MICROSCOPÍA

DRA. Elia L. Gómez Pérez

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CIUDAD JUAREZ
CIRUJANO DENTISTA
GRUPO: A-L3 1:00pm-2:00pm
MAYRA ITZEL DURAN GARCIA 144522

RESUMEN:
Hablaremos un poco acerca de la historia y ámbito de la microbiología, el papel
importante que tienen los microorganismos en las enfermedades, morfología de
las bacterias y los distintos tipos de microscopios que existen.
PALABRAS CLAVE:
microorganismos, microbiología, microscopio, resolución, tinción.
OBJETIVO:
que el alumno se familiarice con las partes del microscopio de luz, con su manejo
y sus cuidados y que conozca el fundamento de las diferentes clases de
microscopios.

INTRODUCCION: aficionado Antony van Leeuwenhoek

La microbiología se ha definido a
menudo como el estudio de los
organismos y agentes que son
demasiado pequeños para poder
observarlos con el ojo humano a
simple vista.
“DESCUBRIMIENTO DE LOS
MICROORGANISMOS”
Antes de que pudiesen verse algunos
investigadores sospecharon de su
existencia y su responsabilidad en el
desarrollo de enfermedades.
Se cree que las primeras
observaciones microscópicas se
realizaron entre 1625 y 1630 en
abejas y gorgojos.
Sin embargo la primera persona que
observo y describió con rigor
científico fue el microscopista
(1632-1723) de Delft, Holanda.
Leeuwenhoek se ganaba la vida
como comerciante de ropa y
accesorios para hombre, pero pasaba
la mayor parte de su tiempo libre
construyendo microscopios sencillos,
compuestos por lentes de vidrio
biconvexas que colocaba entre 2
placas de plata. Sus microscopios
podían aumentar de 50 a 300 veces
el tamaño.
“EL PAPEL DE LOS
MICROORGANISMOS EN LA
ENFERMEDAD”
La importancia de los
microorganismos en el desarrollo de
enfermedades no fue tan obvia para
la población, transcurrieron años
hasta que los científicos establecieron
la conexión entre microorganismos y
enfermedades.
Una vez demostrado que algunas
enfermedades podían ser causadas
por infecciones microbianas, los
microbiólogos comenzaron a
examinar los mecanismos mediante
los cuales los huéspedes se
defienden mediante los
microorganismos y a preguntarse
cómo podrían ser prevenidas las
enfermedades. Había nacido el
campo de la inmunología.
Reconocimiento de la relación
entre microorganismos y
enfermedades.
El cirujano ingles Joseph Lister
(1827- 1912) aporto pruebas
indirectas que los microorganismos
eran agentes de enfermedades
humanas a través de sus estudios
sobre la prevención de infecciones de
heridas. Lister, impresionado por las
investigaciones de Pasteur sobre la
participación de los microorganismos
en la fermentación y la putrefacción
desarrollo un método de cirugía
aséptica, con el fin de evitar que los
microorganismos penetrasen las
heridas. Los instrumentos se
esterilizaban con calor y se trataban
los vendajes quirúrgicos con fenol.
La primera demostración del papel de
las bacterias como agentes causales
de enfermedades se debió a la
investigación del carbunco por el
medico alemán Robert Koch (1843-
1910)
“MORFOLOGIA DE LAS BACTERIAS”
La forma de las bacterias depende de
la pared celular, que les proporciona
elasticidad y al mismo tiempo rigidez.
Se presentan habitualmente como
cocos, bacilos e incurvados.
Esta forma puede varias debido a
distintas circunstancias exógenas
como la antigüedad del cultivo,
factores nutricionales, tratamiento con
antibiótico, etc..
1. COCOS
Su forma habitual es
redondeada; a veces hay
excepciones y aparecen
ligeramente ovoides, con un
lado aplanado o con un
extremo afilado, En cuanto a
las agrupaciones pueden ser
de dos en dos (Diplococos), de
cuatro en cuatro (tétradas), en
cadena (estreptococos) o en
forma de cubo (sarcinas).
2. BACILOS.
Son alargados, aunque en
algunas ocasiones son mas
cortos y se denominan
cocobacilos; Así existen
bacilos con terminaciones en
ángulo recto, redondeadas,
afiladas, engrosadas.
Al contrario que los cocos, es
raro que se agrupen, aunque
pueden aparecer como
Diplobacilos, estreptobacilos o
en grupos irregulares.
 3. FORMAS INCURVADAS.
son elementos generalmente
aislados con una o varias
curvaturas. Si presentan una
sola pueden adoptar aspecto
de coma (Vibros), a veces son
varias en un solo plano, rígidas
y se desplazan por flagelos
(espirilos), en ocasiones se
sitúan en planos distintos, son
flexibles y se mueven por
filamentos axiales
(espiroquetas).
TAMAÑO.
Se emplea una serie de divisiones
del milímetro; entre las mas comunes
se encuentra micrómetro o micra.
El tamaño de las bacterias varia
enormemente de unas a otras 0.5 y 1
micras de ancho y 1-10 de largo.
El tamaño de la bacteria no cambia,
salvo en el momento de la división.
TIPOS DE MICROSCOPIOS
Los microscopios son aparatos que
incrementan el tamaño de una
imagen para poder visualizarla.
Su uso es esencial para el
diagnóstico, ya que permiten elegir el
número de aumentos según la
muestra que se desea visualizar.
MICROSCOPIOS OPTICOS
COMPUESTOS.
 DE FONDO CLARO
Es el más usado en laboratorios y
consta de los siguientes
elementos: a) Lampara que es la
fuente de luz, para iluminar con
mayor o menor intensidad; b)
condensador es el que concentra
la luz sobre el objeto que se va
examinar; c) objetivo, que recibe
la luz tras atravesar la preparación
e induce el primer aumento de la
imagen; d) ocular, se encuentra
próximo al ojo visualizador y
determina el segundo aumento; e)
platina, sobre la que se coloca la
preparación.
Los oculares suelen ser de 10
aumentos. Los objetivos de 10 a
40x se denominan Secos, ya que
entre ellos la preparación suele
haber aire. Para los objetivos de
100x se interpone con la
preparación aceite de inmersión,
