگش هبًٌذ ‪ Evans ٍ NNN‬خضٍ هحیظ‬
‫ّبی کـت دٍ فبصی ثَدُ ٍ ثشای خذاػبصی اٍلیِ ٍ حول‬
‫اًگل اص ًقغِ ای ثِ ًقغِ ديگش هَسد اػتفبدُ قشاس هی گیشد‬
‫‪ّ . 10‬وچٌیي ‪ّ ٍ Allahverdiyev‬وکبساًؾ سٍؽ کـت‬
‫هایاکاشٍکاابلاچاش سا دسکاـَس تاشکیِ ثب اػتفبدُ اص لَلِ ّبی‬
‫هزٍری بز رٍش ّبی تشخیص‪. . .‬‬ ‫‪/46‬‬
‫هقذهِ‬
‫لیـوبًیَص يکی اص ثیوبسی ّبی ففًَی هْن اًگلی اػت‬
‫کِ تَػظ تک يب تِ خٌغ لیـوبًیب ايدبد هی ؿَد ٍ ثِ ػِ‬
‫ؿکل فوذُ خلذی‪ ،‬خلذی‪ -‬هخبعی ٍ احـبيی دس اًؼبى‬
‫ديذُ هی ؿَد‪ًَ .‬ؿ احـبيی ثیوبسی يب کبالآصاس دس ثیـتش‬
‫هٌبعق ايشاى ثِ كَست تک گیش ٍ دس هٌبعق هـکیي ؿْش‪،‬‬
‫دؿت هغبى‪ ،‬کلیجش‪ ،‬ثشاصخبى‪َ ،‬سهَج‪ ،‬فیشٍصآثبد‪ ،‬خْشم‪،‬‬
‫ًَس آثبد‪ ،‬داساة ٍ قن ثِ كَست ثَهی ديذُ هی ؿَد ‪. 6-1‬‬
‫فبهل اكلی ثیوبسی کبالآصاس دس هٌغقِ ٍػیـ حَصُ هذيتشاًِ‬
‫(‪Leishmania infantum‬‬ ‫اص خولِ ايشاى‪ ،‬لیـوبًیب ايٌفبًتَم‬
‫هی ثبؿذ‪ .‬کبالآصاس دس ايشاى اغلت دس کَدکبى صيش ‪ 12‬ػبل‬
‫ٍ ثیـتش دس فـبيش ٍ سٍػتبيیبى گضاسؽ هی ؿَد ‪. 7ٍ2ٍ1‬‬
‫لیـوبًیَص احـبيی هوکي اػت اص ففًَت فبقذ فالهت تب‬
‫ثیوبسی ثب ثشٍص فالين هتغیش ثبؿذ ثِ عَسی کِ دس ثش ی اص‬
‫هٌبعق ففًَت ثذٍى فالين ثؼیبس ؿبيـ تش اص ثیوبسی ثبلیٌی‬
‫اػت‪ .‬فالين اكلی ثیوبسی ؿبهل تت‪ ،‬اػپلٌَهگبلی ٍ کن‬
‫ًَی ثَدُ ٍ يبفتِ ّبی آصهبيـگبّی غیش عجیقی هبًٌذ پبى‬
‫ػبيتَپٌی‪ّ ،‬یپشگبهبگلَثیٌوی ٍ ّیپَآلجَهیٌوی ًیض هوکي‬
‫اػت دس ثیوبساى هـبّذُ ؿَد ‪ . 7ٍ1‬هخبصى ايي ثیوبسی دس‬
‫ايشاى ؿبهل ػگ ٍ ػگ ػبًبى سٍثبُ ‪ ،‬ؿغبل ٍ گشگ ثَدُ‬
‫ٍ ًبقلیي آى گًَِ ّبی هختلف پـِ بکی خٌغ فلجَتَهَع‬
‫هی ثبؿذ کِ گًَِ غبلت ًبقل دس ايشاى فلجَتَهَع هبطٍس‬
‫اػت ‪ . 7ٍ6ٍ2‬دس كَست فذم تـخیق ٍ دسهبى ثِ هَقـ‬
‫ثیوبسی دس اًؼبى‪ ،‬هوکي اػت تب ‪ %98‬ثبفث هشگ ٍ هیش‬
‫ثیوبساى ثَيظُ دس کَدکبى گشدد‪ .‬ثٌبثشايي تـخیق دقیق ٍ ثِ‬
‫هَقـ ثیوبسی ٍ دس ًْبيت دسهبى ثیوبساى اص اّویت ٍيظُ ای‬
‫ثش َسداس اػت ‪ّ . 6ٍ5،2‬وچٌیي ثب تَخِ ثِ ؿیَؿ ثیوبسی‬
‫ايذص دس خَاهـ ثـشی ٍ اص خولِ ايشاى ٍ گضاسؽ ّبی هتقذد‬
‫ففًَت تَام ايذص ٍ لیـوبًیَص احـبيی اص دًیب ثِ لَف‬
‫خٌَة اسٍپب‪ ،‬ثِ ًؾش هی سػذ اػتفبدُ اص سٍؽ ّبی تـخیق‬
‫ػشيـ‪ ،‬آػبى ٍ غیش تْبخوی اص خبيگبُ بكی ثش َسداس‬
‫ثَدُ ٍآؿٌبيی ثب آًْب اهشی ضشٍسی اػت ‪. 10-8‬‬
‫اًَاؿ سٍؽ ّبی تـخیلی ٍ تقییي َّيت فَاهل ايدبد‬
‫کاٌٌذُ ثایاوبسی کابالآصاس دس اياي هقبلِ هشٍس ؿذُ اػت کِ‬
‫هجلِ علَم آسهبیشگبّی‪،‬دٍرُ ّفتن(شوبرُ‪ )1‬بْبر ‪92‬‬
 ‫فخبر ٍ احوذپَر‪47/‬‬
‫دالتَى ٍ ‪ 123‬کیلَ دالتَى سا دس ادساس ثیوبساى کبالآصاسی‬
‫گضاسؽ ًوَدُ اػت کِ حؼبػیت ٍ ٍيظگی ثخؾ ‪72-75‬‬
‫کیلَ دالتًَی ثِ تشتیت ‪ %100 ٍ % 96‬ثَد‪ .‬اص عشف ديگش ثب‬
‫تَخِ ثِ ايٌکِ ايي آًتی طى ّب‪ ،‬دس هذت ػِ ّفتِ پغ اص‬
‫دسهبى ثیوبس‪ ،‬اص ادساس حزف هی ؿًَذ‪ ،‬لزا آصهَى ثؼیبس‬
‫هٌبػجی ثشای اسصيبثی سًٍذ دسهبى دس ثیوبساى هی ثبؿذ ‪. 14‬‬
‫‪Downloaded from goums.ac.ir at 6:38 +0330 on Sunday March 17th 2019‬‬
‫يک آصهَى ثش هجٌبی آگلَتیٌبػیَى التکغ ثشای ؿٌبػبيی‬
‫آًتی طى لیـوبًیبيی دس ادساس ثیوبساى کبالآصاسی ثب حؼبػیت‬
‫ثیي ‪ 68‬تب ‪ٍ ٍ % 100‬يظگی ‪ % 100‬هقشفی ؿذُ اػت‪ .‬دس ايي‬
‫سٍؽ آًتی طى ‪ 5 -15‬کیلَ دالتًَی هَخَد دس ادساس ثیوبساى‬
‫کبالآصاسی ثب اػتفبدُ اص سٍؽ ‪ ٍ Capture-ELISA‬کبسثشد‬
‫آًتی ثبدی هًََکلًَبل فلیِ ايي آًتی طى‪ ،‬سديبثی هی گشدد‬
‫‪. 15‬‬
‫ة‪ -‬ؿٌبػبيی آًتی ثبدی (‪ :)Antibody detection‬سٍؽ‬
‫ّبی غیش ا تلبكی تـخیق کبالآصاس ثش اػبع ؿٌبػبيی‬
‫آًتی ثبدی هَخَد دس ػشم‪ ،‬چٌذيي دِّ هَسد اػتفبدُ قشاس‬
‫گشفتِ کِ ‪ Napier's formol gel‬يا ‪ٍ Aldehyde test‬‬
‫‪ً Chopra antimony‬وًَِ ّبيی اص ايي سٍؽ ّب هی ثبؿذ‪.‬‬
‫پبيیي ثَدى ٍيظگی ٍ حؼبػیت ايي آصهبيؾ ّب آًْب سا تب حذ‬
‫صيبدی غیش قبثل افتوبد هی کٌذ‪ ،‬الجتِ چٌذيي سٍؽ ؿٌبػبيی‬
‫آًتی ثبدی ثب ٍيظگی ٍ حؼبػیت ثبال ًیض ٍخَد داسد ‪. 16‬‬
‫دس فشد ثیوبس ثب فقبل ؿذى لٌفَػیت ّبی ‪ ،B‬ػغَح ثباليی اص‬
‫آًتی ثبدی ّبی‪ IgM ٍ IgG‬فلیِ ّبپتي ٍ پشٍتئیي ّبی‬
‫غیشا تلبكی هختلف تَلیذ هی گشدد کِ ٍخَد ػغَح‬
‫ثبالی آًتی ثبدی فلیِ آًتی طى ّبی اًگل‪ ،‬تـخیق کبالآصاس‬
‫سا آػبى هی کٌذ‪ .‬سٍؽ ّبی ػشٍلَطيکی هتٌَفی ثشای‬
‫تـخیق آًتی ثبدی ّبی ػشهی ٍخَد داسد کِ ثش اػبع‬
‫ا تلبكی ثَدى ٍاکٌؾ آًتی ثبدی فلیِ آًتی طى ٍ يب‬
‫اپیتَح عشاحی ؿذُ اًذ‪ .‬حؼبػیت ايي آصهبيؾ ّب ثِ سٍؽ‬
‫آصهبيؾ ٍ ٍيظگی آى فقظ ثِ آًتی طى ثؼتگی داسد‪ ،‬اص ايي‬
‫سٍؽ ّبی تـخیلی هی تَاى ثِ‪ :‬طل ديفیَطى‪ ،‬ثجَت‬
‫هکول‪ّ ،‬وبگلَتیٌبػیَى غیش هؼتقین (‪ ،)IHA‬ايوٌَفلَسػٌت‬
‫آًتی ثبدی (‪ ٍ )IFA‬کبًتشکبسًت ايوًََالکتشٍفَسص (‪)CCIE‬‬
‫اؿبسُ ًوَد کِ ثِ خض آصهبيؾ ‪ IFA‬ثقیِ آصهبيؾ ّب ثِ‬
‫‪ De Colmenares‬دٍ ثخؾ پلی پپتیذی ؿبهل ‪ 72-75‬کیلَ‬
‫هجلِ علَم آسهبیشگبّی‪،‬دٍرُ ّفتن(شوبرُ‪ )1‬بْبر ‪92‬‬
‫هیکشٍّوبتَکشيت حبٍی هحیظ کـت‪ ،‬دس ًوًَِ ّبی ا ز‬
‫ؿذُ اص هغض اػتخَاى ٍ َى هحیغی‪ ،‬هَسد ثشسػی قشاس دادُ‬
‫ٍ حؼبػیت ايي سٍؽ سا ‪ %100 -77/8‬گضاسؽ ًوَدًذ‬
‫‪. 13‬‬
‫ج ‪ -‬سٍؽ تلقیح ثِ حیَاى حؼبع آصهبيـگبّی‪ :‬ايي سٍؽ‬
‫ثِ عَس هقوَل ثِ فٌَاى يک سٍؽ تـخیلی ًجَدُ ٍ ثیـتش‬
‫دس کبسّبی تحقیقبتی اص آى ثْشُ هی ثشًذ‪ ،‬صيشا سؿذ ٍ تکثیش‬
‫اًگل دس ثذى حیَاى هوکي اػت چٌذيي ّفتِ يب هبُ عَل‬
‫ثکـذ‪ ،‬اهب ثِ ّشحبل اص حیَاًبتی ًؾیش ّبهؼتش‪ ،‬هَؽ ٍ‬
‫َکچِ ٌّذی ثشای ايي هٌؾَس هی تَاى اػتفبدُ ًوَد‪.‬‬
‫ّبهؼتش عاليی ثْتشيي حیَاى آصهبيـگبّی ثشای حفؼ ٍ‬
‫ًگْذاسی اًگل ّبی کوپلکغ لیـوبًیب دًٍَاًی‬
‫(‪ )L.infantum, L.donovani, L.chagasi‬هی ثبؿذ‪ .‬ثشای‬
‫اًدبم ايي سٍؽ ًوًَِ ّبی هـکَک آلَدُ ثِ اًگل هبًٌذ‬
‫هغض اػتخَاى ثیوبس ٍ يب ًوًَِ ّبی آػپیشاػیَى اص کجذ تحت‬
‫ؿشايظ اػتشيل ٍ اص عشيق دا ل كفبقی يب دا ل قلجی ثِ‬
‫حیَاى حؼبع تضسيق هی گشدًذ‪ .‬الصم ثِ رکش اػت کِ ّشدٍ‬
‫فشم آهبػتیگَت ٍ پشٍهبػتیگَت اًگل ثشای حیَاى حؼبع‬
‫آصهابيـگبّی‪ ،‬آلَدُ کٌٌذُ هی ثبؿذ‪ ،‬ثِ ّویي ػجت اص‬
‫هحیظ ّبی کـت حبٍی اًگل پشٍهبػتیگَت ًیض هی تَاى‬
‫ثِ حیَاى حؼبع تضسيق کشدُ ٍ ففًَت صائی ثیوبسيضايی‬
‫اًگل سا هَسد ثشسػی قشاس داد‪ .‬دس ايي سٍؽ ثِ عَس هقوَل‬
‫يک هبُ پغ اص تلقیح‪ ،‬فالين ثیوبسی اص خولِ ضقف‪،‬‬
‫الغشی‪ ،‬گَؿِ گیشی ٍ طٍلیذُ ؿذى هَّبی حیَاى ؽبّش هی‬
‫گشدد کِ پغ اص آى هی تَاى حیَاى آلَدُ سا ثب سٍؽ‬
‫ا القی کـتِ ٍ اص اًذام ّبی هختلف‪ ،‬اًگل سا خذاػبصی‬
‫ًوَد ‪. 12،10‬‬
‫رٍشّبیتشخیصایوًََلَصی ‪)Immunodiagnosis(:‬‬
‫الف‪ -‬ؿٌبػبيی آًتای طى(‪ : )Antigen detection‬اياي سٍؽ‬
‫اص سٍؽ ّبی ؿٌبػبيی آًتی ثابدی ا تلبكای تاش ثاَدُ ٍ اص‬
‫داليل ثشتشی آى هی تَاى ثِ فاذم ٍخاَد ٍاکاٌؾ هتقابعـ‪،‬‬
‫پیگیشی ثیوبساى پغ اص دسهبى ٍ اػاتفبدُ اص آى دس تـاخیق‬
‫ثیوبسی دس افشاد ثب ًقق ايوٌی هبًٌذ ثیوبساى اياذص کاِ دچابس‬
‫ًقق دس تَلیذ آًتی ثبدی ّؼتٌذ‪ ،‬اؿبسُ ًوَد‪.‬‬

