See discussions, stats, and author profiles for this publication at: https://www.researchgate.

net/publication/323845582

Kerusakan Sel β Pankreas Akibat Induksi Streptozotocin: Tinjauan Patologi

Eksperimental

Article · March 2018

CITATIONS READS

0 1,593

1 author:

Dody Novrial
Universitas Jenderal Soedirman
6 PUBLICATIONS   1 CITATION   

SEE PROFILE

Some of the authors of this publication are also working on these related projects:

The effects of cigarette smoke nanoparticles in the colorectal carcinogenesis of wistar rats View project

All content following this page was uploaded by Dody Novrial on 19 March 2018.

The user has requested enhancement of the downloaded file.

Mandala of Health. Vol 3 (2) Mei 2007 Kerusakan Sel β Pankreas

Kerusakan Sel β Pankreas Akibat Induksi Streptozotocin:

Tinjauan Patologi Eksperimental

Dody Novrial1

1
Fakultas Kedoteran dan Ilmu-Ilmu Kesehatan Universitas Jenderal Soedirman

ABSTRACT

Streptozotocin is widely used to induce experimental diabetes in animals. The mechanism of its action
in β cells of the pancreas has been intensively investigated and now is quite well understood. The cytotoxic action
of this diabetogenic agent is mediated by reactive oxygen species. Streptozotocin enters the β cell via a glucose
transporter (GLUT2) and causes alkylation of DNA. DNA damage induces activation of poly ADP-ribosylation,
a process that is more important for the diabetogenicity of streptozotocin than DNA damage itself. Poly ADP-
ribosylation leads to depletion of cellular NAD+ and ATP. Enhanced ATP dephosphorylation after
streptozotocin treatment supplies a substrate for xanthine oxidase resulting in the formation of superoxide
radicals. Consequently, hydrogen peroxide and hydroxyl radicals are also generated. Furthermore,
streptozotocin liberates toxic amounts of nitric oxide that inhibits aconitase activity and participates in DNA
damage. As a result of the streptozotocin action, β cells undergo the destruction by necrosis. Histologic pattern
show severe insulitis or end stage islets. Insulin immunohistochemistry shows weak or negative expression.

Keywords: Streptozotocin, pancreas β cells, diabetes

PENDAHULUAN SEL β PANKREAS

Induksi tikus menggunakan bahan- Pankreas merupakan organ campuran
bahan kimia sudah cukup luas dipraktekkan eksokrin dan endokrin. Pankreas eksokrin
pada penelitain eksperimental diabetes. Cara ini merupakan bagian yang terdiri dari asinus dan
dinilai berhasil menyebabkan kerusakan pada ductus dalam susunan lobuler, yang terakhir
pankreas dengan tehnik yang sederhana dan menyatu untuk membentuk duktus pankreatikus
relative lebih murah dibandingkan bila dan asesorius yang mengalirkan sekresi
menggunak tikus model diabetes. Salah satu eksokrin ke duodenum. Kelenjar eksokrin
bahan kimia yang banyak digunakan untuk mengandung banyak granula zymogen yang
induksi diabetes adalah streptozotocin. memproduksi tripsin, lipase, fosfolipase,
Pemahaman tentang perubahan-perubahan yang amilase dan elastase, yang diaktifkan di dalam
terjadi pada sel β pankreas setelah pemberian duodenum (Underwood JC, 2000).
streptozotocin sangatlah penting bila ingin Pankreas bagian endokrin terdiri atas
memanfaatkannya sebagai agen diabetogenik. jaringan pulau Langerhans yang terpisah dalam
kelompok sel-sel relatif kecil yang tersebar