que aumenta el índice de
retractación (relación que existe
entre la velocidad de la luz en el
vacío y a través de cualquier
material).
 DE FONDO OSCURO
Este contiene un disco opaco
que impide el paso directo de
la luz hasta el objetivo de
forma que solo le llega la
difractada por la muestra. Así
los microorganismos se ven
brillantes sobre un fondo negro
lo que evita tener que teñirlos.
 DE CONTRASTE DE FASES.
Captas las variaciones de
luminosidad producidas por los
distintos índices de refracción
de una bacteria con el medio.
Dentro de estos microscopios
se pueden incluir el de
normarsky o de contraste
diferencial, que, debido a su
 sistema de prismas ofrece
imágenes en tres dimensiones.
 DE FLUORESCENCIA
Se emplea tanto como
diagnostico directo como
indirecto. Consta de una luz
ultravioleta que al incidir sobre
los fluorocromos emite luz de
longitud de onda mayor que
puede verse utilizando filtros
adecuados.
 MICROSCOPIOS
ELECTRONICOS
Se usan para objetivos
inferiores a 0.23 micras como
los virus o estructuras internas
de la célula. El poder de
resolución es mayor porque la
longitud de onda de los
electrones es del orden de
100.000 veces menor que la
luz visible.
La fuente de iluminación se
sustituye por haces de
electrones y las lentes de
vidrio por lentes
electromagnéticas que enfocan
el haz sobre la preparación a
través de un tubo en el que
existe el vacío.
“METODOS MICROSCOPICOS DE
OBSERVACION DE LAS
BACTERIAS”
En general la observación se realiza
en fresco, mediante tinciones o por
técnicas especiales.
1. EXAMEN EN FRESCO
Permite visualizar las bacterias
vivas y sus movimientos.
Si los microorganismos provienen
de un medio o producto patológico
liquido se utilizara una gota del
mismo, pero si proviene de un
medio solido se incorporaran a un
líquido isotónico que conserve la
forma de la bacteria.
Existen dos técnicas: a)la
denominada simple, en que la
suspensión bacteriana se observa
entre porta y cubre y b) gota
pendiente en la que dicha
suspensión se coloca en un
cubreobjetos sobre un circulo
hecho con parafina o vaselina, se
cubre con un porta objetos
excavado; luego se invierte la
preparación, que, sellada, queda
lista para su visualización durante
un periodo más largo.
2. EXAMENES TINTORIALES.
con el uso de colorantes se
pretende conseguir que los
microorganismos contrasten
nítidamente con el medio que los
rodea.
existen varios tipos de tinciones:
simples, diferenciales específicas,
de fluorescencia.
2.1 SIMPLES.
se utiliza un solo colorante. Los
colores utilizados son violeta de
genciana, azul de metileno,
fucsina.
Las tinciones simples se llevan a
cabo con la fijación de muestra, se
añade colorante, transcurrido un
tiempo se elimina con agua y tras
caer se observa con el
microscopio.
 2.2 DIFERENCIALES O
COMPUESTAS
Se utilizan para poner de
manifiesto diferencias entre las
bacterias; se denominan
compuestas porque se emplea
mas de un colorante. Las mas
utilizadas en microbiología son las
de Gram y Ziehl-Neelsen.
2.3TINCIONES ESPECIFICAS
revelan estructuras bacterianas.
Entre estas estructuras se
encuentra la de Schseffer-Fulton
que se utiliza para visualizar
endosporos. Estos se tiñen con
verde malaquita y se fuerza la
tinción con calor.
2.4TINCIONES FLUORECENTES
se emplean en el diagnostico
indirecto para detectar
anticuerpos. También se usan en
el diagnostico directo, ejemplo,
mediante auramina para bacterias
acido-alcohol resistentes.
3. EXAMENES ESPECIFICOS
En este grupo se incluyen los
resultados con el microscopio
electrónico. Para efectuarlos hay
que recurrir procedimientos que
escapan a los objetivos de este
libro.
MATERIALES Y METODOS
Materiales:
Microscopio
Muestra en portaobjetos.
Aceite de inmersión.
Ejercicio y manejo del microscopio
o El microscopio se debe sujetar
del brazo, mientras la otra
mano sobre la base para
sostenerlo, llevándolo en
posición vertical.
o No poner el microscopio en la
orilla de la mesa.
o No tocar los lentes con los
dedos.
o Limpie las lentes solamente
con papel especial para lentes
(papel seda).
Ejercicio de enfoque
1. Identificamos las diferentes
partes de microscopio
2. La dra. Nos entrego una
muestra en un portaobjetos
para poder realizar el ejercicio.
3. Prendemos el microscopio
4. Colocamos el portaobjetos en
la platina y prendimos la luz
5. Movimos cuidadosamente el
revolver y colocamos el
objetivo en 10X.
6. Con el tornillo macrométrico lo
usamos para acercar el
objetivo de 10X a la platina.
7. Una vez que encontramos un
enfoque solo usamos el
micrómetro para aclarar más la
imagen.
8. El diafragma lo utilizamos para
determinar la cantidad de luz
que entre.
9. Una vez analizado el objetivo
de 10X, movimos
cuidadosamente el revolver y
lo cambiamos a 40X,
 ajustamos un poco con el
micrómetro y movimos el
diafragma para tener un mejor
enfoque.
10. Volvimos a mover el revolver
para cambiar el objetivo a
100X, pero antes se colocó
una gota de aceite de
inmersión sobre la muestra.
Ahora si con el revolver
haciendo contacto con el
aceite se ajusta nuevamente el
enfoque moviendo el
micrómetro “únicamente” junto
con el diafragma. FIG.1 Foto tomada con
11. Al terminar de examinar la objetivo de 10X, es muy poco
imagen con objetivo de 100X, lo que se alcanza a percibir,
se mueve cuidadosamente el pero se alza a ver puntitos
revolver y se coloca en su morados en un fondo blanco
posición inicial y con papel de
seda limpiamos primero el
objetivo de 10X después el de
40X y por último el de 100X.
12. Retiramos la muestra de la
platina sin limpiarla.
13. Apagamos el microscopio,
enrollamos el cable y lo
devolvimos a su lugar con su
funda puesta.

