Universidad Tecnológica de San Juan Del Río

Ingeniería Química Farmacéutica.

Estabilidad de Medicamentos

PROTOCOLO PARA EL ESTUDIO DE ESTABILIDAD

ACELERADA Y A LARGO PLAZO
DEL JARABE FLOUTOSS
(CLORHIDRATO DE BROMHEXINA)

Que presenta:

Chávez Pérez Sonia

Reséndiz López Olga Lidia
Sánchez Hernández José Luis.

Grupo: IQF02SV-17

San Juan Del Río a 21 de Agosto 2018.

 Índice

1.- OBJETIVO

2.- RESPONSABILIDADES

3.- INFORMACIÓN GENERAL DEL PRODUCTO.

4.- FABRICANTE DEL PRINCIPIO ACTIVO

5.- FORMULA

6.- SISTEMA CONTENEDOR-CIERRE

7.- TIPO, TAMAÑO Y NUMERO DE LOTES

8.- CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO Y TIEMPOS DE MUESTREO

9.- PRUEBAS A EFECTUAR DURANTE EL ESTUDIO

10.- CONSIDERACIONES GENERALES

11.- METODOLOGIA ANALÍTICA

12.- ANÁLISIS Y PRESENTACIÓN DE DATOS

 1.- OBJETIVO:

1.1. Realizar el estudio de estabilidad acelerada y a largo plazo con tres lotes
piloto del producto jarabe (Clorhidrato de Bromhexina 0.160 g/100 mL) de acuerdo
a la Norma Oficial sobre Estabilidad de Medicamentos NOM-073-SSA1-2005.

2.- RESPONSABILIDADES:

2.1. Establecer los criterios del Estudio de Estabilidad,

2.2. Elaborar y revisar el Protocolo y Reporte del Estudio de Estabilidad.
2.3. Ejecutar el Presente Protocolo de Estudio de Estabilidad de acuerdo a lo
establecido en el mismo.
2.4. Documentar la información general en los Estudio de estabilidad.

3.- INFORMACIÓN GENERAL DEL PRODUCTO:

3.1. Nombre del producto: Jarabe.

3.2. Forma farmacéutica y concentración: Jarabe con (Clorhidrato de Bromhexina
0.160 g/100 mL)
3.3. Presentación: Frasco semi permeable

4.- FABRICANTE DEL PRINCIPIO ACTIVO:

4.1. Clorhidrato de Bromhexina

1.Clorhidrato de Bromhexina

Fórmula: C14H21Br2ClN2
Descripción: Polvo blanco cristalino. Presenta polimorfismo.
Clorhidrato de Bromhexina es un mucolítico y expectorante derivado sintéticamente de la
vasicina, sustancia activa proveniente de la planta Justicia Adhatoda.
Disuelve la mucosidad pegajosa acumulada en vías respiratorias, promueve la disminución
de la viscosidad de las secreciones bronquiales y activa la expectoración facilitando
la expulsión de flemas en casos de irritaciones menores de los bronquios y garganta,
como catarro y gripa.

5.- FORMULA:

Cantidad por cada 100 Ml

Clorhidrato de Bromhexina 0.160 g
Polivinilpirrolidona-90 2.000 g
Ácido Cítrico Anhidro 0.500 g
Azúcar Granulada 60.000 g
Sorbato de Potasio 0.100 g
Benzoato de Sodio 0.200 g
Propilenglicol 10.300 g
Sabor lima-limón 0.250 g
Sabor miel 0.300 g
Color Amarillo # 6 0.700 g
Color Amarillo # 10 1.000 g
Agua Purificada c.b.p. 100.000 g

6.- SISTEMA CONTENEDOR-CIERRE:

6.1. Envase primario: Frasco semipermeable

7.- TIPO, TAMAÑO Y NUMERO DE LOTES:

7.1. Para los estudios de estabilidad se seleccionarán lotes piloto fabricados

FECHA DE
N° DE LOTES TAMAÑO DEL LOTE
FABRICACIÓN
28-MAY-18 500.000 mL
L-001
28-MAY-18 500.000 mL
L-002
28-MAY-18 500.000 mL
L-003
 8.- CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO Y TIEMPOS DE
MUESTREO:8Las condiciones de almacenamiento, tiempo de muestreo y
análisis corresponderán a los indicados para los estudios de estabilidad
acelerada y a largo plazo.