46
Mandala of Health. Vol 3 (2) Mei 2007
merata, berjumlah kurang lebih 1 juta sel,
sekitar 1-2% dari volume kelenjar. Tiap pulau
terdiri atas sel-sel poligonal atau bulat yang
tersusun dalam genjel-genjel yang dipisahkan
oleh jala-jala kapiler darah yang menyerupai
sinusoid. Kapsula halus dari serabut-serabut
retikuler mengelilingi tiap pulau,
memisahkannya dari jaringan pancreas lainnya.
Di dalam pankreas terdapat 4 jenis sel
utama, yaitu: sel β (penghasil insulin),
merupakan sel dengan populasi terbanyak,
sekitar 68% dan cenderung terpusat pada bagian
tengah pulau. Sel α (penghasil glucagon) sekitar
20%, biasanya ditemukan di daerah perifer, sel
δ (penghasil somatostatin) sekitar 10%, dan 2%
sisanya merupakan sel penghasil polipeptida
pancreas (sel PP) (Maitra A et al, 2005; Hrubah
RH et al, 2005).
Neogenesis sel β pankreas berupa
proliferasi dan differensiasi dari sel-sel
progenitor menentukan jumlah sel β pada saat
kelahiran. Beberapa saat setelah lahir,
neogenesis sel β berhenti dan hanya sejumlah
kecil siklus sel β yang masih dapt terus
berkembang bila dibutuhkan sebagai
mekanisme kompensasi terhadap peningkatan
kebutuhan akan insulin. Seiring bertambahnya
usia, jumlah sel β pankreas per kilogram berat
badan menurun secara signifikan pada tikus.
Kapasitas replikasi yang rendah pada usia
dewasa menyebabkan terbatasnya kemampuan
regenerasi sel β apabila terjadi cidera jaringan
yang ekstensif. Namun hasil-hasil penelitian
terkini membuktikan adanya kemungkinan
Kerusakan Sel β Pankreas
mekanisme regenerasi sel β pankreas dengan
pemberian stimulus-stimulus eksternal berupa
preparat hormonal, growth factor, dan lainnya
(Wang RN et al, 1996; Bouwens L et al, 2005).
Kematian sel β pankreas yang tidak
diikuti mitogenesis yang memadai merupakan
penyebab utama insufisiensi insulin pada
penderita diabetes. Apoptosis sangat
dimungkinkan sebagai bentuk utama kematian
sel β pankreas baik pada DM tipe 1 maupuun
DM tipe 2. Mekanisme kematian sel ini
melibatkan IL-1 β, nuclear factor (NF)-κB, dan
Fas. Respon imun pada insulitis DM tipe 1
menyebabkan dilepaskannya sitokin-sitokin
seperti IL-1 β, TNF-α, dan IFN-γ. Ketiganya
menginduksi apoptosis sel β melalui aktivasi
jejaring gen sel β dibawah kontrol faktor-faktor
transkripsi NF-κB dan STAT-1. Aktivasi NF-
κB memicu produksi nitric oxide (NO),
chemokine dan deplesi Ca2+ pada reticulum
endoplasma. Eksekusi kematian sel β terjadi
melalui aktivasi mitogen activated protein
kinases (MAPK) yang memicu stress reticulum
endoplasma dan pelepasan sinyal apoptosis oleh
mitokondria (Maedler K et al, 2001).
Pada DM tipe 2, mekanisme apoptosis
sel β belum diketahui secara pasti. Cnop M et
al, 2005 menyatakan diet tinggi glukosa dan
lemak bebas dapat menyebabkan apoptosis sel β
melalui stress reticulum endoplasma tanpa
melibatkan jalur NO dan NF-κB. Johnson DJ et
al, 2004 membuktikan bahwa ryanodine
receptor 2 (RyR2), suatu Ca2+ channel pada sel