‫ّوکبساى‪ ،‬اػتفبدُ اص اتلبل هبًَص‪-‬فَکَص کِ يک‬
‫گلیکَپشٍتئیي ‪ 36 KDa‬ثیبى ؿذُ دس ػشاػش چش ِ صًذگی‬
‫لیـوبًیب آهبػتیگَت ٍ پشٍهبػتیگَت اػت ثِ فٌَاى آًتی‬
‫طى دس آصهبيؾ االيضا‪ ،‬حؼبػیت آصهبيؾ سا ثِ ‪ٍ % 100‬‬
‫ٍيظگی آى سا ثِ ‪ %96‬هی سػبًذ ‪ّ . 26‬وچٌیي دس هغبلقِ ای‬
‫ديگش گضاسؽ ؿذُ اػت کِ حؼبػیت ٍ ٍيظگی آصهبيؾ‬
‫‪Downloaded from goums.ac.ir at 6:38 +0330 on Sunday March 17th 2019‬‬
‫االيضا ثب اػتفبدُ اص آًتی طى ّبی هحلَل ثذػت آهذُ اص‬
‫پشٍهبػتیگَت ّبی کـت دادُ ؿذُ دس هحیظ فبقذ پشٍتئیي‬
‫افضايؾ هی يبثذ ‪ . 20‬دس هغبلقِ هیکبئیلی ٍ ّوکبساى دس‬
‫ايشاى حؼبػیت ٍ ٍيظگی آصهبيؾ االيضا ثب اػتفبدُ اص آًتی‬
‫طى ّبی هحلَل ثِ تشتیت ‪ % 90/5 ٍ 83/6‬ثذػت آهذ ‪. 20‬‬
‫آًتی طى ًَتشکیت ‪ rK39‬کِ دس طى ًبحیِ ‪ Kinesin‬اًگل‬
‫هحفَػ اػت‪ ،‬ثشای آًتی ثبدی ّبی ثیوبساى هجتال ثِ‬
‫کبالآصاس ثب فَاهل‪ L. donovani complex‬ا تلبكی ٍ‬
‫ثؼیبس حؼبع ثَدُ ٍ ًـبى دٌّذُ ؿشٍؿ ثیوبسی حبد هی ثبؿذ‬
‫‪ٍ . 27،28‬يظگی ٍ حؼبػیت ايي آًتی طى دس تـخیق‬
‫کبالآصاس ٍ ‪ PKDL‬دس آصهبيؾ االيضا ‪%100‬اػت ‪. 27‬‬
‫هیضاى آًتی ثبدی فلیِ ‪ rK39‬ثِ عَس هؼتقین ثب فقبلیت‬
‫ثیوبسی دس استجبط اػت ٍ ثشای پیگیشی ثیوبساى پغ اص‬
‫دسهبى هٌبػت اػت ثِ عَسی کِ ثب دسهبى هَفق‪ ،‬هیضاى آى ثِ‬
‫ػشفت پبئیي آهذُ ٍ ثب ثبصگـت ثیوبسی ايي هیضاى ثِ ػشفت‬
‫دٍثبسُ افضايؾ هی يبثذ ‪ . 29،30‬ثِ بعش هَققیت ّبی‬
‫بف خغشافیبيی کِ دس هٌبعق ثَهی ٍخَد داسد ٍ فذم‬
‫اهکبى دػتشػی ٍ اػتفبدُ گؼتشدُ اص سٍؽ ّبی پیچیذُ‬
‫تـخیق‪ً ،‬یبصهٌذ ثکبسگیشی سٍؽ تـخیلی هٌبػت‪ ،‬ػشيـ‬
‫ٍ ػبدُ ثب حؼبػیت ٍ ٍيظگی ثبال هی ثبؿذ‪ .‬لزا آصهبيؾ‬
‫ايوًََکشٍهبتَگشافی ثش اػبع آًتی طى ‪ rK39‬دس‬
‫هَققیتّبی هـکل هیذاًی اػتفبدُ هی ؿَد‪ ،‬ثِ ايي كَست‬
‫کِ آًتی طى ًَتشکیت ثش سٍی ًَاس کبغزی ًیتشٍػلَلضی‬
‫هؼتغیل ؿکلی ثِ كَست ثبًذی اص قجل پَؿبًذُ هی ؿَد ٍ‬
‫آًتی پشٍتئیي ‪ً A‬یض دس ثبالی ثبًذ آًتیطًی سٍی کبغز اضبفِ‬
‫هیؿَد‪ ،‬ػپغ اص ًَک اًگـت ثیوبس ثِ اًذاصُ ًیوی اص يک‬
‫قغشُ َى‪ ،‬ػشم يب پالػوب دس ًَک ًَاس قشاس دادُ هی ؿَد‬
‫پغ اص آى ًَک ًَاس سا دس ‪ 4-5‬قغشُ ‪ PBS‬غَعِ ٍس کشدُ‬
‫‪1-Recombinant kinesin 39‬‬
‫‪2-Post Kala azar Dermal Leishmaniasis‬‬
‫‪3- Delayed-Type Hypersensitivity‬‬
‫هزٍری بز رٍش ّبی تشخیص‪. . .‬‬ ‫‪/48‬‬
‫ًاذست ثاشای تاـخیق سٍصهاشُ ثیوبسی کبالآصاس اػتفبدُ‬
‫هی ؿًَذ ‪ . 16-20‬دس ػبل ‪ 1988‬آصهبيؾ آگلَتیٌبػیَى‬
‫هؼتقین ‪ DAT‬اكالح ؿذُ ای ثشای تـخیق کبالآصاس دس‬
‫چٌذيي کـَس ثَهی هَسد اػتفبدُ قشاس گشفت‪ .‬خْت اًدبم‬
‫ايي آصهبيؾ پشٍهبػتیگَت ّبی اًگل ثب تشيپؼیي هخلَط ٍ‬
‫ػپغ دس فشهبلیي تثجیت ؿذُ ٍ ثب سًگ آثی کَهبػی سًگ‬
‫آهیضی ٍ دس پبيبى ػشم ثیوبس دس هدبٍست آًتی طى قشاس‬
‫گشفتِ ٍ سٍص ثقذ‪ ،‬دس كَست ٍخَد ثیوبسی آگلَتیٌبػیَى‬
‫هـبّذُ هی گشدد‪ .‬ثش اػبع هغبلقبت گؼتشدُ دس کـَسّبی‬
‫هختلف آصهبيؾ ‪ DAT‬داسای حؼبػیت ‪ٍ % 91-100‬‬
‫ٍيظگی ‪ %72-100‬هی ثبؿذ ‪ . 25-21‬دس هغبلقِ هتبآًبلیض‬
‫پغ اص ثشسػی ‪ 30‬هغبلقِ اًدبم ؿذُ ثب اػتفبدُ اص سٍؽ‬
‫‪ DAT‬حؼبػیت ٍ ٍيظگی ايي سٍؽ ثِ تشتیت ‪85/9 ٍ 94/8‬‬
‫‪ %‬ثاشآٍسد گاشديذُ اػت ‪ . 22‬اص هاقبيت اياي آصهاابياؾ‬
‫هی تَاى ثِ ؿکٌٌذگی آًتی طى‪ً ،‬یبص ثِ صًدیشُ ػشهب ثشای‬
‫‪Batch-to-‬‬ ‫حول آًتی طى ٍ گًَبگًَی دػتِ ّبی آًتی طًی‬
‫‪ batch variations‬اؿبسُ ًوَد ‪. 22‬‬
‫سٍؽ االيضا ثِ فٌَاى يک آصهبيؾ ػشٍلَطيک تقشيجبَ ثشای‬
‫تـخیق ّوِ ثیوبسی ّبی ففًَی اص خولِ لیـوبًیَص کبسثشد‬
‫داسد‪ .‬ايي آصهبيؾ داسای حؼبػیت ثباليی اػت اهب ٍيظگی‬
‫آى ثِ آًتی طى هَسد اػتفبدُ ثؼتگی داسد کِ ثِ عَس هقوَل‬
‫آًتی طى هحلَل بلق هی ثبؿذ‪ .‬ايي آًتی طى اص اًدوبد ٍ‬
‫رٍة هکشس ‪ 4-6‬ثبس ػَػپبًؼیَى پشٍهبػتیگَت ّب دس ثبفش‬
‫فؼفبت ػبلیي ‪ ٍ PBS‬ثِ دًجبل آى ػبًتشيفَط ػشد ثب‬
‫دٍس‪ 10000-20000g‬ثِ دػت هی آيذ‪ .‬هبيـ سٍيی ثِ فٌَاى‬
‫آًتی طى هحلَل اػتفبدُ هی ؿَد ٍ دس چبّک ّبی االيضا‬
‫پَؿبًذُ‬ ‫‪5000- 100 ng/ml‬‬ ‫ثقذ اص تخویي هیضاى پشٍتئیي‬
‫هیؿَد‪ .‬حؼبػیت ايي آصهبيؾ ثب اػتفبدُ اص ايي غلؾت اص‬
‫آًتی طى هحلَل بلق ‪ % 80-100‬اػت اهب ٍاکٌؾ ّبی‬
‫هتقبعـ ثب ػشم ثیوبساى تشيپبًَصٍهیبصيغ‪ ،‬تَثشکلَصيغ ٍ‬
‫تَکؼَپالػوَص گضاسؽ ؿذُ اػت ‪ ، 17‬اص ػَی ديگش ثب‬
‫اػتفبدُ اص ػبيش آًتی طى ّب(‪)116KDa - 72KDa -66KDa‬‬
‫ٍيظگی ‪ %100‬ثذػت هی آيذ‪ ،‬اهب حؼبػیت آصهبيؾ ‪%37/5‬‬
‫هی ثبؿذ ‪ . 19ٍ17‬ثشاػبع گضاسؽ ‪ٍ Palatnik-de-Souza‬‬
‫هجلِ علَم آسهبیشگبّی‪،‬دٍرُ ّفتن(شوبرُ‪ )1‬بْبر ‪92‬‬
 ‫فخبر ٍ احوذپَر‪49/‬‬
‫اػتفبدُ اص آًتی ثبدی ًـبًذاس افضايؾ هی يبثذ‪ ،‬اهب ايي سٍؽ‬
‫ٍقت گیش‪ ،‬پش ّضيٌِ ٍ اص ًؾش تکٌیکی ػخت هی ثبؿذ ‪. 32‬‬
‫ج‪ -‬آصهَى پَػتی ‪ٍ : Skin testing‬اکٌؾ اصديبد حؼبػیت‬
‫تب یشی ( ‪ )DTH‬يب ايوٌی ثَاػغِ لٌفَػیت ّبی ‪ ،T‬يک‬
‫پبػخ ايوٌی ا تلبكی اػت‪ .‬آصهَى پَػتی هًَتِ ًگشٍ‬
‫آصهبيؾ پَػتی لیـوبًیي ًَفی سٍؽ تـخیلی ثش اػبع‬
‫‪Downloaded from goums.ac.ir at 6:38 +0330 on Sunday March 17th 2019‬‬
‫ٍاکٌؾ اصديبد حؼبػیت تب یشی ٍيظُ لیـوبًیَص اػت‪ ،‬اهب‬
‫اػتفبدُ اص ايي آصهبيؾ داسای هحذٍديت ّبيی اػت‬
‫‪ . 10ٍ11ٍ33‬دس ايي سٍؽ ‪ 0/5‬ػی ػی اص پشٍهبػتیگَت‬
‫ّبی ‪ L.major‬کـتِ ؿذُ تَػظ فٌَل حذٍد ‪5*107‬‬
‫پشٍهبػتیگَت سا دس دا ل پَػت ػبفذ ثیوبس تضسيق ٍ ثقذ‬
‫اص ‪ 48‬تب ‪ 72‬ػبفت‪ ،‬قغش تَسم ايدبد ؿذُ اًذاصُ گیشی‬
‫هیگشدد‪ ،‬ثِ فٌَاى ؿبّذ دس ػبفذ ديگش ثیوبس ػشم‬
‫فیضيَلَطی ثِ ّوشاُ فٌَل تضسيق هی ؿَد‪ .‬ايي آصهبيؾ دس‬
‫هَاسد حبد کبالآصاس ثِ بعش فذم ٍاکٌؾ اصديبد حؼبػیت‬
‫تب یشی هٌفی اػت ٍ تٌْب دس هَاسدی کِ کبالآصاس ثْجَد‬
‫يبفتِ اػت‪ ،‬هثجت هی ؿَد کِ هْوتشيي هحذٍديت ٍ اؿکبل‬
‫آى ثِ حؼبة هی آيذ ٍلی هی تَاًذ ثشای هغبلقبت‬
‫اپیذهیَلَطيکی هَسد اػتفبدُ قشاس گیشد ‪. 11ٍ33‬‬
‫رٍش ّبی هلکَلی‪:‬‬
‫اص ػبل ‪ 1980‬ثِ ثقذ تکٌیک ّبی خذيذ ثشای ؿٌبػبيی اًگل‬
‫ّب اص خولِ سٍؽ ّیجشيذاػیَى ‪ٍ ،DNA‬اکٌؾ صًدیشُ‬
‫پلیوشاص ‪ ٍ PCR‬غیشُ تَػقِ يبفت ‪ . 34ٍ35‬اًدبم‬
‫سٍؽ ‪ PCR‬ثشای تـخیق ٍ تقییي َّيت فَاهل ايدبد‬
‫کٌٌذُ لیـوبًیَص احـبيی اص ػبل ‪ 1990‬ثِ ثقذ آغبص ٍ ثش سٍی‬
‫ًوًَِ ّبی َى‪ ،‬هغض اػتخَاى‪ ،‬عحبل ٍ غذد لٌفبٍی ثیوبساى‬
‫اًدبم گشفتِ اػت ‪ . 38-34‬هحققیي ثب اػتفبدُ اص پشايوشّبی‬
‫عشاحی ؿذُ ثش اػبع تَالی ّبی ثبثت هَخَد دس حلقِ ّبی‬
‫کَچک ‪ DNA‬کیٌتَپالػت گًَِ ّبی هختلف اًگل‬
‫لیـوبًیب دس ثبفت ّبی هختلف ثیوبس ثِ ايي ًتیدِ سػیذًذ کِ‬
‫اػتفبدُ اص ‪ DNA‬کیٌتَپالػت اًگل لیـوبًیب ثشای تـخیق ٍ‬
‫ثاشسػی ّابی هلکَلی لیـوبًیب ثؼیبس هٌبػت اػت‪ .‬دس هغبلقِ‬
‫ای دس ػَداى‪ ،‬سٍؽ ‪ً PCR‬ؼجت ثِ سٍؽ هیکشٍػکَپی‬
‫ثااشای ؿٌاابػاابيی اًاگل دس غذد لاٌفبٍی ٍ هاغاض اػتخَاى‬
‫هجلِ علَم آسهبیشگبّی‪،‬دٍرُ ّفتن(شوبرُ‪ )1‬بْبر ‪92‬‬
‫سٍی اػاليذ ؿیـِ ای تویضی قشاس دادُ هی ؿَد‪ .‬دس كَست‬
‫‪A‬‬ ‫ٍخَد آًتی ثبدی دس ًوًَِ ثیوبس ثب کًَظٍگِ پشٍتئیي‬
‫کلَئیذال عاليی ٍاکٌؾ دادُ ٍ ثب حشکت تَػظ بكیت‬
‫هَئیٌگی ٍ ٍاکٌؾ ثب آًتی طى ‪ rK39‬ثبًذ كَستی سًگی سا‬
‫ايدبد هی ًوبيذ‪ .‬ثبيذ تَخِ کشد کِ دس ًَاس فشد ثیوبس‪ ،‬دٍ‬
‫ثبًذ كَستی سًگ ايدبد هی ؿَد کِ يک ثبًذ هشثَط ثِ‬
‫ؿبّذ ٍ ثبًذ ديگش هشثَط ثِ آًتیثبدی ثیوبس اػت‪ .‬حؼبػیت‬
‫ايي آصهبيؾ‪ٍ ٍ %100‬يظگی آى ‪ %98‬هی ثبؿذ ‪. 11ٍ27،31‬‬
‫عجق هغبلقِ ای دس ػَداى ّوِ ثیوبساى هجتال ثِ کبالآصاس کِ‬
‫آصهبيؾ ًَاسی ‪ rK39‬آًْب هٌفی ثَد ‪ IgG‬فلیِ ‪ rK39‬سا‬
‫تَػظ هیکشٍااليضا ًـبى دادًذ دس تیتش ّبی پبئیي ‪ّ ،‬وچٌیي‬
‫‪rK39‬‬ ‫دس هغبلقِ ديگشی دس خٌَة اسٍپب آصهبيؾ ًَاسی‬
‫فقظ دس ‪ % 71/4‬ثیوبساى هثجت ثَد‪ ،‬کِ ايي تفبٍت دس‬
‫حؼبػیت آصهبيؾ احتوبالَ ثِ فلت تفبٍت دس پبػخ ّبی‬
‫آًتی ثبدی دس ًظادّبی هختلف اػت ‪ . 24،25‬اص آًدبيی‬
‫کِ ‪ IgG‬ضذ ‪ rK39‬دس ػشم ثیوبساى هذتی ثقذ اص دسهبى ّن‬
‫ٍخَد داسد‪ ،‬ايي آصهبيؾ ثشای تـخیق ثیوبساًی ثب فَد‬
‫کبالآصاس کِ تبسيخچِ ای ّن اص ثیوبسی داسًذ‪ً ،‬جبيذ اػتفبدُ‬
‫ؿَد‪ .‬هـکل ديگش آصهبيؾ ًَاسی ‪ً ،rK39‬تبيح هثجت کبرثی‬
‫اػت کِ هوکي اػت دس هجتاليبى ثِ ثیوبسی ّبی ديگش اص‬
‫خولِ هبالسيب‪ ،‬تت تیفَئیذ ٍ تَثشکلَصيغ ديذُ ؿَد‪ .‬ثب‬
‫ٍخَد ايي هحذٍديت ّب‪ ،‬هٌبػت ثَدى ايي آصهبيؾ ثشای‬
‫تـخیق آلَدگی ّبی حبد لیـوبًیَص ثِ اثجبت سػیذُ ٍ تٌْب‬
‫سٍؽ تـخیلی هَخَد ثشای کبالآصاس اػت کِ داسای‬
‫ٍيظگی ٍ حؼبػیت قبثل قجَلی ثَدُ ٍ ّوچٌیي دس ّش‬
‫ؿشايغی ثِ ػبدگی قبثل اًدبم ٍ کن ّضيٌِ هی ثبؿذ ‪-26‬‬
‫‪. 31‬آًتی ثبدی ّبی ا تلبكی تَػظ سٍؽ ٍػتشى ثالت‬
‫ًیض هیتَاًٌذ سديبثی ؿًَذ‪ ،‬ثِ عَسی کِ دس ايي آصهبيؾ‬
‫پشٍهبػتیگَت ّبی ‪ L. donovani‬سا پغ اص سؿذ ٍ سػیذى‬
‫ثِ فبص لگبسيتوی لیض ٍ پشٍتئیي هحلَل سا ثش سٍی طل دٍدػیل‬
‫ػَلفبت پلی آکشيالهیذ الکتشٍفَسص ًوَدُ ٍ پشٍتئیي ّبی‬
‫خذا ؿذُ سا ثش سٍی ًَاس ًیتشٍػلَلض قشاس هی دٌّذ ٍ ثب ػشم‬
‫ثیوبس هدبٍس هی ًوبيٌذ‪ ،‬حؼبػیت ايي سٍؽ دس كَست‬

