Sei sulla pagina 1di 7

ESPECTROFOTOMETRIA

CARATULA:
OBJETIVOS:

 Conocer el funcionamiento del espectrofotómetro.


 Conocer el manejo de la espectrofotometría.
 Conocer la diferencia entre un fotocolorímetro y un espectrofotómetro.
 Graficar el espectro de luz.
 Indagar la relación matemática entre la absorbancia y tramitación.

MARCO TEORICO:

La espectrofotometría es una técnica analítica que nos ayuda a determinar la concentración de un


compuesto en una solución, esta se basa en la cantidad de radiaciones electromagnéticas que
absorben las moléculas y a su vez la cantidad de luz absorbida depende de la forma lineal de la
concentración. Para tomar estas medidas se utiliza un espectrofotómetro (fig. 1), en el cual se
puede seleccionar la luz de onda que pasa por una solución y la cantidad de luz absorbida por la
misma.
La espectrofotometría se refiere a la medida de cantidades relativas de luz absorbida por una
muestra, en función de la longitud de onda. Cada componente de la solución tiene su patrón de
absorción de luz característico comparando la longitud de onda y la intensidad del máximo de
absorción de luz de una muestra versus soluciones estándar, es posible determinar la identidad y la
concentración de componente disueltos en la muestra (solución incógnita).
Los métodos espectrofotométricos se basan en la medida de la radiación electromagnética emitida
o absorbida por la materia; los métodos de emisión utilizan la radiación emitida cuando un analito
es excitado por energía térmica, eléctrica o radiante; los métodos de absorción están basados en la
disminución de la potencia de la radiación electromagnética como consecuencia de la absorción
que se produce en su interacción con el análisis. Si se aplica energía a un átomo, esta puede ser
absorbida y un electrón externo puede ser promovido a una configuración conocida como estado
excitado; dado que ese estado es inestable, el átomo retornara inmediatamente al estado
fundamental, emitiendo energía. La absorción de las radiaciones ultravioletas, visibles e infrarrojas
depende de la estructura de las moléculas, y es característica para cada sustancia química. Por lo
tanto, se dice que la espectrofotometría es fundamental en el estudio de sustancias desconocidas.
Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energía es absorbida. El color de las sustancias se
debe a que estas absorben ciertas longitudes de onda de luz blanca que incide sobre ellas y solo
dejan pasan a nuestros ojos aquellas longitudes de onda no absorbidas.
Ley de Bourguer-Lambert- Beer: Bourguer, Lambert y Beer, a través de sus observaciones
establecieron relaciones dela variación de la intensidad de luz transmitida por una muestra con el
espesor de ella o con la concentración de la sustancia, para materiales translúcidos. Estas
relaciones se conocen como la ley de Bourguer-Lambert-Beer o ley general de la
espectrofotometría que permite hallar la concentración de una especie química a partir de la
medida dela intensidad de luz absorbida por la muestra.
Esta ley se puede expresar en términos de potencia de luz o de intensidad de luz, asumiendo luz
monocromática, como:
It/ I0= 10-e bc
Donde:
It, es la intensidad de la luz transmitida por la muestra.
I0, es la intensidad de la luz que incide sobre la muestra y que proviene de la fuente.
e, es el coeficiente de absortividad molar en unidades de M-3. Cm-
b, es la longitud de la trayectoria del haz de luz a través de la muestra o el espesor de la celda en
cm o lo que se conoce como paso óptico.
DESARROLLO EXPERIMENTAL:

1.- Preparar la siguiente batería de tubos:

TUBO I TUBO II TUBO III TUVO IV TUBO X


BICROMATO DE 0.8 ml 1 ml 1.3 ml 1.5 ml …………
POTASIO
AGUA DESTILADA 9.2 ml 9 ml 8.7 ml 8.5ml 9 ml
CONCENTRACIO ………… ………… ………… ………… …………
N (MG %)
MUESTRA X ………… ………… ………… ………… 1 ml

Solución stock: Bicromato de Potasio 80 mg%. Calcular la concentración en mg% de bicromato de K


en cada uno de los tubos Standard (I-II-II-IV). Leer las absorbancia de los cuatro tubos a 350 nm de
longitud de onda ( ) ‫ ג‬en el espectrofotómetro contra el H2O destilada (Abs. H2O=0).

2. Con los datos obtenidos construir en un papel milimetrado la gráfica de absorbancia en el eje de
las Ordenadas vs concentración de bicromato de K en el eje de las Abscisas.

3. Una vez obtenida la curva de calibración, medir la absorbancia de la muestra problema


(Problema X).

4. Obtener el factor de calibración (Fc) promedio con las soluciones standard y sus Absorbancia
utilizadas para construir las curvas de calibración ajustadas.