β berperan penting dalam pengaturan
47
Mandala of Health. Vol 3 (2) Mei 2007
keberadaan sel β sebagai mediator aktivitas
calpain-10, yang diketahui sebagi gen pemicu
diabetes tipe 2. Diet asam lemak palmitate,
menginduksi apoptosis sel β melalui jalur
calpain-10 in vitro, demikian juga dengan
keadaan hipoglikemik yang lama. Namun
sebaliknya, diet tinggi glukosa atau keadaan
hiperglikemik yang lama, tidak berpengaruh
terhadap aktivitas calpain-10, sehingga
dimungkinka adanya mekanisme lain yang
menyebabkan apoptosis sel β pada keadaan
hiperglikemik.
MEKANISME KERJA STREPTOZOTOCIN
Streptozotocin (STZ,2-deoxy-2-(3-
(methyl-3-nitrosoureido)-D-glucopyranose)
merupakan senyawa kimia yang disintesis dari
Streptomycetes achromogenes dan digunakan
untuk menginduksi baik diabetes mellitus ttipe
1 maupun tipe 2. Streptozotocin memasuki sel
β melalui transporter glukosa (GLUT 2) dan
menyebabkan alkilasi DNA. Kerusakan DNA
menginduksi aktivasi poly ADP-rybosylation,
yang menyebabkan deplesi NAD+ dan ATP
seluler. Peningkatan defosforilasi ATP setelah
induksi strepozotocin menghasilkan substrat
bagi reaksi katalisis xantin oksidase yang
menghasilan radikal superoksid. Akibatnya
hidrogen peroksida dan radikal hidroksil juga
terbentuk. Selanjutnya, streptozotocin
membebaskan banyak zat toksik dari nitric
oksid yang menghambat aktivitas aconitase dan
berperan pada kerusakan DNA, yang pada
Kerusakan Sel β Pankreas
akhirnya terjadi apoptosis dan nekrosis sel β
(Szkuldeski T, 2001).
Itoh N et al, 1993 membuktikan adanya
infiltrasi sel-sel mononuklear ke dalam pulau
Langerhans (insulitis) pada gambaran histologi
pankreas pasien diabetes mellitus bergantung
insulin, dimana infiltrate radang terutama terdiri
dari sel T. Sel T pada awalnya menyebabkan
sedikit kerusakan pada sel β pankreas, yang
selanjutnya menginisiasi terjadinya proses
radang dengan atau tanpa sekresi sitokin untuk
mengaktifkan sel T lainnya, dan menyebabkan
kerusakan total sel β untuk kemudian
menyebabkan diabetes (Itoh N et al, 1997;
Visser J et al, 2003).
Insulitis berupa infiltrasi limfosit pada
pulau Langerhans pernah dilaporkan terjadi
pada anak-anak yang meninggal mendadak
setelah didiagnosis menderita juvenile onset
diabetes. Meskipun etiologi pasti dari temuan
patologik ini tidak diketahui secara pasti, namun
secara umum insulitis dapat disebabkan oleh
efek toksik langsung terhadap sel β pankreas
oleh zat kimia tertentu terutama streptozotocin,
reaksi autoimun terhadapa sel β pankreas dan
infeksi virus (Rossini et al, 1977).
Efek diabetogenik pada pemberian
streptozotocin multiple dengan dosis rendan (40
mg/kgbb selama 5 hari berturut-turut) diinisiasi
oleh reactive oxygen species (ROS) melalui
efek toksik langsung pada GLUT 2, kerja
sitokin TNF-α dan INF-γ akibat stimulasi sel T
dependent, serta aktivasi IKK-α dan NF-κB.
ROS dapat terbentuk pada pulau Langerhans in
48
Mandala of Health. Vol 3 (2) Mei 2007 Kerusakan Sel β Pankreas