RESULTADOS
Como evidencia tomamos fotos en
cada objetivo que analizamos.
FIG. 2 Foto tomada con el
objetivo de 40X, en esta
imagen vemos que la
resolución es mucho mejor y se
logra ver con claridad formas
tamaños y colores en la
muestra.
 podamos encontrar en la exploración
oral, el problema aquí es que no
salimos capacitados por falta de
interés para poder realizar
diagnósticos. Sería importante estar
actualizándonos en este tema ya que
a medida que avance la tecnología se
implementarán instrumentos y
técnicas cada vez más eficientes y
con aplicaciones novedosas que
permitirán incrementar los
FIG. 3 foto tomada con el conocimientos.
objetivo de 100X, ha este se
le coloco aceite de BIBLIOGRAFIA
inmersión para que pueda
entrar la luz y la resolución  Lansing M. Prescott,John
sea mucho mejor y la P.Harley, Donald A. Klein,
imagen la sea más clara y Microbiologia, Mc Graw-Hill
especifica. Aquí no solo se Interamercana,quinta
ve la forma y color si no edición,pag.2-15.
también el contenido  Jose Liebena
interno de cada uno. Ureña,Microbiologia Oral,Mc
Graw-interamericana, segunda
edición,pag.17-24.
DISCUSION Y
CONCLUSION.
Antoni van Leeuwenhoek descubrió
en 1683 que en el sarro de la boca
existen "millones de animales
microscópicos, siendo su número
más elevado que el de los seres
humanos que habitaban en los
Países Bajos, de manera que era un
placer verlos moverse"
Estoy de acuerdo con Leeuwenhoek
ya que la cavidad oral es considerada
la mas contaminada en todo el
cuerpo debido a la mala cultura de
higiene que tenemos, por eso
nosotros como odontólogos es
importante tener un microscopio en
nuestro consultorio debido a la
inmensa variedad de bacterias que