‫ٍ تقییي گًَِ اًگل اؿبسُ ًوَد اص هقبيت سٍؽ ‪ً PCR‬یض هی‬
‫تَاى ًیبص ثِ اهکبًبت ٍ تدْیضات پیـشفتِ آصهبيـگبّی ٍ‬
‫افشاد ثب تدشثِ اؿبسُ ًوَد‪ ،‬ؿبيذ هْوتشيي هحذٍديت سٍؽ‬
‫‪ PCR‬اػتفبدُ آى دس هٌبعق ثَهی ثبؿذ‪ .‬دس ايي ًَاحی گبّی‬
‫ًتیدِ آصهبيؾ افشاد ػبلن ًیض ثِ كَست کبرة هثجت هی‬
‫ؿَد‪ .‬هوکي اػت چٌیي هَاسدی ثِ اؿتجبُ کبالآصاس تـخیق‬
‫‪Downloaded from goums.ac.ir at 6:38 +0330 on Sunday March 17th 2019‬‬
‫دادُ ؿًَذ‪ .‬ثِ ّویي دلیل تَكیِ هی ؿَد کِ دس هٌبعق ثَهی‬
‫ثیوبسی‪ ،‬خْت تـخیق ًْبيی اص ّش دٍ سٍؽ ػشٍلَطی ٍ‬
‫هَلکَلی ثِ عَس ّوضهبى اػتفبدُ ؿَد ‪. 41‬تٌَؿ طًتیکی دس‬
‫هیبى کوپلکغ لیـوبًیب دًٍٍَاًی ثِ هَضَؿ خبلجی تجذيل‬
‫ؿذُ کِ ثِ دًجبل آى ثؼیبسی اص سٍؽ ّبی هلکَلی اص‬
‫خولِ‪ ،RAPD-PCR, RFLP-PCR‬آًبلیض ‪،Microsatellite‬‬
‫تقییي تَالی ‪ ، ITS2, ITS1‬خبيگبُ ّبی‪mini- exon‬‬
‫)‪ ٍ (mRNA‬چٌذيي طى کذ کٌٌذُ پشٍتئیي ثِ کبس گشفتِ‬
‫ؿذُ اًذ ‪ً . 34،41‬تبيح هغبلقِ فخبس ٍ ّوکبساى ًـبى هی‬
‫دّذ کِ دس هیبى سٍؽ ّبی تبيپیٌگ اًگل ّبی لیـوبًیب‬
‫سيضهبَّاسُ‬ ‫تبيپیٌگ‬ ‫سٍؽ‬ ‫ٍ طًَتیپی‬ ‫فٌَتیپی‬
‫)‪ (Microsatellite‬کِ ثشای اٍلیي ثبس ثش سٍی ًوًَِ ّبی‬
‫ايشاى ٍ ثشای اٍلیي ثبس دس خْبى ثش سٍی اػاليذّبی‬
‫هیکشٍػکَپی اًدبم گشفت اثضاسی اسصؿوٌذ‪ ،‬دقیق‪ ،‬ػشيـ ٍ‬
‫قبثل افتوبد ثشای هغبلقبت طًتیک خْت اپیذهیَلَطی‬
‫هلکَلی هی ثبؿذ ‪ . 42‬ا یشا" سٍؽ هلکَلی خذيذی ثِ ًبم‬
‫‪ LAMP‬ثشای تـخیق ثیوبسی ّبی ففًَی اص خولِ‬
‫لیـوبًیَص احـبيی هَسد اػتفبدُ قشاس گشفتِ اػت ‪ . 43‬اص‬
‫هضايبی ايي سٍؽ ًؼجت ثِ ػبيش سٍؽ ّبی هلکَلی ًؾیش‬
‫‪ ،PCR‬اًدبم توبهی ٍاکٌؾ ّب دس دا ل يک هیکشٍتیَة ٍ‬
‫فذم ًیبص ثِ دػتگبُ تشهَ ػبيکلش ٍ الکتشٍفَسص هی ثبؿذ‪ .‬دس‬
‫كَست اًدبم ٍاکٌؾ ٍ تکثیش طى هَسد ًؾش دس دهبی ‪-60‬‬
‫‪ 65‬دسخِ ػبًتی گشاد‪ ،‬هبدُای سًگی ايدبد ؿذُ کِ هثجت يب‬
‫هٌفی ثَدى ٍاکٌؾ سا ًـبى هیدّذ ‪. 43‬‬
‫رٍش ّبی بیَشیویبیی‪ :‬ايي سٍؽ ثش اػبع الکتشٍفَسص‬
‫‪MDH, PGM, NH1, NH2,‬‬ ‫لیـوبًیب ايضٍ آًضين ّبی‬
‫‪ 6PGD,GPI‬ثش سٍی طل ّبی اػتبت ػلَلض‪ ،‬پلی آکشيالهیذ‬
‫ٍ يب ًـبػتِ ٍ تقییي صايوَدم ّبی اًگل هی ثبؿذ‪ .‬اثتذا اًگل‬
‫هزٍری بز رٍش ّبی تشخیص‪. . .‬‬ ‫‪/50‬‬
‫حؼبع تش گضاسؽ ؿذُ اػت ‪ّ . 34‬وچٌیي هغبلقبت‬
‫فشاٍاًی ثِ هٌؾَس تـخیق کبالآصاس ٍ تقییي َّيت اًگل دس‬
‫َى هحیغی ثیوبساى ثب اػتفبدُ اص پشايوشّبی ا تلبكی‬
‫اًدبم گشفتِ اػت کِ ًتبيح هغلَثی سا ثِ ّوشاُ داؿتِ اػت‪.‬‬
‫دس هدوَؿ حؼبػیت ٍ ٍيظگی سٍؽ ‪ PCR‬ثش سٍی َى‬
‫هحیغی دس ًقبط هختلف دًیب ثِ تشتیت ‪ٍ %100 ٍ % 70-100‬‬
‫دس ايشاى ‪ %100 ٍ % 82-85‬گضاسؽ ؿذُ اػت‪ ،‬کِ ايي‬
‫تفبٍت ثِ فَاهل هختلفی اص خولِ ًَؿ پشايوش هَسد اػتفبدُ‪،‬‬
‫گًَِ اًگل‪ ،‬هیضاى تشاکن اًگل دس َى ٍ غیشُ ثؼتگی داسد‬
‫ااَى هااحیغی ثشای‬ ‫‪ . 38-34‬دس اػتفاابدُ اص سٍؽ‬
‫ثشسػی ّبی هلکَلی‪ ،‬ثْتش اػت اص ثبفی کَت اػتفبدُ ؿَد‪،‬‬
‫چشا کِ حؼبػیت سٍؽ سا تب دُ ثشاثش افضايؾ َاّذ داد‪،‬‬
‫ّوچٌیي هی تَاى اص َى هحیغی خوـ آٍسی ؿذُ ثب‬
‫اػتفبدُ اص کبغز كبفی ًیض دس ايي سٍؽ اػتفبدُ ًوَد ‪. 37‬‬
‫تکٌیک ‪ PCR-ELISA‬سٍؽ ثؼیبس حؼبػی اػت کِ فالٍُ‬
‫ثش تـخیق کبالآصاس‪ ،‬هی تَاى ثب اػتفبدُ اص آى ػَؽ ّبی‬
‫‪ L.donovani complex‬سا ًیض ؿٌبػبيی ًوَد‪ ،‬ايي سٍؽ‬
‫تَاًبيی ؿٌبػبيی ‪ 0/1‬پشٍهبػتیگَت يب ‪ 1‬فوتَگشم ‪ fg‬اص‬
‫هَاد حبٍی طًَم اًگل سا داسد ‪ . 39‬تکٌیک ديگش‬
‫‪ (F-PCR) Fluorogenic-PCR‬هی ثبؿذ‪ .‬اػبع ايي سٍؽ‬
‫اػتفبدُ اص پشٍة فلَسػٌت ‪ DNA‬هی ثبؿذ کِ ٍيظُ ًَاحی‬
‫ثبثت ٍاحذّبی کَچک ‪ RNA‬سيجَصٍهی (‪ )rRNA‬اًگل‬
‫لیـوبًیب ٍ اػتفبدُ اص يک خفت پشايوش هی ثبؿذ‪ .‬ايي سٍؽ ثب‬
‫حؼبػیت ٍ ٍيظگی ثبال ٍ ثؼیبس ػشيـ دس عی کوتش اص ‪24‬‬
‫‪RFLP-PCR‬‬ ‫ػبفت اًدبم هی ؿَد ‪ . 40‬تکٌیک ثقذی‬
‫اػت کِ هی تَاى اص ايي سٍؽ دس تقییي َّيت اًگل ّبی‬
‫خذا ؿذُ اص ثیوبساى ٍ ّوچٌیي خْت تفکیک فَد‬
‫(‪ ٍ )Relapse‬ففًَت هدذد (‪ ) Re-infection‬دس ثیوبساى‬
‫ثْجَد يبفتِ اص کبالآصاس اػتفبدُ ًوَد ‪ . 35‬اص خولِ هضايبی‬
‫‪ PCR‬دس تـخیق کبالآصاس‪ ،‬هی تَاى ثِ هَاسدی اص قجیل‬
‫تـخیق صٍدسع ثیوبسی ثِ لَف دس افشاد ثَدى فالهت‬
‫ثبلیٌی ٍ داسای ففًَت هخفی‪ ،‬حؼبػیت ٍ ٍيظگی ثؼیبس ثبال‪،‬‬
‫غیش تْبخوی ثَدى سٍؽ خْت تـخیق ثیوبسی دس افشاد‬
‫دچبس ًقق ػیتن ايوٌی‪ ،‬اسصيبثی دسهبى پغ اص داسٍ دسهبًی‬
