CICLO CELULAR

El ciclo celular consiste en una secuencia de eventos

organizados en diferentes fases: G1 (G0), S, G2 y M

Debe ocurrir la duplicación

del ADN

Debe separarse el ADN

"original" de su "réplica“

Deben separarse las dos células

"hijas“ (Citocinesis) con lo que
finaliza la división celular.
G1: Intervalo 1 (en inglés gap 1). Etapa de alta transcripción de ARN y traducción de
proteínas. Incremento del tamaño celular. (ver ruta estimuladora)

G0: Etapa de arresto o quiescencia celular. (ver ruta inhibidora)

S: “Síntesis“ o replicación del ADN.

G2: Intervalo 2 (en inglés gap 2). Etapa de

traducción de proteínas principalmente
aquellas que intervienen en la mitosis (ej.
Microtúbulos).

M: “Mitosis” o división nuclear (los

cromosomas se separan) y división
citoplasmática (citocinesis).
 Fases de la Mitosis

En células que se dividen activamente:

la mitosis ocupa un 10% y la interfase el 90% del ciclo
Los períodos G1 y G2 ocupan cada uno un 25%, y el período S el 40%.
Los microtúbulos forman una estructura bipolar,
el huso mitótico,
esencial para distribuir el material genético
 Microscopía de Fluorescencia
Microtubúlos marcados con FITC (verde) y cromosomas con DAPI ( azul)
En las células animales existe un único centro organizador de MTs
El centrosoma

Inmunolocalización del centrosoma (en amarillo)

(MTOC = microtubule organizing complex)
Células en interfase
El centrosoma esta formado por un par de centríolos
embebidos en una matriz fibrosa
 Visualización de cromosomas de metafase
microscopía electrónica
de barrido

Inmunolocalización de cinetocoros (rojo)

centrómeros

cromosomas
PRIMEROS ESTUDIOS SOBRE

CICLO CELULAR
La fusión de células revela la presencia de factores difusibles en
las células mitóticas que inducen la condensación de los
cromosomas
La actividad de MPF oscila durante la maduración del oocito y
primeras divisiones del cigoto en Xenopus
Experimentos de transferencia de citoplasma revelan la existencia
de un factor que promueve la mitosis
(MPF: mitosis promoting factor)

mitosis

mitosis mitosis

G2-arrested
oocyte

Xenopus
 Premio Nobel de Medicina -2001
Leland Hartwell, Timothy Hunt y Paul Nurse
Descubrimiento de los “reguladores clave del ciclo celular”, identificando las
moléculas universales que regulan el ciclo celular en todos los organismos
eucariotas (levaduras unicelulares hasta humanos).

• L .Hartwell utilizó como organismo modelo la levadura del pan (Saccharomyces

cerevisiae)
Identifico alrededor de 100 genes involucrados en el control del ciclo celular (genes cdc).
Introdujo el concepto de checkpoint, comprobación que las células deben finalizar una
fase del ciclo celular antes de entrar en la siguiente.

• P. Nurse utilizó levadura de fisión Schizosaccharomyces pombe

Descubrió el gen cdc2 mostrando que constituye el núcleo central que controla la
progresión durante el ciclo celular.
1985 aisló el gen homólogo en humanos, cdk1

• Hunt descubrió (1985) las ciclinas, proteínas cuya cantidad oscila durante el ciclo
celular, debido principalmente a que son degradadas periódicamente en cada ciclo
celular.
PRINCIPIOS GENERALES

 unidireccionalidad
 irreversibilidad
El progreso unidireccional en ciclo celular es gobernado por
la actividad de kinasas dependientes de ciclinas (Cdks)

Las ciclinas cumplen dos funciones básicas:

1) activan las Cdks

2) confieren especificidad a las Cdks por sus sustratos
Distintos complejos Cdk-ciclina controlan el paso a través del
ciclo celular

•Se conocen seis cdk pero se ha

caracterizado la función de cuatro de
ellas (cdk 1, 2, 4 y 6).

•Se conocen 4 tipos de ciclinas (ciclinas

A, B, D y E). La cdk fosforila aa
específicos de algunas proteínas, pero
sólo si esta unida a una ciclina.

