Primeira aula

• Apresentação da Disciplina

• Características do sangue

• Coleta de sangue

• Extensão sanguínea e coloração

• Hemograma

Profa Elvira Shinohara

 Características do sangue
• Tecido líquido e renovável
• Plasma

Células sanguíneas
• Eritrócitos
• Leucócitos
• Plaquetas

Tipos de leucócitos
• Neutrófilos
• Eosinófilos
• Basófilos
• Linfócitos
• Monócitos
 Função do sangue

• Transporte (O2, CO2, nutrientes, metabólitos, etc)

• Defesa (fagocitose)
• Homeostase (temperatura, controle eletrolítico, etc)
 Células sanguíneas

• Eritrócitos ou Hemácias ou Glóbulos vermelhos

• Leucócitos
Neutrófilos
Eosinofilos

integral 2012
Disciplina de Fisiologia do
Sistema Hematopoético,
Granulócitos

Basófilos
Linfocitos
Monócitos Agranulócitos

• Plaquetas
Como visualizamos estas células?

• Extensão sanguínea
• Coloração da extensão sanguínea
Células sanguíneas
 Células sanguíneas
Hemácias

Eosinófilo Neutrófilo Segmentado Linfócito

Plaquetas
 Células sanguíneas

Monócito Linfócito

Hemácias
Plaquetas
 Células sanguíneas

Basófilos

Fonte: Hoffbrand & Pettit, 1991

Células sanguíneas
Células sanguíneas
 Volume sanguíneo nas mulheres

Volume de sangue nas mulheres 61,9 mL/kg

Exemplo:
Mulher de 55 kg (peso corpóreo)

Logo:
• Volume de sangue 3.404 mL
• O volume total de eritrócitos corresponde a 24,8 ml/kg de peso, ou
1.362 mL
(usou o Ht=40% para este cálculo)
 Volume sanguíneo nos homens

Volume de sangue nos homens = 62,4 mL/kg

Exemplo:
Homem de 75 kg (peso corpóreo)

Logo:
• Volume de sangue 4.680 mL
• O volume total de eritrócitos corresponde a 28,1 ml/kg de peso,
ou 2.106 mL
(usou o Ht=45% para este cálculo)
Coleta do sangue
Locais de coleta de sangue
Punção venosa
 Tubos à vacuo para coleta

A cor da tampa indica qual anticoagulante está sendo utilizado

Cor roxa = EDTA
Cor cinza = fluoreto de sódio
Cor azul = citrato de sódio
Cor verde = heparina
Cor vermelha/marrom = sem anticoagulante
 Anticoagulantes utilizados em hematologia

EDTA
• K3EDTA e K2EDTA são os anticoagulantes mais adequados para a
rotina hematológica (hemograma)
• EDTA quela o cálcio do sangue

• É utilizado na seguinte proporção: 10 µL de anticoagulante/1mL de

sangue.

Vantagens:
• não altera a morfologia das células (desde que a proporção
anticoagulante/sangue seja mantida)

• não dilui o sangue e impede a agregação plaquetária

 Anticoagulantes utilizados em hematologia

CITRATO DE SÓDIO
• É o anticoagulante de escolha para os testes de coagulação e prova
de agregação plaquetária.
O citrato de sódio reage com o cálcio formando um composto
insolúvel.

• É utilizado na seguinte proporção:

1 mL de anticoagulante/ 9 mL de sangue.
ou
0,5 mL de anticoagulante/ 4,5 mL de sangue

• Desvantagem: altera a morfologia das células e dilui o sangue (uma

parte de anticoagulante para 9 partes de sangue).
 Anticoagulantes utilizados em hematologia

HEPARINA
• A heparina age pela formação de um complexo com a
antitrombina III plasmática, que inibe a trombina e outros
estágios dos fatores de coagulação

Vantagens
• não altera a morfologia das células e não dilui o sangue

• Desvantagem: o preço do anticoagulante é maior do que o EDTA

 EXTENSÃO SANGUÍNEA
análise da morfologia é essencial para o diagnóstico
Plasma

Células sanguíneas
Células sanguíneas
Extensão Sanguínea
COLORAÇÃO SANGUÍNEA
Corantes do Tipo Romanovsky

• São misturas que contem eosina e azul de metileno

dissolvidos em metanol

• Na solução envelhecida (após dias do preparo do

corante), o azul de metileno se oxida em gradações
diferentes, originando os azures de metileno
Coloração do tipo Romanowsky