Tiempo (Meses) Fisicoquímicos

Condiciones
Inicial 1 3 6 9 12 18 24
25 ± 2°C / 60 ± 5 % H.R. X X X X X X X
30 ± 2°C / 65 ± 5 % H.R. X X X X X X
40 ± 2°C / 70 ± 5 % H.R. X X X

Condiciones Tiempo (Meses) Microbiológicas

Inicial 1 3 6 9 12 18 24
25 ± 2°C / 60 ± 5 % H.R. X X X X X X X
30 ± 2°C / 65 ± 5 % H.R. X X X X X X
40 ± 2°C / 70 ± 5 % H.R. X X

9.- PRUEBAS A EFECTUAR DURANTE EL ESTUDIO:

9.1. De a cuerdo a la NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-073-SSA1-2005,
ESTABILIDAD DE FARMACOS Y MEDICAMENTOS

10.- CONSIDERACIONES GENERALES:

10.1. El estudio de estabilidad de un medicamento debe incluir las pruebas para las
características mencionadas a continuación en cada una de las formas
farmacéuticas. Cuando el medicamento no requiere de alguna de las pruebas
indicadas, se deberá sustentar técnicamente su eliminación.

PRUEBAS PARA LIQUIDOS

Pruebas Solución Solución, Emulsión Emulsión Suspensión Suspensión

oral, tópica oftálmica, oral y parenteral oral, tópica, y oftálmica y
y Nasal ótica y tópica nasal parenteral
parentera
Apariencia 2 2 2 2 2 2
Color 2 2 2 2 2 2
Olor 2 2 2 2 2 2
Claridad de la 2 2 NA NA NA NA
solución
pH 2 2 2 2 2 2
Ensayo 2 2 2 2 2 2
Contenido de 2 2 2 2 2 2
conservadores

(Inicio y final)
Límite microbiano 2 NA 2 NA 2 NA
(inicio y final)
Esterilidad NA 2 NA 2 NA 2

(inicial y final)
Pirógenos o NA 2 NA 2 NA 2
endotoxinas
bacterianas

(inicial y final)
Pérdida de peso 2 2 2 2 2 2
Resuspendibilidad NA NA NA NA 2 2
Volumen de NA NA NA NA 2 2
sedimentación

1 Cuando aplique.

2 Cuando el envase primario sea permeable o semipermeable.

3 Cuando sea de uso parenteral.

4 Sólo para medicamentos multidosis.

PRUEBAS Y PARAMETROS A DETERMINAR DEL JARABE

PRUEBA ESPECIFICACIÓN
Jarabe translucido color amarillo,
homogéneo sin grumos, con brillo
Descripción
y consistencia, con suave olor a
miel.
Identificación
 Clorhidrato de Bromhexina
pH 3.8 – 4.2
Viscosidad
Análisis Microbiológico
Máximo 200 UFC/g
Organismos Mesófilicos Aerobios
Recuento de Hongos
Máximo 20 UFC/g
filamentosos y levaduras
Staphylococcus aureus Ausencia
Pseudomonas
Ausencia
Aeuririnosa
Pérdida de peso No más del 5.0%

11.- METODOLOGIA ANALÍTICA:

Para le evaluación de las pruebas, se seguirán los métodos generales que se

encuentren descritos en la Farmacopea vigente.
Para la valoración de Clorhidrato de Bromhexina en jarabe se desarrollara y validara
la metodología por espectrofotometría de UV-Visible.

ESPECTROFOTOMETRÍA UV-VIS
REACTIVOS Y SOLUCIONES.

 Cloroformo
 Acetato Sódico
 Ácido Clorhídrico
  Hidróxido de Sodio
 Etanol
 Agua Deionizada
Colorantes región visible:
 Azul de Bromotimol

PREPARACIÓN DE SOLUCIONES.

