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Análisis fitoquímico de la semilla de Persea americana Mills (aguacate) y evaluación de su 

actividad antioxidante 

Universidad de Iberoamérica, Facultad de Farmacia 

Ximena Zúñiga Hernández, MsC.  Marco Calvo Pineda, MsC. Susan Hío Sequeira 

Resumen 

En  la  actualidad  se  da  la  búsqueda  constante  de  nuevas  alternativas  terapéuticas  con  enfoques  más 
naturalistas  para  el  tratamiento  de  ciertas  patologías  que  día  a  día  acechan  nuestra  sociedad  como  las 
enfermedades asociadas al estrés oxidativo.  El aguacate (Persea americana Mill) es una fruta con un alto valor 
nutricional,  que  durante  siglos  ha  sido  de  gran  consumo  en  nuestro  país  y  en  el  continente  americano,  sin 
embargo,  hasta pocos años se ha empezado a estudiar los productos de desecho de esta fruta, como la cáscara 
y la semilla para determinar las propiedades que estos poseen en la salud. La semilla de aguacate ha resultado 
de  interés  puesto  que  en  estudios  recientes  ha  demostrado  tener  actividad  antibacteriana,  anticonceptiva, 
antifúngica,  antihelmíntica,  entre  otras.  El  presente  estudio  por  su  parte  busca  determinar  el  potencial 
antioxidante de la semilla de aguacate por medio del método DPPH (1,1‐difenil‐2‐picrilhidrazil) y busca además 
compararlo  con  el  potencial  antioxidante  del  ácido  ascórbico,  que  es  uno  de  los  antioxidantes  con  gran 
potencial altamente conocido. Así mismo, complementario al estudio se realiza análisis fitoquímicos a la semilla 
mediante pruebas de color, técnicas cromatográficas y espectroscópicas. 

Palabras claves: Persea america Mill, aguacate, antioxidantes, estrés oxidativo, DPPH. 

Abstract 

At present, there is a constant research for new therapeutic alternatives with naturalistic approaches for the 
treatment of certain pathologies that day by day are haunting our society such as diseases associated to the 
oxidative  stress.  The  avocado  (Persea  americana  Mill)  is  a  fruit  with  a  high  nutritional  value,  that  during 
centuries has had a great consumption in our country and in the American continent, nevertheless, until a few 
years ago there are studies to determinate the properties of the waste products like the seeds and the husk of 
this fruit possess in health. Avocado seed has been of interest since recent studies have shown antibacterial, 
contraceptive, antifungal and anthelmintic activity, among others. The present study aims to determinate the 
antioxidant potential of avocado seed using the DPPH (1,1‐diphenyl‐2‐picrylhydrazyl) method and also seeks to 
compare it with the antioxidant potential of ascorbic acid, which is one of the antioxidants with great potential 
highly known. Also, complementary to the study, there is a phytochemical analyzes to the seed through color 
tests, chromatographic and spectroscopic techniques. 

Key words: Persea america Mill, avocado, antioxidants, oxidative stress, DPPH. 
 