vitro dengan induksi streptozotocin dan ex vivo nekrosis sel. Kerusakan sel pankreas dan
pada mencit jantan C57BL/6 yang diinduksi kondisi diabetes yang terjadi secara perlahan
streptozotocin dosis rendah multipel, tapi tidak dapat dicapai apabila streptozotocin diberikan
terjadi pada mencit betina. Streptozotocin secara bertahap pada dosis rendah. Kerusakan
merupakan antigen bagi sel T in vivo dan terjadi melalui kombinasi efek toksik
aktivasi sel T dapat dipicu oleh ROS streptozotocin langsung pada sel β pankreas,
(Klinkhammer C et al, 1998; Los M et al, 1995; dan cidera akibat reaksi imunologi (Bennet RA
Wang Z et al, 1998; Gille et al, 2002; Lgssiar A et al, 1981; Kolb-Bachoven V et al, 1988;
et al, 2004). Simon OR et al, 1992).
Sebagai respon terhadap streptozotocin,
Th-1 type cytokines dan sel-sel imun lainnya
menghasilkan ROS yang mengaktifkan NF-κB,
berikutnya menyebabkan aktivasi gen yang
terkait sitokin-sitokin pro inflamasi yang
diaktifkan dan mengaktifkan NF-κB. Regulasi
ini menjadikan respon inflamasi lokal diperkuat
dan dipertahankan. Aktivitas anti inflamasi
berkurang, dan berakhir dengan kerusakan sel β
pankreas. Reaksi inflamasi tersebut
menggambarkan peran penting NF-κB sebagai
regulator utama reaksi imunologi dan inflamasi
pada induksi streptozotocin multipel dosis
rendah (Schulze-Osthoff K et al, 1995; Lgssiar
A et al, 2004).
Derajat kerusakan sel β pankreas pada
hewan coba diabetes bergantung pada dosis
streptozotocin yang digunakan. Injeksi
streptozotocin dosis tingg 60 mg/kgbb
intraperitoneal terbukti menyebabkan
kerusakan sel β pankreas dan kondisi diabetes
yang persisten. Pemberian dosis tunggal
memicu kerusakan langsung pada sel β pankreas
Gambar 1. Patomekanisme kerusakan sel β pankreas
yang diakibatkan oleh terjadinya alkilasi DNA akibat induksi streptozotocin.
yang ekstensif, menyebabkan terjadinya
49
Mandala of Health. Vol 3 (2) Mei 2007
Rossini AA et al, 1977 melaporkan
gambaran histopatologik pankreas mencit yang
diinduksi streptozotocin multipel dosis rendah,
menunjukkan gambaran insulitis berupa distorsi
pulau Langerhans, disertai infiltrasi limfosit,
makrofag dan nekrosis sel β. Pada penelitian
menggunakan tikus Sprague-Dawley, kami
membuktikan induksi streptozotocin multipel
dosis rendah 40 mg/kgbb/hari selama lima hari
berturut-turut menyebabkan hiperglikemia pada
hari keenam atau sehari setelah induksi selesai
dilakukan. Pada hari keempat belas terjadi
kerusakan berat pada pankreas yang
menunjukkan gambaran histologi berupa
insulitis berat dan end stage islets, serta
kematian sel β pankreas pada pemeriksaan
imunohistokimia insulin (Novrial D et al, 2008).
Berdasarkan sekian banyak laporan penelitian
tentang penggunaan streptozotocin, dapat
disimpulkan bahwa agen diabetogenik ini
efektif untuk menginduksi hewan coba pada
penelitian eksperimental diabetes dengan
mekanisme sebagaimana yang diilustrasikan
pada Gambar 1.
DAFTAR PUSTAKA
Bennet RA, Pegg AE. 1981. Alkylation of DNA in rat
tissues following administration of
streptozotocin. Cancer Research; 41: 2786-90.
Bouwens L, Ilse R. 2005. Regulation of pancreatic beta-
cell mass. Physiol Rev; 85: 1255-70.
Cnop M, Nils W, Jean CJ, Anne J, Sigurd L, Decio LE.
2005. Mechamism of pancreatic β cell death in
type 1 and type 2 diabetes, many differences,
few similarities. Diabetes; 54: 97-107.
Gille L, Schott-Ohly P, Friesen N, Schulte-im-Walde S,