SOLUCIÓN BUFFER pH 2.8

En un matraz de 250 mL preparar una solución con 50 mL de Acetato
de Sodio 1.0 M y 49.50 mL de Ácido Clorhídrico 1.0 M, aforar a volumen
con agua deionizada.

SOLUCIÓN DE AZUL DE BROMOTIMOL 0.025%

Disolver 250 mg de Azul de Bromotimol en 100 mL de etanol al 50 %,
filtrar si es necesario.
Tomar una alícuota de 10 mL y aforarla a 100 mL con agua deionizada.

SOLUCIÓN DE ACIDO CLORHÍDRICO AL 1 M

Tomar 1.82 ml de Ácido Clorhídrico, y aforar con agua deionizada en un
matraz volumétrico de 50mL.

SOLUCIÓN DE ACETATO SÓDICO AL 1 M

Pesar 4 g de Acetato de Sodio, y aforar con agua deionizada en un
matraz volumétrico de 50 mL.
NOTA: Es importante utilizar el equipo de protección personal adecuado
(bata de laboratorio, gafas de seguridad, guantes de nitrilo, zapatos de
seguridad), y trabajar bajo la campana de extracción.

PREPARACIÓN DEL BLANCO.

Transferir 5 mL de Agua Deionizada a un embudo de separación de 125

mL.
Adicionar 5 mL de Solución Buffer pH 2.8, añadir 5 mL de la Solución
de Azul de Bromotimol 0.025%, adicionar 10 mL de agua deionizada
Añadir 10 mL de Cloroformo y agitar durante 2 minutos.
Antes de dejar reposar el embudo de separación, abrir su válvula en
posición invertido para que se purguen los gases generados dentro del
embudo y quitar el tapón colocándolo sobrepuesto para evitar se
proyecte.
Dejar separar las capas durante 5 minutos.
Transferir la fase clorofórmica a un matraz volumétrico de 50 mL.
Pasando a través de un embudo de talle corto y un trozo pequeño de
algodón.
Enjuagar previamente con cloroformo el algodón y desechar este
cloroformo antes de pasar la muestra.
Adicionar 10 mL más de cloroformo al embudo de separación, agitar 5
minutos. Transferir el cloroformo al matraz de 50 mL.
Realizar una tercera extracción con otros 10 mL de cloroformo.
Enjuagar la punta del embudo con una pequeña porción de cloroformo
cada vez que se transfiera la muestra al matraz. Llevar a volumen el
matraz volumétrico de 50mL con cloroformo.

PREPARACIÓN DEL ESTÁNDAR.

En un matraz de 50 mL colocar 24 mg de Clorhidrato de Bromhexina, y
aforar con metanol a volumen.

Tomar una alícuota de 5mL y colocar en un matraz de 50 mL, aforar con

agua. Concentración final 48 µg/mL
Transferir una alícuota de 5 mL de la preparación estándar a un embudo
de separación de 125 mL.
Adicionar 5 mL de Solución Buffer pH 2.8, añadir 5 mL de la Solución
de Azul de Bromotimol 0.025%, adicionar 10 mL de agua deionizada
Añadir 10 mL de Cloroformo y agitar durante 2 minutos.
Antes de dejar reposar el embudo de separación, abrir su válvula en
posición invertido para que se purguen los gases generados dentro del
embudo y quitar el tapón colocándolo sobrepuesto para evitar se
proyecte.
Dejar separar las capas durante 5 minutos.
Transferir la fase clorofórmica a un matraz volumétrico de 50 mL.
Pasando a través de un embudo de talle corto y un trozo pequeño de
algodón.
Enjuagar previamente con cloroformo el algodón y desechar este
cloroformo antes de pasar la muestra.
Adicionar 10 mL más de cloroformo al embudo de separación, agitar 5
minutos. Transferir el cloroformo al matraz de 50 mL.
Realizar una tercera extracción con otros 10 mL de cloroformo.
Enjuagar la punta del embudo con una pequeña porción de cloroformo
cada vez que se transfiera la muestra al matraz.
Llevar a volumen el matraz volumétrico de 50mL con cloroformo.
Concentración final 4.8 µg/mL

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA.
Tomar 15 mL del jarabe. Transferir en matraz volumétrico de 50mL y
aforar con Metanol, y tomar una alícuota de 5mL y colocar en un matraz
de 50 mL, aforar con agua. Concentración final 48 µg/mL.