•Se conocen 6 distintas combinaciones

de cdk-ciclina que actúan en tiempos
específicos durante el ciclo.
La expresión de ciclinas B coincide con la actividad cíclica del MPF
visualización de proteínas en geles de poliacrilamida
Las ciclinas mitóticas poseen una secuencia (destruction box)
de reconocimiento para ubiquitin-ligasas.
Ubiquitinación y degradación en el proteasoma
Las ciclinas mitóticas son blanco de APC en anafase
degradación en el proteasoma
REGULADORES DEL CICLO CELULAR

Ciclina B

Cdc2 =Cdk1
(Cyclin dependent kinase 1)
Ser/Thr kinasa
 MITOSIS
El complejo ciclinaB/Cdc2
MPF (Cdc28/Clb5; Cdk1/CiclB)
fosforila láminas
induce depolimerización de los filamentos intermedios
induce desensamble de la malla nuclear

microscopía de barrido de malla de laminas

Empaquetamiento de la cromatina
en los cromosomas
fibra de
cromatina
de 30 nm

fibra de 11 nm
(hilera de
nucleosomas)

Enun cromosoma de metafase (~2 μm de largo)

la doble hebra del DNA (~1,5 cm de largo)
se empaqueta por un factor de ~10.000!
Proteínas de SMC (structural maintenance of chromosomes).
Condensinas y Cohesinas
Transición
Metafase-Anafase

Destrucción de las cohesinas

 Transición metafase  anafase
separación de las cromátides

metafase

anafase
Las cohesinas son degradadas por proteasas (separasas)
La activación de APC por MPF es esencial para la activación de las separas

Cinetocoro
bre Mad2 checkpoint!

degradacion
de cohesinas
 Separación de cromátides en anafase.
Activación de APC  degradación de securinas y de ciclinas mitóticas
cinetocoro
checkpoint! libre
inactivo Mad2
Cdc20
fosforilación

activo

(securinas)
activo
LA ACTIVIDAD DE CDKs ES REGULADA POR:

La unión con las ciclinas

Proteólisis
Fosforilación/defosforilación
Inhibidores (cki)
Transcripción
Control por proteólisis
Control de CDKs por fosforilación
Control de la actividad de los complejos Cdk-ciclina
por inhibidores (CKI)
Modelo de inhibición del complejo Cdk2-ciclina A por el CKI p27
 CITOCINESIS

División del citoplasma

Dos mecanismos aseguran que la citocinesis ocurra posterior a la mitosis:

1. La actividad de Cdk-ciclinas M inactivan proteínas involucradas en la citocinesis

2. La asociación de MTs antiparalelos en la región central del huso es requerida

para el ensamble del anillo contráctil
La citocinesis comienza durante la anafase
El primer cambio visible de la citocinesis en una célula
animal es la aparición de un surco en la superficie

Microscopía electrónica de barrido mostrando el surco de clivado en

la superficie de una célula huevo de anfibio
La estructura molecular que subyace el surco superficial
es un anillo contráctil de actina y miosina

filamentos
de actina
actina

miosina II

microtúbulos de
la zona intermedia
La citocinesis requiere de la asociación de microtúbulos antiparalelos en la zona media
del huso (en verde).
Dicha asociación es realizada por kinesinas específicas, tales como ZEN-4.

SEM
Dos células a punto de finalizar la
APC
citocinesis

Cdk-M –I ZEN-4  Cdc14

TEM
ZEN-4 es fosforilada por Cdk-ciclinas M, inhibiendo su
unión a los MTs.

Durante la anafase, la inactivación de las Cdks y ademas

la actividad de la fosfatasa Cdc14 permiten la
defosforilación de ZEN-4
Por lo tanto, se produce la asociación de los MTs de la MTs de la
zona media
zona media
Panorama de eventos moleculares que regulan
el ciclo celular

Las flechas violetas indican el

período de expresión de las
correspondientes ciclinas
 Antigrowth signals
Retinoblastoma protein.

pRb classified as a tumor

suppressor protein.

Discovered in 1971 in a
rare eye cancer

Walter Kolch, Ashwin Kotwaliwale, Keith Vass and Petra Janosch

• The cell cycle is driven by the co-ordinated activation of the cyclin-dependent
kinases (CDKs)
• CDKs are expressed throughout the cycle
• Cyclins – oscillate between rapid synthesis and degradation
• The interface between mitogens and the cell cycle is cyclinD and cyclinE
• CyclinD- and cyclinE- expression. is induced by mitogens
• pRb ( Retinoblastoma protein , tumour suppressor protein)
• pRb is a principal checkpoint controlling the progression from G1 to S phase
• CyclinD- and cyclinE- dependent kinases phosphorylate (P) and thereby
disable pRB
• Inactivated Rb releases E2F transcription factors, which stimulate the
expression of downstream cyclins and other genes that are required for DNA
synthesis
 Elucidating the role of effector proteins in G1 to S phase progression

Key step in the eukaryotic cell cycle is the G1

to S phase transition and this step is tightly
coupled to the transcriptional control of
genes involved in growth and DNA
replication.

In mammalian cells, the E2F family of

transcription factors primarily controls this
temporal gene expression regulation.

E2F activation of S phase promoters via association with HCF-1 and the MLL
family of histone H3K4 methyltransferases. Molecular Cell. 27(1): 107-19, 2007
 Dinámica de cromosomas

Rol de condensinas y cohesinas

metafase

Anafase

SARs o
MARs
SARs/MARs: scaffold/matrix-attachment regions.
Regiones en el DNA a las cuales se unen
los complejos de condensinas/cohesinas