Introducción 
Los  radicales  libres  son  sustancias  consideradas  Existen dos vías principales para el control de estas 
como  especies  reactivas  o  inestables.  Este  puede  especies  reactivas,    una  es  de  tipo  enzimática, 
ser  un  átomo  o  un  conjunto  de  estos  que  como es el caso de la enzima catalasa, el glutatión 
contienen  al  menos  un  electrón  que  no  se  peroxidasa,  el  superóxido  dismutasa,  y  la  otra  de 
encuentra  apareado,  y  estos  al  estar  cargados  tipo  no  enzimática,    (estas  de  tipo  no  enzimática 
negativamente  lo  que  vuelve  a  la  molécula  pueden ser endógenas o exógenas), en esta última 
inestable.  Al  estar  estos  desapareados,  lo  vía es donde intervienen los antioxidantes. (33) 
electrones  buscan  de  alguna  manera  aparearse 
El  árbol  de  aguacate  data  desde  hace 
para  poder  estabilizarse,  causando  perturbación  o 
aproximadamente  8000  años  antes  de  Cristo, 
alteración en cualquier molécula que se encuentre 
desde  ese  entonces  se  ha  cultivado  en  América  y 
cercana  a  esta,  produciendo  así  cambios 
ha sido un importante fruto dentro de las culturas 
moleculares, celulares, bioquímicos, genéticos, una 
mesoamericanas. (1) 
reacción en cadena que finaliza causando daños al 
organismo  que  en  algunos  casos  resultan  Actualmente  este  fruto  es  cultivado  en  todo  el 
irreversibles.  Estas  sustancias  se  encuentran  en  el  mundo  durante  todo  el  año.  Su  consumo  es  de 
organismo  de  manera  natural  en  pequeñas  gran relevancia en países como México, así mismo, 
proporciones  como  causa  de  muchos  procesos  su consumo es muy popular a nivel mundial.  
bioquímicos  que  ocurren  en  nuestro  organismo, 
La  Persea  americana  es  un  fruto  rico  en  agua  y 
que  en  situaciones  normales  estos  se  encuentran 
grasas  de  tipo  monoinsaturadas  que  resultan 
en niveles normales. (28). 
beneficiales  a  organismo,  así  mismo  posee  un 
Es  fundamental,  sin  embargo,  que  los  niveles  de 
pequeño  porcentaje  de  grasas  saturadas  y 
radicales  libres  se  mantengan  controlados  en 
poliinsaturadas.  Sin  embargo,  además  de  ser  un 
niveles  normales,  puesto  que  niveles  elevados  de 
fruto  rico  en  estas  grasas  como  el  aceite  oleíco  y 
radicales libres, estimula una producción de mayor 
linoleíco,  también  resulta  ser  un  fruto  rico  en 
cantidad de los mismos. 
proteínas, carbohidratos, fibra, así mismo contiene 
El  control  de  radicales  libres  en  el  organismo  está 
un buen  número  de vitaminas  que  son  excelentes 
mediado  por  agentes  antioxidantes.  Este  tipo  de 
para  el  organismo  como  la  vitamina  B1,  B2,  B6, 
sustancias  deben  estar  en  equilibrio  con  las 
vitamina  C,  A,  E  y  asimismo  contiene  minerales 
sustancias  oxidantes  de  manera  que  estas  últimas 
como  potasio,  magnesio,  fósforo,  sodio,  calcio, 
no representen un daño para el propio organismo. 
hierro, contiene ácido fólico, niacina. (8) 
Estos agentes son los encargados del control de las 
En  los  estudios  sobre  P.  americana,  se  ha 
especies  reactivas  que  se  produzcan  en  el 
encontrado  componentes  aislados  a  los  cuales  se 
organismo,  y  este  tipo  de  sustancias  se  obtienen 
les  ha  asociado  actividad  farmacológica  tales 
de manera endógena o exógena.  
como:  antihelmíntico,  antiespasmódico, 
antibacteriana. 
Según la manera en que se consuma las partes de  la  muestra.  El  extracto  líquido  de  la  muestra  de 
esta  planta  tiene  diversos  efectos  farmacológicos,  semilla  de  aguacate  se  sometió  a  rotavaporación 
es decir, si se consume un extracto, o una infusión,  donde se extrajo la mayor cantidad de etanol para 
o el consumo directo del fruto.  De esta manera, el  que la muestra se concentrara. 
extracto en metanol de la hoja y el tallo, presenta 
Análisis de pruebas de color 
efectos  antibacterianos  contra  bacterias  de  tipo 
Se  realizaron  dos  fases  de  pruebas  de  color,  una 
gram  positivo  como  el  Staphylococcus  aureus,  así 
fue con el extracto natural, utilizando una gota del 
mismo su extracto acuoso o en etanol presenta un 
extracto diluida en 1mL de H2O. Posteriormente se 
efecto diferente de tipo espasmogénico, (probado 
realizó  prueba  de  Magnesio  (Mg),  FeCl3, 
en animales como conejos y cobayos), y un efecto 
Drangendorff  y  Molish.  Se  utilizó  un  tubo  de 
antiespasmódico para el extracto acuoso de la hoja 
ensayo para cada prueba. 
y el fruto. Por otra parte la cáscara ha presentado 
efectos  antibacterianos  reportados  a  partir  de  su  Cromatografía de columna 
composición.  A  nivel  de  extractos  de  la  semilla  se  Se  realizó  una  cromatografía  de  columna  con  el 
ha  reportado  actividad  de  tipo  antibacteriana,  extracto  una  vez  que  este  estaba  semisólido.  Se 
bactericida,  anticonceptiva,  antifúngica,  tomó  una  muestra  de  dos  puntas  de  espátula 
antihelmíntica,  esto  contra  especies  como  S  aproximadamente  y  se  colocó  en  la  columna  una 
aureus,  Bacilus  subilis,  shiguella,  salmonella,  vez que esta ya contenía el gel de sílica. Se hizo un 
Candida albicans, solitaria, Escherichia coli. (7)  primer  corrido  de  hexano  para  humedecer  el  gel 
de sílica, este corrido se descartó. Se puso a correr 
Se  han  reportado  además  estudios  que  la  semilla 
el  extracto  con  cinco  fases  móviles  de  diferente 
de  aguacate  ayuda  a  reducir  triglicéridos, 
proporción: A) 90:10mL hexano‐acetato de etilo, B) 
colesterol,  reduce  así  el  riesgo  de  ataques 
50:50mL  hexano‐acetato  de  etilo,  C)  90:10mL 
cardiacos,  y  problemas  asociados  al  aumento  de 
acetato de etilo‐hexano, D) 100mL acetato de etilo 
este tipo sustancias en el cuerpo.  
y  E)  100mL  metanol.  Se  recolectaron  siete 