MÉTODO ANALÍTICO.

Transferir la alícuota de 5 mL de la preparación muestra a un embudo

de separación de 125 mL.
Adicionar 5 mL de Solución Buffer pH 2.8, añadir 5 mL de la Solución
de Azul de Bromotimol 0.025%, adicionar 10 mL de agua deionizada
Añadir 10 mL de Cloroformo y agitar durante 2 minutos.
Antes de dejar reposar el embudo de separación, abrir su válvula en
posición invertido para que se purguen los gases generados dentro del
embudo y quitar el tapón colocándolo sobrepuesto para evitar se
proyecte.
Dejar separar las capas durante 5 minutos.
Transferir la fase clorofórmica a un matraz volumétrico de 50 mL.
Pasando a través de un embudo de talle corto y un trozo pequeño de
algodón.
Enjuagar previamente con cloroformo el algodón y desechar este
cloroformo antes de pasar la muestra.
Adicionar 10 mL más de cloroformo al embudo de separación, agitar 5
minutos. Transferir el cloroformo al matraz de 50 mL.
Realizar una tercera extracción con otros 10 mL de cloroformo.
Enjuagar la punta del embudo con una pequeña porción de cloroformo
cada vez que se transfiera la muestra al matraz.
Llevar a volumen el matraz volumétrico de 50mL con cloroformo.
Concentración final 4.8 µg/mL
Determinar la absorbancia de la solución estándar y de la muestra
problema en un Espectrofotómetro UV-VISIBLE, a una longitud de onda
de 415 nm, utilizando celdas de cuarzo y la preparación blanco para
ajustar a cero.
ESTABILIDAD DE LA MUESTRA.

Para la estabilidad de la muestra se evalúan por triplicado del producto

terminado y posteriormente se guardaran por 24 Y 48 hrs a temperatura
ambiente y refrigeración a 5° C, se leerán en el Espectrofotómetro UV-
VIS.
CRITERIO DE ACEPTACIÓN
≤ 2.0%
Se analizaran sin cambio alguno, si los resultados no presentan
variación a la linealidad del método entonces la muestra presenta
estabilidad.

12.- Pruebas Microbiológicas:

MGA 0571. LÍMITES MICROBIANOS

Estas pruebas tienen como objetivo evaluar la calidad microbiológica de productos
farmacéuticos (materias primas, productos intermedios y terminados), mediante el
recuento la cuenta de organismos mesofílicos aerobios, hongos filamentosos y
levaduras; así como la investigación de microorganismos específicos. Los métodos
microbiológicos alternativos pueden utilizarse siempre que se demuestre su
equivalencia con el método farmacopeico.
RECOMENDACIONES GENERALES.
Las muestras deben trabajarse bajo condiciones asépticas. Se debe evitar afectar
a los microorganismos contaminantes de los productos de prueba. El tiempo
transcurrido desde la preparación de la primera dilución hasta su incorporación con
el medio de cultivo no debe exceder de 1 h. Sí el producto de prueba tiene actividad
antimicrobiana, se debe eliminar o neutralizar hasta donde sea posible. Sí se usan
substancias tensoactivas para preparar la muestra, se debe demostrar la ausencia
de toxicidad para los microorganismos y su compatibilidad con los neutralizantes
utilizados.
SOLUCIONES Y MEDIOS DE CULTIVO RECOMENDADOS.
Las soluciones y los medios de cultivo que se indican son satisfactorios para las
pruebas descritas en este capítulo, se pueden utilizar otros medios de cultivo si se
demuestra que presentan características similares de promoción o inhibición del
crecimiento de los microorganismos de referencia indicados para cada una de las
pruebas.