‫هجلِ علَم آسهبیشگبّی‪،‬دٍرُ ّفتن(شوبرُ‪ )1‬بْبر ‪92‬‬
 ‫فخبر ٍ احوذپَر‪51/‬‬
‫ّوَگلَثیٌَپبتی ّب‪ ،‬اؿتجبُ ؿذُ ٍ هٌدش ثِ تـخیق ًبدسػت‬
‫ٍ دس ًتیدِ دسهبى اؿتجبُ ٍ ًبهٌبػت هی گشدد کِ دس ثؼیبسی‬
‫اص ايي هَاسد‪ ،‬تـخیق ًبدسػت هٌدش ثِ هشگ ثیوبس َاّذ‬
‫ؿذ ‪ . 50‬ثب تَخِ ثِ ايٌکِ فذم تـخیق ٍ دسهبى ثِ هَقـ‬
‫هوکي اػت تب ‪ 100‬دسكذ ثبفث هشگ ٍ هیش ثیوبساى ثِ ٍيظُ‬
‫کَدکبى گشدد‪ ،‬لزا تـخیق دقیق ٍ صٍدسع ثیوبسی اص‬
‫‪Downloaded from goums.ac.ir at 6:38 +0330 on Sunday March 17th 2019‬‬
‫اّویت ٍيظُ ای ثش َسداس اػت‪ .‬ثٌبثشايي دػتیبثی ثِ سٍؽ يب‬
‫سٍؽ ّبی کبسآهذ‪ ،‬دقیق‪ ،‬آػبى‪ ،‬کن ّضيٌِ ٍ دس فیي حبل‬
‫ػشيـ دس لَف تـخیق ٍ ؿٌبػبيی فَاهل ايدبد کٌٌذُ‬
‫ثیوبسی اهشی ضشٍسی اػت خذٍل‪ . 1‬لزا تَكیِ هی کٌین‬
‫دس هٌبعق ثَهی ثیوبسی کبالآصاس دس هَاسد هـکَک ثِ‬
‫لَکوی فالٍُ ثش آصهبيؾ هغض اػتخَاى ٍ خؼتدَی دقیق اص‬
‫ًؾش اخؼبم لیـوي‪ ،‬اص آصهَى ّبی ػشٍلَطی ٍ ‪ PCR‬خْت‬
‫سد يب تبيیذ ًوَدى ثیوبسی کبالآصاس اػتفبدُ گشدد‪ ،‬تب‬
‫تـخیق ثِ تب یش ًیفتذ صيشا آصهبيؾ هغض اػتخَاى اص‬
‫حؼبػیت پبيیٌی ثش َسداس اػت ٍ ؿبًغ هـبّذُ‬
‫آهبػتیگَت کن اػت‪ّ .‬وچٌیي ثِ هٌؾَس خلَگیشی اص‬
‫آػپیشاػیَى ٍ ثیَپؼی ّبی هتقذد هغض اػتخَاى خْت‬
‫اسصيبثی دسهبى ٍ ثشسػی پیؾ آگْی ثیوبسی‪ ،‬اص سٍؽ ‪PCR‬‬
‫ا تلبكی ثش سٍی َى هحیغی ‪ ٍ 51‬يب سٍؽ ‪ PCR‬کوی‬
‫)‪ (Real-time PCR‬اػتفبدُ گشدد‪ّ .‬وچٌیي دس هیبى سٍؽ‬
‫ّبی ػشٍلَطی‪ ،‬سٍؽ ‪ IFA‬داسای ثیـتشيي حؼبػیت ٍ‬
‫سٍؽ ‪ DAT‬داسای ثیـتشيي ٍيظگی اػت‪ .‬اهبدس حبل حبضش‬
‫ثشای غشثبلگشی خوقیت ّبی اًؼبًی ٍ هخبسى حیَاًی دس‬
‫هغبلقبت ػشٍاپیذهیَلَطيک کبالآصاس دس هٌبعق ثَهی ايشاى‬
‫اص سٍؽ ‪ DAT‬اػتفبدُ هیؿَد کِ سٍؿی هَثش دس پبيؾ‬
‫ثیوبساى ثلَست فقبل ٍ پبػیَ هیثبؿذ ‪. 52ٍ51،41،21‬‬
‫سٍؽ ‪ PCR‬ا تلبكی خٌغ‪ ،‬اثضاسی اسصؿوٌذ دس تـخیق‬
‫صٍدسع ثیوبسی‪ ،‬تبئیذ هَاسد هـکَک ثِ ثیوبسی‪ ،‬ؿٌبػبيی‬
‫هَاسد ثذٍى فالهت ‪ ٍ 53ٍ48ٍ38‬داسای فالهت ثیوبسی ٍ‬
‫غشثبلگشی خوقیت اًؼبًی ‪ ٍ 51‬هخبصى حیَاًی ثَيظُ‬
‫ػگْبی اّلی هٌبعق ثَهی ‪ 52‬دس هغبلقبت اپیذهیَلَطی هی‬
‫ثبؿذ‪ّ .‬وچٌیي هی تَاى ايي سٍؽ سا ثِ عَس هؼتقین ثش سٍی‬
‫َى‪ ،‬ػشم‪ ،‬ادساس‪ ،‬هغض اػتخَاى‬ ‫ًوًَِ ّبی هختلف ثبلیٌی‬
‫هجلِ علَم آسهبیشگبّی‪،‬دٍرُ ّفتن(شوبرُ‪ )1‬بْبر ‪92‬‬
‫سا دس هحیظ ّبی کـت ثِ تَلیذ اًجَُ سػبًذُ ٍ ػپغ ثب‬
‫خوـ آٍسی اًگل الکتشٍفَص اًدبم هی ؿَد‪ .‬سٍؽ ّبی‬
‫ثیَؿیویبيی ٌَّص سٍؽ اػتبًذاسد ٍ قبثل قجَل خْت تقییي‬
‫َّيت اًگل لیـوبًیب ٍ تقییي ػَؽ ّبی آى هی ثبؿذ ‪45‬‬
‫ٍ‪. 44‬‬
‫ٍخَد تؾبّشات ثبلیٌی غیش هقوَل کبالآصاس دس ثیوبساى‬
‫ايذصی ٍ ّوچٌیي افشاد دچبس ًقق ػیؼتن ايوٌی يک چبلؾ‬
‫تـخیق دس ايي ثیوبساى هی ثبؿذ‪ .‬تت‪ ،‬اػپلٌَهگبلی ٍ‬
‫ّپبتَهگبلی دس کوتش اص ًیوی اص ايي ثیوبساى ديذُ ؿذُ اػت‪.‬‬
‫دس ايي افشاد‪ ،‬لیـوبًیَص ثِ ّوشاُ دسگیشی هقذُ‪-‬سٍدُای‪ ،‬آة‬
‫آٍسدگی ؿکن‪ ،‬خٌت يب پشيکبسد‪ ،‬اثتالء سيِ ّب‪ ،‬لَصُ ّب‪،‬‬
‫پَػت ٍ حتی ثِ كَست ثیوبسی هٌتـشُ ٍخَد داسد‪ .‬اكَل‬
‫تـخیلی ثشای ايي ثیوبساى ّوبًٌذ سٍؽ ّبيی اػت کِ ثشای‬
‫ثیوبساى کبالآصاس غیش آلَدُ ثِ ايذص ثِ کبس هی سٍد‪،‬‬
‫آهبػتیگَت ّب هوکي اػت دسهحل ّبی غیش هقوَل اص‬
‫خولِ دس ًوًَِ ّبيی اص ؿؼتـَی هبيـ ثشًٍؾ‪-‬آلَئَالس‬
‫(‪ ،)BAL‬هبيـ خٌت ٍ يب ثیَپؼی ًوًَِ ّبيی اص دػتگبُ‬
‫گَاسؽ ٍ ثبفی کَت َى هحیغی ديذُ ؿًَذ‪ .‬ثبيذ تَخِ‬
‫کشد کِ حؼبػیت آصهبيؾ ّبی ايوًََلَطيکی هثل ‪ٍ IFA‬‬
‫‪ ELISA‬ثشای ثیوبساى ايذصی هجتال ثِ کبالآصاس ثِ دلیل‬
‫کبّؾ ػغح ايوٌی پبئیي اػت‪ ،‬اص ايي سٍی ‪َ PCR‬ى ٍ يب‬
‫ثبفی کَت سٍؽ تـخیلی هفیذی ثشای ايي ثیوبساى هی‬
‫تَاًذ ثبؿذ ‪. 49-46‬‬
‫ًتیجِ گیزی‬
‫ثغَسکلی تـخیق ثیوبسی لیـوبًیَص احـبيی يب‬
‫کبالآصاس پیچیذُ اػت چشا کِ تؾبّشات ثبلیٌی آى ثب ػبيش‬
‫ثیوبسی ّبی ؿبيـ اص قجیل هبالسيب‪ ،‬تیفَئیذ ٍ ػل هـبثِ ثَدُ ٍ‬
‫گبّی ايي ثیوبسی ّب ثغَس ّن صهبى ثِ فٌَاى ففًَت تَأم دس‬
‫ؿخق هجتال ثِ کبالآصاس ديذُ هی ؿًَذ‪ .‬اص ػَی ديگش ثِ‬
‫دلیل ٍخَد ّبيپشػلَالسيتی ٍ هقکَع ؿذى سدُ هیلَئیذ ثِ‬
‫اسيتشٍئیذ‪ ،‬پالػوبػیتَص‪ ،‬هگبکبسيَػیت ّب‪ً ،‬کشٍص ٍ فیجشٍص‬
‫دس آػپیشاػیَى ٍ ثیَپؼی هغض اػتخَاى دس ثؼیبسی اص هَاسد‬
‫ثیوبسی کبالآصاس ثب اًَاؿ لَکوی ّب‪ ،‬لوفَهب‪ ،‬آًوی ّب‬
‫ّوَلیتیک‪ ،‬هگبلَثالػتیک ‪ ،‬ا تالالت هیلَپشٍلیفشاتیَ ٍ‬
 ‫هزٍری بز رٍش ّبی تشخیص‪. . .‬‬ ‫‪/52‬‬