5. Calcular la concentración de la muestra problema por los siguientes métodos:

A. Gráficamente extrapolando su absorbancia en la curva de calibración.


B. Usando Factor de Calibración, multiplicando su absorbancia por el factor de calibración del
standard.
DISCUSION DE LOS RESULTADOS:
CONCLUSIONES:

Se ha llegado a la conclusión de que la espectrofotometría es un método analítico indirecto porque


se basa en la medición de la absorbancia o transmitancia de las radiaciones; es de gran utilidad en
la actualidad para la identificación de un analito en una muestra problema. La
espectrofotometría es el método más usado, debido a que es sencillo, específico y sensible.

CUESTIONARIO:

1.- Explique el mecanismo de funcionamiento de un espectrofotòmetro.

Un espectrofotómetro es un instrumento usado en el análisis químico que sirve para medir, en


función de la longitud de onda, la relación entre valores de una misma magnitud fotométrica
relativos a dos haces de radiaciones y la concentración o reacciones químicas que se miden en una
muestra. También es utilizado en los laboratorios de química para la cuantificación de sustancias y
microorganismos. Hay varios tipos de espectrofotómetros, puede ser de absorción atómica o
espectrofotómetro de masa y visuales. Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de
luz monocromática a través de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha
muestra. Esto le permite al operador realizar dos funciones: 1. Dar información sobre la naturaleza
de la sustancia en la muestra 2. Indicar indirectamente qué cantidad de la sustancia que nos
interesa está presente en la muestra Componentes de un espectrofotómetro Cubetas de
espectofotometría. En un primer plano, dos de cuarzo aptas para el trabajo con luz ultravioleta; en
segundo plano, de plástico, para colorimetría (es decir, empleando luz visible)

Fuente de luz La fuente de luz que ilumina la muestra debe cumplir con las siguientes condiciones:
estabilidad, direccionabilidad, distribución de energía espectral continua y larga vida. Las fuentes
empleadas son: lámpara de wolframio (también llamado tungsteno), lámpara de arco de xenón y
lámpara de deuterio que es utilizada en los laboratorios atómicos. Monocromador El
monocromador aísla las radiaciones de longitud de onda deseada que inciden o se reflejan desde
el conjunto, se usa para obtener luz monocromática. Está constituido por las rendijas de entrada y
salida, colimadores y el elemento de dispersión. El colimador se ubica entre la rendija de entrada y
salida. Es un lente que lleva el haz de luz que entra con una determinada longitud de onda hacia un
prisma el cual separa todas las longitudes de onda de ese haz y la longitud deseada se dirige hacia
otra lente que direcciona ese haz hacia la rendija de salida. Compartimiento de Muestra Es donde
tiene lugar la interacción, R.E.M con la materia (debe producirse donde no haya absorción ni
dispersión de las longitudes de onda). Es importante destacar, que durante este proceso, se aplica
la ley de Lambert-Beer en su máxima expresión, con base en sus leyes de absorción, en lo que
concierne al paso de la molécula de fundamental-excitado. Detector El detector, es quien detecta
una radiación y a su vez lo deja en evidencia, para posterior estudio. Hay de dos tipos: a) Los que
responden a fotones; b) Los que responden al calor. Fotodetectores En los instrumentos modernos
se encuentra una serie de 16 fotodetectores para percibir la señal en forma simultánea en 16
longitudes de onda, cubriendo el espectro visible. Esto reduce el tiempo de medida, y minimiza las
partes móviles del equipo.
2.- ¿Qué diferencias existen entre un fotocolorìmetro y un espectrofotòmetro?

Los espectrofotómetros son espectrómetros que permiten medir la relación entre la energía
radiante de dos rayos, lo cual es necesario para medir la absorbancia. Los fotocolorímetros
emplean filtro para seleccionar las longitudes de onda en combinación con un transductor de
radiación adecuado, a diferencia de los espectrofotómetros en los que la longitud de onda se
puede modificar continuamente, por lo que es posible registrar espectros de absorción. Otra
diferencia radica en que la mayoría de los modelos de espectrofotómetros pueden cubrir la región
UV/visible y a veces la infrarroja cercana, mientras los foto colorímetros se emplean más
comúnmente en la región visible.

3.- Grafique el espectro de luz, tanto en el rango visible como no visible con sus respectivas
longitudes de ondas.

4.- ¿Qué relación matemática existe entre Absorbancia y Tramitancia?

El logaritmo.

Abs = -log T = -log (It/Io)

donde Abs es absorbancia, T es transmitancia, I es intensidad transmitida (la intensidad de la luz


luego de atravesar la muestra) y Io es intensidad incidente (la intensidad de luz antes de atravesar
la muestra).
5.- Construya una curva de calibración con los siguientes valores:

BIBLIOGRAFIA: