ADN

ESTRUCTURA

CROMOSOMAS Y GENOMAS
v  Los cromosomas son los
portadores de los elementos
hereditarios

v  Los cromosomas están

compuestos de ADN y
proteínas

v  Cada cromosoma está

formado por una molécula de
ADN
Breve Historia…
Cepa R inocua Cepa S letal
Frederick Griffith,
1928

Streptococcus pneumoniae

S:  cubierta  de  
polisacáridos  
PRESENTE  
 
R:  cubierta  de  
polisacáridos  
AUSENTE  
Oswald Avery, Colin MacLeod, and Maclyn McCarty, 1943.
P32
S35

DNA: P32

proteínas: S35

Alfred Hershey & Martha

Chase, 1952.
El ADN es la molécula de la herencia
La naturaleza hereditaria de cada organismo está
definida por su genoma, el cuál consiste de largas
secuencias de ácidos nucléicos que proporcionan la
información necesaria para construir al organismo.
Las bases nitrogenadas
Los DESOXIRIBONUCLEÓTIDOS
Nucleósido Nucleótido
Reglas de Chargaff
• La cantidad de adenina es la misma que la de timina: A=T
• La cantidad de guanina equivale a la de citosina: G=C

• La cantidad de bases púricas es la misma que las bases pirimídicas:

A+G=T+C

Pero la cantidad de A+T ≠ G+C

Existe complementariedad entre bases nitrogenadas
 Estructura del ADN

Rosalind
Franklin y
Maurice Wilkins

James Watson y Francis Crick

 Surco
menor
Surco
menor Surco
mayor

Surco
mayor
5’ PO4-
3’ OH
Complementariedad: Cadenas anti-paralelas

A T G C Extremo 5’: PO4-

Extremo 3’: OH
Bases nitrogenadas: interior
Fosfatos: exterior
La estructura del ADN permite responder dos preguntas claves en la
Genética:

1.  ¿Cómo se puede determinar la información de una función

biológica en una forma química?

2.  ¿Cómo se puede copiar la información a generaciones sucesivas?

 Propiedades del ADN
Desnaturalización y
Re-naturalización

El contenido de GC influye en las

propiedades del ADN, especialmente
sobre la temperatura de
desnaturalización y alineamiento

% GC Tm
 Purificación de ADN
1. Concentrar células 2. Romper células 3. Eliminar proteínas
Source Lysis Methods
Lysozyme - degrades
polysaccharide cell walls
SDS - detergent for cell
Bacteria
membranes
Freeze/Thaw several times
French Press
Osmotic
Organelles Sonication
Detergent
Osmotic
Animal Cells Sonication
Detergent

Several enzymes to break

Plant Cells down cell walls
Mechanical grinding

4. Precipitar ADN

•  Etanol
•  Isopropanol
•  Butanol
 Si quieres extraer ADN en casa, consulta:

http://learn.genetics.utah.edu/content/labs/extraction/howto/
Concentración y calidad del ADN

A260 / A280 Quality

Contains protein
Ratio < 1.8
contamination
1.8 < Ratio < 1.9 no contamination
Ratio > 2 DNA may contain RNA
Absorbance peak or
Phenol contamination
shoulder at 270 nm

NA Concentration at
Nucleic Acid Form
1 A260
Double -stranded DNA 50 µg/ml
Single-stranded DNA 37 µg/ml
RNA 40 µg/ml
Separación y visualización de fragmentos de ADN

Gel de Agarosa 0.8% - 2.5%

Bromuro de etidio:

Agente intercalante entre las bases nitrogenadas que fluoresce a la luz UV

 Bibliografía:

Alberts “Molecular Biology of the Cell” 4ª o 5ª Ed. (2002, 2008)

Lehninger “Principles of Biochemistry” 3ª, 4ª o 5ª Ed. (2000, 2004, 2008)

Lodish “Molecular Cell Biology” 4ª, 5ª o 6ª Ed. (1999, 2003, 2007)

http://learn.genetics.utah.edu/
http://www.youtube.com/watch?v=mHak9EZjySs

Continuará ….