‫دس عجقِ ثٌذی ٍ تقییي ػَؽ ايي اًگل ّب هی ثبؿذ‪ .‬الجتِ‬
‫ا یشا" اص سٍؽ پشٍتئَهیکغ ًیض خْت ثشسػی تقبثل ثیي‬
‫لیـوبًیب ٍهیضثبى‪ ،‬تفبٍتْبی پشٍتئیي ّب دس ثیي گًَِ ّبی‬
‫هختلف ٍ ًیض هکبًیؼوْبی هقبٍهت داسٍيی اػتفبدُ ؿذُ‬
‫اػت ‪. 53‬‬
‫دس پبيبى پیـٌْبد هی کٌین هغبلقبتی دس هَسد اًتخبة سٍؽ‬
‫‪Downloaded from goums.ac.ir at 6:38 +0330 on Sunday March 17th 2019‬‬
‫ثکبس ثشد‪ .‬ثشای تبيیذ تـخیق هَاسد هـکَک ثِ ثیوبسی‬
‫کبالآصاس‪ ،‬اػتفبدُ ّن صهبى اص دٍ آصهَى ‪ PCR ٍ IFA‬اص‬
‫‪PCR‬‬ ‫کبسآيی ثؼیبس ثباليی ثش َسداس اػت ‪ . 51‬سٍؽ‬
‫ا تلبكی گًَِ‪ ،‬سٍؽ دقیق‪ ،‬ػشيـ ٍ آػبى ثشای تقییي‬
‫گًَِ اًگل ّبی لیـوبًیب ثب اػتفبدُ اص ًوًَِ ّبی ثبفتی هغض‬
‫اػتخَاى‪ ،‬کجذ ٍ سٍدُ هی ثبؿذ ٍ ّوچٌیي حؼبػیات آى اص‬