Udilova N, Nohl H, et al. 2002. Generation of
hydroxyl radicals mediated by streptozotocin in
pancreatic islets of mice in vitro. Pharmacol
Toxicol; 90: 317-26.
Kerusakan Sel β Pankreas
Hruban RH, Wilentz RE. 2005. The pancreas. In: Robbins
and Cotran Pathologic Basis of Disease. 7th ed:
Elsevier Inc; p. 939-41.
Itoh N, Hanafus T, Miyazaki A, Miyagawa J, Yamagata
K, Yamamoto M, et al. 1993. Mononuclear cell
infiltration and its relation to the expression of
major histocompatibility complex antigens and
adhesion molecules in pancreas biopsy
specimens from newly diagnosed insulin-
dependent diabetes mellitus patients. J Clin
Invest; 92: 2313-20.
Itoh N, Imagawa A, Hanafusa T, Waguri M, Yamamoto
K, Iwahashi H, et al. 1997. Requirement of Fas
for the development of autoimmnune diabetes in
non obese diabetic mice. J Exp Med; 186(4):
613-18.
Johnson JD, Zhiqiang H, Kenichi O, Honggang Y, Yang
Z, Hong W. 2004. RyRq and calpain-10
delineate a novel apoptosis pathway in
pancreatic islets. The J Biol Chem; 279)23):
24794-802.
Jorns A, Gunther A, Hedrich HJ, Wedekind D, Tiedge M,
Lenzen S. 2005. Immune cell infiltration,
cytokine expression, and β cell apoptosis during
the development of type 1 diabetes in the
spontaneuously diabetic LEW.1AR1/Ztm-iddm
rat. Diabetes; 54: 2041-52.
Klinkhammer C, Popowa P, Gleichmann H. 1983.
Specific immunity to streptozotocin: cellular
requirements for induction of
lymphoproliferation. Diabetes; 37: 74-80.
Kolb-Bachoven V, Epstein S, Kiesel U, Kolb H. 1998.
Low dose streptozotocin induced diabetes in
mice. Electron microscopy reveals single cell
insulitis before diabetes onset. Diabetes; 37:21-
7.
Lgssiar A, Hassan M, Schott-Ohly P, Friesen N, Nicoletti
F, Trepicchio WL, et al. 2004. Interleukin- 11
inhibits NFκB and AP-1 activation in islets and
prevents diabetes induced with sterptozotocin in
mice. Exp Biol Med; 229: 425-36.
Los M, Droge W, Stricker K, Baeurle PA, Schulze-
Osthoff K. 1995. Hydrogen peroxide as a potent
activator of T lymphocytes. Eur J Immunol; 25:
159-65.
Maedler K, Spinas GA, Lehmann R, Sergeev P, Weber
M, Fontana A, et al. 2001. Glucose induces beta
cell apoptosis via up regulation of the Fas
receptor in human islets. Diabetes; 50: 1683-90.
Maitra A, Abbas AK. 2005. The endocrine system. In:
Robbins and Cotran Pathologic Basis of Disease.
7th ed: Elsevier Inc; p. 1189-90.
Novrial D, Soebowo, Parno W. 2008. Pengaruh
pemberian ekstrak daun ketela rambat (Ipomoea
batatas L) terhadap gambaran histopatologik dan
ekspresi insulin pankreas tikus Sprague-Dawley
yang diinduksi streptozotocin. Tesis. Magister
Biomedik Universitas Diponegoro.
Rossini AA, Like AA, Chick WL, Appel MC, Cahill GF.
1977. Studies of streptozotocin-induced insulitis
50
Mandala of Health. Vol 3 (2) Mei 2007
and diabetes. Proc Natl Acad Sci; 74(6): 2485-
89.
Schulze-Osthoff K, Los M, Baeurle PA. 1995. Redox
signaling by transcription factors NF-kappa B
and AP-1 in lymphocytes. Biochem Pharmacol;
50: 735-41.
Simon OR, West ME. 1992. Unstable diabetic state
produced by a small dose of streptozotocin in
rats. West Indian Med J; 41: 146-49.
View publication stats
Kerusakan Sel β Pankreas
Szkuldeski T. 2001. The mechanism of alloxan and
streptozotocin action in B cells of the rat
pankreas. Physioal Res; 50: 536-46.
Underwood JC. 2000. General and systematic pathology.
2nd ed. Terjemahan Indonesia. Sarjadi, editor.
Patologi umum dan sistematik. Ed 2(2). EGC.
51