• O corante de Romanowsky (neutros) é uma solução

alcoólica de um complexo de eosinato de azul e azures
de metileno

• A diferença entre os vários corantes derivados do corante

primitivo de Romanowsky acha-se na proporção que se
emprega de azul-de-metileno e de eosina, ou no método
de tratamento do azul-de-metileno, antes de sua
combinação com a eosina
Princípio da coloração

• Os componentes Azures em sua forma de dímeros ligam-

se a moléculas aniônicas, exemplo os grupos fosfato do
DNA

• Os grupamentos ácidos dos ácidos nucleicos e proteínas

do núcleo celular e do citoplasma tem afinidade pelo
corante básico Azul- de -Metileno
Princípio da coloração

• A eosina na forma de monômero se liga aos sítios

catiônicos das proteínas

• A presença de grupamentos básicos na molécula de Hb

resulta na afinidade por corantes ácidos, corando-se
pela eosina
 Principio da coloração

CORANTE CÉLULA

Azul de Metileno cora Núcleo (DNA)

(básico) (ácido)

Eosina cora Hb
(ácido) (básico)
Nomenclatura usual

• Coloração Ortocromática: a célula cora-se com a mesma

cor do corante

• Coloração Metacromática: a célula toma uma cor

diferente daquela do corante
 Nomenclatura usual

• Estruturas celulares que se coram em pelo Azul de

Metileno são chamadas de basófilas (corando-se de azul)

• Estruturas celulares que se coram pela Eosina são

chamadas de acidófilas (corando-se em rosa)
 Tipos de corantes de Romanovsky

• May-Grunwald ou Jenner,
• Giemsa
• Leishman
• Wright
(Podem ser encontrados, no comércio, na forma de reagentes
ou em soluções já preparadas pelo fornecedor)
Células sanguíneas
 Contagem relativa dos leucócitos
• É realizada através da análise morfológica dos leucócitos, contando no
mínimo 100 leucócitos, diferenciando célula a célula.

Campo muito grosso Campo adequado Campo muito fino

 Contagem relativa dos leucócitos
• É realizada através da análise morfológica dos leucócitos, contando no
mínimo 100 leucócitos, diferenciando célula a célula.

Campo muito Campo adequado Campo muito fino

grosso
Campos de leitura na extensão sanguínea

Corpo da extensão sanguínea

Região grossa da extensão (cabeça)

Não deve ser feito contagem das células

nesta região da extensão sanguínea
 Região da cauda (muito fina)

Não deve ser feito contagem das células nesta região da extensão sanguínea
Campos que NÃO devem ser analisados na
extensão sanguínea

Região muito fina

Cauda da extensão

Região muito grossa

Cabeça da extensão sanguínea
 Contagem relativa dos leucócitos
• É realizada através da análise morfológica dos leucócitos, contando no
mínimo 100 leucócitos, diferenciando célula a célula.

A – Cerca de 25 células
B- Cerca de 50 células
 Contagem relativa dos leucócitos
As células não tem distribuição uniforme na extensão sanguínea

Cabeça Corpo Cauda

Os linfócitos predominam no meio da extensão

Neutrófilos e monócitos predominam nas margens e na cauda

Problemas na coloração

• Presença de precipitados do corante na extensão sanguínea

corada
• Uso de lâminas sujas com gordura
• Secagem durante o período de coloração
• Lavagem inadequada ao término da coloração
• Filtração inadequada dos corantes (vai aparecer os
precipitados de corante)
Precipitados de corante
Coloração inapropriada
HEMOGRAMA

Plasma

células
 HEMOGRAMA

 Exame hematológico mais solicitado

 Consiste na análise qualitativa e quantitativa das

células sanguíneas

 Fornece parâmetros para controle e auxílio no

diagnóstico das anemias, de vários processos
infecciosos e de alterações no número das plaquetas
 Hemograma

• Eritrograma (avalia série vermelha)

• Leucograma (avalia série branca)
• Contagem de plaquetas
 Exemplo de um laudo de hemograma

eritrograma

leucograma

Contagem de
plaquetas
Bibliografia recomendada

. Dacie & Lewis. Practical Haematology. 8a Edition. Churchill

Livingstone.

• Stiene-Martin EA, Lotspeich-Steininger, Koepke JA – Clinical

Hematology- Principles, Procedures, Correlations. Editora
Lippincott, 2edição, 1998.

• Lorenzi TF, D’Amico E, Daniel MM, Silveira PAA, Buccheri V –

Manual de Hematologia – Propedêutica e Clínica. Editora Medsi 3
edição, 2003.