‫‪ PCR‬ثِ فٌَاى سٍؽ اػتبًذاسد عاليی دس تـخیق‪ ،‬اسصيبثی‬ ‫سٍؽ ّبی اًگل ؿٌبػی کـت‪ ،‬تلقیح ثِ حیَاى حؼبػیت‬
‫دسهبى ٍ پیؾ آگْی کبالآصاس دس هٌبعق ثَهی ايشاى كَست‬ ‫آصهبيـگبّی ٍ سٍؽ هؼتقین ثیـتش اػت ٍ فالٍُ ثش آى ًیبص‬
‫گیشد‪ّ .‬وچٌیي اعالؿ سػبًی هٌبػجی ثشای پضؿکبى دس صهیٌِ‬ ‫ثِ کـت اًگل ًذاسد‪ .‬سٍؽ تبيپیٌگ هیکشٍػتاليت ًیض‬
‫سٍؽ ّبی هختلف تـخیلی ثِ هٌؾَس خلَگیشی اص‬ ‫اثضاسی دقیق‪ ،‬ػشيـ ٍ قبثل افتوبد ثشای هغبلقبت اپیذهیَلَطی‬
‫تـخیق اؿتجبُ ثیوبسی کبالآصاس ٍ تفشيق آى اص ػبيش ثیوبسيْب‬ ‫ٍ طًتیک خوقیت گًَِ ّبی هختلف لیـوبًیب ثَدُ ٍ‬
‫اًدبم گیشد‪.‬‬ ‫خبيگضيي ثؼیبس هٌبػجی ثشای سٍؽ الکتشٍفَسص ايضٍآًضين ّب‬
‫جذٍل شوبرُ ‪ -1‬حسبسیت ٍ ٍیضگی رٍش ّبی هختلف تشخیص کبالآسار‬