 Organismos Mesófilicos Aerobios:

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA.
La preparación de la muestra depende de las características físicas del producto de
prueba. Sin embargo, si ninguno de los procedimientos descritos en este capítulo
es satisfactorio para el análisis de un producto determinado, se debe desarrollar un
procedimiento alterno. Preparar la muestra de acuerdo a sus características físicas,
elegir el método adecuado para obtener una solución, suspensión o emulsión sin
alterar el número y tipo de microorganismos presentes en el producto.

PRODUCTOS SOLUBLES EN AGUA.

Diluir el producto de prueba (usualmente en una proporción 1 en 10) en solución

amortiguadora de cloruro de sodio peptona pH 7.0, solución amortiguadora de
fosfatos pH 7.2 o caldo soya tripticaseína. Si es necesario, ajustar el pH de 6 a 8.
Cuando se requiera preparar más diluciones, utilizar el mismo diluyente.

Promoción de crecimiento

Recuento de organismos Recuento de hongos

mesofílicos aerobios (OMA) filamentosos y levaduras
(HL)
 Agar o caldo soya Tripticaseína, Agar o caldo soya
Agar o caldo Sabouraud Tripticaseína, Agar o caldo
dextrosa Sabouraud dextrosa
30 a 35 °C 20 a 25°C
≤ 3 días ≤ 5 días

INCUBACIÓN DE PLACA

Incubar las placas de Agar soya Tripticaseína en la estufa (marca) de 30°C a 35°C
por 3 días para el crecimiento de (OMA).

Después de la incubación de 3 días paras al a estufa (marca) de 20°C a 25°C por 2

días para el crecimiento de (HL).

 Organismos Escherichia coli:

Escherichia coli Preparación y preincubación de la muestra. Preparar una dilución
1:10 del producto de prueba (no menos de 1 g o 1 mL), en 10 mL o la cantidad de
caldo soya tripticaseína determinada en la prueba de Aptitud del método, mezclar e
incubar de 30 a 35 °C durante 18 a 24 h. Selección y subcultivo. Agitar la mezcla,
transferir 1 mL del cultivo anterior a 100 mL de caldo MacConkey e incubar de 42 a
44 °C durante 24 a 48 h. Subcultivar en una placa de Aagar MacConkey de 30 a 35
°C durante 18 a 72 h. El crecimiento de colonias bien desarrolladas fermentadoras
de la lactosa indica la posible presencia de E. coli, que se confirma por medio de
pruebas bioquímicas de identificación. El producto cumple la prueba, sí no hay
crecimiento o si las pruebas de identificación son negativas.
12.- ANÁLISIS Y PRESENTACIÓN DE DATOS:

 Se presentara un informe al término del análisis del estudio del periodo de

estabilidades aceleradas y a largo plazo.

 Nombre del medicamento, forma farmacéutica y concentración.

 Número y tamaño de lotes y facha de fabricación.

 Descripción del sistema contenedor – cierre.

 Fecha de inicio y termino de estabilidades.

 Cromatogramas de los lotes acondicionados.

 Conclusiones.
RESULTADOS DE LAS PRUEBAS

Los resultados de las pruebas que se realizaron fueron hechas a los 3 lotes
como pruebas iniciales a la temperatura de 25 ± 2°C / 60 ± 5 % H.R.

Resultados del Análisis Microbiológico del lote L-001

Límites Resultados Fotos

Organismos
permitidos obtenidos

Organismos Máximo Menos de

Mesófilicos 200 UFC/g 200 UFC/g
Aerobios
Recuento de
Hongos Máximo 20 Menos de
filamentosos y UFC/g 20 UFC/g
levaduras

Staphylococcus
Ausencia Ausencia
aureus

Pseudomonas No se
Ausencia No se realiza
Aeuririnosa realiza

Escherichia coli Ausencia Ausencia

Resultados del Análisis Microbiológico del lote L-002

 Límites Resultados Fotos
Organismos
permitidos obtenidos

Organismos Máximo Menos de

Mesófilicos 200 UFC/g 200 UFC/g
Aerobios
Recuento de
Hongos Máximo 20 Menos de
filamentosos y UFC/g 20 UFC/g
levaduras