‫منبع‬ ‫ويصگی ( ‪) %‬‬ ‫حساسيت ( ‪) %‬‬ ‫نوع آزمون‬ ‫انواع روش ها‬
‫‪11‬و‪71‬‬ ‫‪17 –17‬‬ ‫‪57 – 57‬‬ ‫کانترکارنت ايمونوالکتروفورز‬ ‫روش های تشخيص ايمنی‪2‬‬

‫‪11‬و‪77‬و‪72‬‬ ‫‪07 – 17‬‬ ‫‪57 – 57‬‬ ‫ايمونوفلورسانت غيرمستقيم‬ ‫‪ -1‬شناسايی آنتی بادی‬
‫آگلوتيناسيون مستقيم‬

‫‪17‬و‪11‬و‪77‬و‪ 77‬و‪72‬‬ ‫‪57-177‬‬ ‫‪11-177‬‬

‫االيسا با آنتی شن ‪rk39‬‬

‫‪77-11‬و‪72‬‬ ‫تست نواری سريع با ‪rk39‬‬

‫‪57 – 17‬‬ ‫‪177‬‬

‫‪75‬و‪71‬و‪77‬‬
‫‪177‬‬

‫‪00 – 10‬‬

‫‪17‬‬ ‫‪177‬‬ ‫‪10 – 177‬‬ ‫‪KATEX‬‬ ‫‪-7‬شناسايی آنتی شن‬

‫‪11‬و‪71‬و‪72‬و‪-71‬‬ ‫‪177‬‬ ‫‪( 07-07‬خون)‬ ‫‪ PCR‬با پرايمرهای عمومی‬ ‫‪ -7‬شناسايی ‪DNA‬‬

‫‪70‬و‪71‬‬ ‫‪RV1/RV2‬‬
‫‪177‬‬
‫‪ PCR‬با پرايمرهای عمومی‬
‫‪11‬و‪71‬و‪72‬و‪70-71‬‬
‫‪177‬‬ ‫‪(177‬مغس استخوان)‬ ‫‪RV1/RV2‬‬
‫‪11‬و‪71‬و‪71‬‬ ‫‪ PCR‬با پرايمرهای عمومی‬
‫‪RV1/RV2‬‬
‫‪25‬‬ ‫‪(1160‬ادرار)‬

‫‪11‬و‪17‬و‪71‬‬ ‫‪177‬‬ ‫‪17-07‬‬ ‫اسمير مغساستخوان‬ ‫پارازيتولوشی‬

‫‪11‬و‪17‬‬ ‫‪177‬‬ ‫‪<17‬‬ ‫اسمير طحال‬

‫هجلِ علَم آسهبیشگبّی‪،‬دٍرُ ّفتن(شوبرُ‪ )1‬بْبر ‪92‬‬

 53/‫فخبر ٍ احوذپَر‬
References
1. Fakhar M, Rahmati B. Visceral leishmaniasis in
Mazandaran Province and review on its current situation
in Iran. JBUMS. 2011; 13(2): 68-75.[Persian]
2. Motazedian H, Noyes H, Maingon R. Leishmania and
Sauroleishmania: the use of random amplified
polymorphic DNA for the identification of parasites from
vertebrates and invertebrates. Exp Parasitol. 1996;
83(1):150-154.
Downloaded from goums.ac.ir at 6:38 +0330 on Sunday March 17th 2019
3. Fakhar M , Mohebali M, Barani M. Identification of
endemic focus of Kakla-azar and seroepidemiologcal
study of visceral leishmania infection in human and
canine in Qom Province. Armaghan-danesh. 2004;
9(3): 43-52.[Persian]
4. Fakhar M, Motazedian MH, Asgari Q , Mohebali M,
Mehrabani D. A New Endemic Focus of Visceral
Leishmaniosis in Southern Iran. Armaghane-Danesh.
2006; 11(2): 104-110. [Persian]
5. Sarkari B, Fakhar M, Ebrahimi S, Motazedian MH,
Hatam GH, Kalantari M, et al. Characterization of
Leishmania parasites isolated from Kala- azar patients
in Kohgiloyeh and BoyerAhmad, using semi-nested PCR.
Armaghan-Danesh. 2006; 11(1): 27-32. [Persian]
6. Mohebali M, Hajjaran H, Hamzavi Y, Mobedi I, Arshi
S, Zarei Z, et al. Epidemiological aspects of canine
visceral leishmaniasis in the Islamic Republic of Iran.
Vet Parasitol. 2005; 129(3-4): 243-251.
7. Alborzi AAV, Pouladfar GHR, Aalami MH. Visceral
leishmaniasis; literature review and Iranian experience.
Iranian Journal of Clinical Infectious Diseases. 2007;
2(2): 99-108.
8. Albrecht H. Leishmaniasis: new perspectives on an
underappreciated opportunistic infection. AIDS. 1998;
12(16): 2225–2226.
9. Sundar S, Pai K, Kumar R, Pathak-Tripathi K, Gam
AA, Ray M, et al. Resistance to treatment in kala-azar:
speciation of isolates from Northeast India. Am J Trop
Med Hyg. 2001; 65(3): 193-196.
10. Chappuis F, Sundar S, Hailu A, Ghalib H, Rijal S,
Peeling RW, et al. Visceral leishmaniasis: what are the
needs for diagnosis, treatment and control? Nat Rev
Microbiol. 2007; 5(11): 873-82.
11. Sundar S, Rai M. Laboratory diagnosis of visceral
leishmaniasis . Clin Diagn Lab Immunol. 2002; 9(5):
951-958.
12. Zijlstra EE, Ali MS, el-Hassan AM, el-Toum IA,
Satti M, Ghalib HW, et al. Kala-azar: a comparative
study of parasitological methods and the direct
agglutination test in diagnosis. Trans R SocTrop Med
Hyg. 1992; 86(5): 505–507.
13. Allahverdiyev AM, Bagirova M, Uzun S, Alabaz D,
Aksaray N, Kocabas E, et al. The value of a new
microculture method for diagnosis of visceral
leishmaniasis by using bone marrow and peripheral
blood. Am J Trop Med Hyg. 2005; 73(2): 276–280.
14. De Colmenares M, Portus M, Riera C, Gallego M,
Aisa MJ, Torras S, et al. Detection of 72–75 kD and 123
kD fractions of leishmania antigen in urine of patients
92 ‫) بْبر‬1ُ‫دٍرُ ّفتن(شوبر‬،‫هجلِ علَم آسهبیشگبّی‬
15. Attar ZJ, Chance ML, el-Safi S, Carney J, Azazy A,
El-Hadi M, et al. Latex agglutination test for the
detection of Urinary antigens in visceral leishmaniasis.
Acta Trop. 2001; 78(1): 11–16
16. Sinha R, Sehgal S. Comparative evaluation of
serological tests in Indian kala-azar. J Trop Med Hyg.
1994; 97(6): 333–340.
17. Choudhry A, Guru PY, Saxena RP, Tandon A,
Saxena KC. Enzyme-linked immunosorbent assay in the
diagnosis of kala-azar in Bhadohi (Varanasi), India.
Trans R Soc Trop Med Hyg. 1990; 84(3): 363–366.
18 . Kumar R, Pai K, Pathak K, Sundar S. Enzyme-linked
immunosorbentassay for recombinant K39 antigen in
diagnosis and prognosis of Indian visceral leishmaniasis.
Clin Diagn Lab Immunol. 2001; 8(6): 1220–1224.
19. Ryan JR, Smithyman AM, Rajasekariah GH,
Hochberg L, Stiteler JM, Martin SK. Enzyme-linked
immunosorbent assay based On soluble promastigote
antigen detects immunoglobulin M (IgM) and IgG
Antibodies in sera from cases of visceral and cutaneous
leishmaniasis. J Clin Microbiol. 2002; 40(3): 1037–1043.
20. Mikaeili F, Fakhar M, Sarkari B, Motazedian MH,
Hatam G. Comparison of serological methods (ELISA,
DAT and IFA) for diagnosis of visceral leishmaniasis
utilizing an endemic strain. Iranian Journal of
Immunology. 2007; 4(2): 116-21.
21. Harith AE, Kolk AH, Leewenburg J, Muigai R,
Huigen E, Jelsma T,et al. Improvement of a direct
agglutination test for field studies of visceral
leishmaniasis. J Clin Microbiol. 1988; 26(7): 1321–1325.
22. Mohebali M, Edrissian GhH , Nadim A, Hajjaran H,
Akhoundi B, Hooshmand B, et al. Application of direct
agglutination test (DAT) for the diagnosis and
seroepidemiological studies of visceral leishmaniasis in
Iran. Iranian Journal of Parasitology. 2006; 1(1): 15-25.
23. Zijlstra EE, Ali MS, el-Hassan AM, el-Toum IA,
Satti M, Ghalib HW, et al. Direct agglutination test for
diagnosis and seroepidemiological survey of kala-azar in
the Sudan. Trans R Soc Trop Med Hyg. 1991; 85(4):
474–476.
24. Sunder S, Singh GS, Singh VP, Singla N, Kumar K,
Vinayak VK. Comparative evaluation of DAT, IFAT and
micro-ELISA in the serodiagnosis of Indian kala-azar. J
Parasitic Dis. 1996; 20(1): 41–43.
25. Eddrissian GH, Hajaran H, Mohebali M, et al.
Application and evaluation of direct agglutination test in
serodiagnosis of visceral Leishmaniasis in man and
canine reservoir in Iran. Iran J Med Sci. 1996; 21: 119-
24.
26. De-Sousa CBP, Gomes EM, De-Souza EP, Palatnik
M, Luz K, Borojevic R. Leishmania donovani: titration
of the antibodies to the fucose mannose ligand as an aid
in the diagnosis and prognosis of visceral leishmaniasis.
Elsevier. 1995; 89(4): 390–393.
27. Singh S, Gilman-Sachs A, Chang KP, Reed SG.
Diagnostic and prognostic value of K39 recombinant
antigen in Indian leishmaniasis. J Parasitol. 1995; 81(6):
1000–1003.