Staphylococcus
Ausencia Ausencia
aureus

Pseudomonas No se
Ausencia No se realiza
Aeuririnosa realiza

Escherichia coli Ausencia Ausencia

Resultados del Análisis Microbiológico del lote L-002

Límites Resultados Fotos

Organismos
permitidos obtenidos

Organismos Máximo Menos de

Mesófilicos 200 UFC/g 200 UFC/g
Aerobios
Recuento de
Hongos Máximo 20 Menos de
filamentosos y UFC/g 20 UFC/g
levaduras
 Staphylococcus
Ausencia Ausencia
aureus

Pseudomonas No se
Ausencia No se realiza
Aeuririnosa realiza

Escherichia coli Ausencia Ausencia

Ácido clorhídrico 0.1 N

SV DE ACIDO ClORHIDRICO 0.1 N 0 0.1 M

HCl
8.5 mL en 1 000 mL.
En un matraz volumetrico de 1000 mL, depositar 200 mL de agua, agregar
lentamente 8.5 mL de acido clorhidrico.
Enfriar a temperatura ambiente y llevar a volumen con agua.
Valorar la solucion como se indica a continuacion: disolver 100 mg de carbonato de
sodio anhidro, (secar previamente a 270°C durante 1 h), en 20 mL de agua y mezclar
hasta disolución completa, agregar O.l mL de SI anaranjado de metilo y titular con
la SV de acido clorhidrico hasta vire amarillo rojizo. Calentar a ebullicion y continuar
la titulacion hasta que el color amarillo rojizo no desaparezca. Calcular la normalidad
molaridad considerando que cada mililitro de SV de acido clorhidrico O.l N 0 O.l M
es equivalente a 5.30 mg de Na2C03 anhidro.

Reactivos:
 Carbonato de sodio
 SI Anaranjado de Metilo.
 Ácido clorhídrico
 Agua Desionizada
Fórmula para cálculos
(Peso de Muestra)(Concentracion)
𝑁=
(mL Gastados)(Equivalencia)

No. Muestra mL Gastados Calculos

1 100.1 18.4 (100.1)(0.01)
𝑁= = 0.1026
(18.4)(5.3)
2 100.0 18.5 (100.0)(0.01)
= 0.1020
(18.5)(5.3)
3 100.3 18.7 (100.3)(0.01)
= 0.1012
(18.7)(5.3)

MEDIA 0.1019
C.V. 0.56
F 1.019

EVIDENCIA FOTOGRAFICA DE ACIDO CLORHIDRICO

Ilustración 2. Valoración de Ácido

Clorhídrico
HIDROXIDO DE SODIO 0.1 N
Reactivos:
 Fenoftaleina
 Hidroxido de Sodio.
 Ácido clorhídrico
 Agua Desionizada
Fórmula para cálculos
(mL Gastados)(Concentracion HCl)
𝑁=
(mL HCl)

No. mL Gastados Calculos

1 20.0 (20.0)(0.1019)
𝑁= = 0.1019
(20.0)
2 20.2 (20.2)(0.1019)
𝑁= = 0.1029
(20.0)
3 20.1 (20.1)(0.1019)
𝑁= = 0.1024
(2.00)

MEDIA 0.1024
C.V. 0.49
F 1.024
 RESULTADOS DE PERDIDA DE PESO Y
pH

No. LOTE PESO 25 °C INICIAL PESO 30 °C UN PESO 40 °C UN

MES MESES
1 L-001 134 g
2 L-002 134 g
3 L-003 132 g

25 ± 2°C / 60 ± 5 % H.R 30 ± 2°C / 65 ± 5 % H.R

No. LOTE pH 25 °C INICIAL pH 30 °C UN MES

1 L-001 3.468
2 L-002 3.500
3 L-003 3.860

Los resultados de las pruebas que se realizaron fueron hechas a los 3 lotes
como pruebas iniciales a la temperatura de 30 ± 2°C / 65 ± 5 % H.R.