28. Sundar S, Reed SG, Singh VP, Kumar PCK, Murray
HW. Rapid accurate field diagnosis of visceral
leishmaniasis .Lancet 1998; 351(9102): 563–565.
29. Zijlstra EE, Nur Y, Desjeux P, Khalil EA, El-Hassan
AM, Groen J. Diagnosing visceral leishmaniasis with the
recombinant K39 strip test: experience from the Sudan.
Trop Med Int Health. 2001; 6(2): 108–113.
30. Jelinek T, Eichenlaub S, Loscher T. Sensitivity and
specificity of a rapid immunochromatographic test for
Downloaded from goums.ac.ir at 6:38 +0330 on Sunday March 17th 2019
diagnosis of visceral leishmaniasis. Eur J Clin Microbiol
Infect Dis. 1999; 18(9): 669–670.
31. Singh S. New developments in diagnosis of
leishmaniasis. Indian J Med Res. 2006; 123(3): 311-330.
32. Singh S. Recent advances in the laboratory diagnosis
of leishmaniasis. Indian kala-azar. Khandelwal Offsets,
Varanasi, India. 1996; 39–56.
33. Haldar JP, Ghose S, Saha KC, Ghose AC. Cell-
mediated immune response in Indian kala-azar and post
kala-azar dermal leishmaniasis. Infect Immun. 1983;
42(2): 702–707.
34. Andresen K, Gasim S, Elhassan AM, Khalil EA,
Barker DC, Theander TG, et al. Diagnosis of visceral
leishmaniasis by polymerase chain reaction using blood,
bone marrow and lymphnode samples from patients from
the Sudan. Trop Med Int Health. 1997; 2(5): 440–444.
35. Morales MA, Chicharro C, Ares M, Canavate C,
Barker DC, Alvar J. Molecular tracking of infections by
Leishmania infantum. Trans R Soc Trop Med Hyg. 2001;
95(1): 104–107.
36. Osman OF, Oskam L, Zijlstra EE, Kroon NC,
Schoone GJ, Khalil ET, et al. Evaluation of PCR for
diagnosis of visceral leishmaniasis. J Clin Microbiol.
1997; 35(10): 2454–2457.
37. Lachaud L, Chabbert E, Dubessay P, Reynes J,
Lamothe J, Bastein P. Comparison of various sample
preparation methods of PCR diagnosis of visceral
leishmaniasis using peripheral blood. J Clin Microbiol.
2001; 39(2): 613–617.
38. Fakhar M, Motazedian MH, Asgari Q, kalantari M,
Hatam GR, Akbarpoor MA, et al. Efficacy of PCR for
early diagnosis and detection of asymptomatic cases of
visceral leishmaniasis in human and dog. J Jahrom Univ
Med Sci. 2010; 8(2): 1-7. [In Persian]
39. Martin Sanchez J, Lopez-Lopez MC, Acedo-Sanchez
C, Castro- Fajardo JJ, Pineda JA, Morillas-Marquez F.
Diagnosis of infection with Leishmania infantum using
PCR-ELISA. Parasitology. 2001; 122: 607–615.
40. Wortmann G, Sweeney C, Houng HS, Aronson N,
Stiteler J, Jackson J, et al. Rapid diagnosis of
leishmaniasis by fluorogenic polymerase chain reaction.
Am J Trop Med Hyg. 2001; 65(5): 583–587.
41. Mohebali M, Edrissian GH, Shirzadi MR, Akhoundi
B, Hajjaran H, Zarei Z, et al. An observational study on
the current distribution of visceral leishmaniasis in
different geographical zones of Iran and implication to
health policy. Travel Med Infect Dis. 2011; 9(2): 67-74.
. . .‫هزٍری بز رٍش ّبی تشخیص‬ /54
41. De Colmenares M, Portus M, Riera C, Gallego M,
Aisa MJ, Torras S, et al. Detection of 72–75 kD and 123
kD fractions of leishmania antigen in urine of patients
with visceral leishmaniasis. Am J Trop Med Hyg. 1995;
52(5):427–428.
42. Fakhar M, Motazedian MH, Daly D, Lowe C, Noyes
HA. An integrated pipeline for the development of novel
panels of mapped microsatellite markers for Leishmania
donovani complex, Leishmania braziliensis and
Leishmania major. Parasitol. 2008; 135(5): 567-74.
43. Takagi H, Itoh M, Islam MZ, Razzaque A, Ekram
AR, Hashighuchi Y, et al. Sensitive, Specific, and Rapid
Detection of Leishmania donovani DNA by Loop-
Mediated Isothermal Amplification. Am J Trop Med
Hyg. 2009; 81(4): 578–582.
44. Hatam GR, Riyad M, Bichichi M, Hejazi SH,
Guessous-Idrissi N, Ardehali S. Isoenzyme
characterization of Iranian Leishmania isolates from
cutaneons Leishmaniasis. Iranian J Sci Trans. 2005;
29(A1): 65-70.
45. Fakhar M, Mikaeili F, Motazedian MH, Hatam GR,
Motazedian MH, Habibi P, et al. Application of superior
enzymatic systems for characterization of causative
agents of visceral leishmaniasis (kala-azar) using
Isoenzyme electrophoresis in Iran. J Mazandaran Univ
Med Sci. 2009; 19(70): 41-48.[In Persian]
46. Rosenthal E, Marty P, Poizot-Martin I, Reynes J,
Pratlong F, Lafeuillade A, et al. Visceral leishmaniasis
and HIV co-infection in Southern France. Trans R Soc
Trop Med Hyg. 1995; 89(2): 159–162.
47. Motazedian M, Fakhar M, Motazedian MH, Hatam
G, Mikaeili F. A urine-based polymerase chain reaction
method for the diagnosis of visceral leishmaniasis in
immunocompetent patients.Diagn Microbiol Infect Dis.
2008; 60(2): 151-154.
48. Fakhar M, Motazedian MH, Hatam GR, Asgari Q,
Kalantari M, Mohebali M. Asymptomatic human carriers
of Leishmania infantum: possible reservoirs for
Mediterranean visceral leishmaniasis in southern Iran.
Ann Trop Med Parasitol. 2008; 102(7): 577-83.
49. Geramizadeh B, Fakhar M, Motazedian MH. Visceral
leishmaniasis with duodenal involvement: three
immunocompetent cases from Southern Iran. Ann Trop
Med Parasitol. 2006; 100(7): 637-40.
50. Fakhar M, Asgari Q, Motazedian MH, Monabati A.
Mediterranean Visceral Leishmaniasis Associated with
Acute Lymphoblastic Leukaemia (ALL). Parasitol Res.
2008; 103(2): 473-5.
51.Fakhar M, Motazedian M H, Hatam Gh R, Asgari Q,
Monabati A , Keighobadi M. Comparative performance
of DAT, IFAT, PCR and bone marrow aspiration
methods for diagnosis of Mediterranean visceral
leishmaniasis (MVL). African J Microbiol Res. 2012;
6(28): 5777-5781.
52.Fakhar M, Motazedian M H, Asgari Q, Kalantari M.
Asymptomatic domestic dogs are carriers of Leishmania
infantum: possible reservoirs host for human visceral
leishmaniasis in southern Iran. Comp Clin Pathol. 2012;
21(5): 801–807.
92 ‫) بْبر‬1ُ‫دٍرُ ّفتن(شوبر‬،‫هجلِ علَم آسهبیشگبّی‬