Metodología  fracciones por cada fase móvil, señaladas desde A1 
hasta A7, B1 hasta B7, y así sucesivamente con las 
Preparación del extracto  fracciones  restantes.  Se  procuró  mantener 
Para  la  preparación  del  extracto  se  tomó  las  volúmenes similares en todas las fracciones. 
semillas  de  aguacate  previamente  lavadas  y  Se  realizó  pruebas  de  color  a  dos  fracciones  por 
secadas al ambiente, posteriormente se procedió a  cada línea de fase móvil realizada, con reactivo de 
rallarlas  con  ayuda  de  un  rallador  utilizando  su  FeCl3, Dragendorff y con vapores de amoniaco.   
parte  más  fina.  La  muestra  fue  colocada  en  una 
bandeja  para  realizar  secado  al  ambiente.  Cuando  Cromatografía de capa fina 

la  muestra  se  encontraba  completamente  seca  y  En placa cromatográfica de sílica, se colocaron tres 

libre  de  humedad,  se  realizó  extracción  etanólica  puntos  correspondientes  a  muestra  de  tres 

con ayuda de un Soxleth, donde se dejó realizar un  diferentes  fracciones.  Se  utilizó  una  fase  móvil  de 

mínimo de ocho sifones para su posterior retiro de  hexano y  acetato  de  etilo  al 3:1. De  cada  línea  de 


fracción  se  analizó  al  menos  tres  muestras.  Las   En el análisis de pruebas de color para el extracto 
placas se revelaron con luz UV.  puro  se  tuvo  resultado  positivo  en  carbohidratos 
(prueba  de  Molisch)  y  compuestos  fenólicos.  Así 
Se  realizó  además  un  análisis  a  ciertas  fracciones 
mismo  con  los  análisis  realizados  a  las  fracciones 
de  la  línea  del  B  y  C  comparándolas  con  atropina, 
obtenidas  de  la  cromatografía  de  columna,  se 
donde  se  utilizó  una  fase  móvil  con  9mL  de 
obtuvo  resultados  positivos  en  presencia  de 
cloroformo,  2mL  de  ciclohexano  y  1mL  de 
alcaloides,  cumarinas  e  igualmente  compuestos 
dietilamina y se hizo revelado con Dragendorff.  
fenólicos. Estos pues dieron positivo en las pruebas 
Prueba de antioxidantes según método DPPH  de Dragendorff, vapores de amoniaco y FeCl3.  

Preparación del extracto   En la cromatografía de capa fina se observó que la 
La disolución madre del extracto se realizó en una  presencia  de  alcaloides  radicaba  mayormente  en 
concentración  de  50/1000mL  y  la  disolución  de  las fracciones de la línea del B y C.  
trabajo de 1/10mL con solvente metanol. 

Preparación  de  la  disolución  madre  y  trabajo  de 


DPPH 
La  preparación  de  las  disoluciones  madres  y  de 
trabajo  de  DPPH  y  de  ácido  ascórbico  se  realizó 
siguiendo  el  método  de  Determinación  de 
Capacidad  Antioxidante  mediante  DPPH, 
propuesto  por  Gutiérrez  S.  y  Alfaro  K.,  (27).  Con 
 
modificaciones  en  la  preparación  de  la  disolución 
Figura  1.  Resultado  de  prueba  de  coloración  con 
de trabajo de DPPH, la cual se realizó al 10/50mL, y 
Dragendorff de la fracción C6 y B7 en comparación 
la  de  trabajo  del  ácido  ascórbico  que  se  realizó  al 
con atropina. 
2.5/100mL, con solvente metanol en ambas. 

El  resultado  del  análisis  de  espectrometría  UV 


Espectrometría UV 
corroboró la presencia de compuestos fenólicos al 
Se  tomó  cuatro  de  las  fracciones  que  dieron 
menos en las fracciones correspondientes a la línea 
positivo  en  la  prueba  de  vapores  de  amoniaco,  se 
de  E  (E5,  E6,  E7)  cuyos  principales  picos  de 
utilizó  las  fracciones  E5,  E6  E7  y  C7;  estas  se 
absorbancia  fueron  mayores  a  una  longitud  de 
diluyeron  en  metanol,  posteriormente  se  llevaron 
onda cercana al 274nm.  
al  equipo  de  ultravioleta  visible  y  se  realizó  un 
barrido  en  una  longitud  de  onda  entre  200nm‐
500nm,  con  la  finalidad  de  determinar  picos  de 
absorbancias significativos. 

Discusión y resultados 
 
IC50 del ácido ascórbico y del extracto de la semilla 
de aguacate. 

Gráfico 1. Curva de calibración del ácido ascórbico 

Figura 2. Espectro UV‐Visible de fracción E5 diluido 
en metanol. 

Gráfico  2.  Curva  de  calibración  de  extracto  de 


extracto de semilla de aguacate.  

Figura 3. Espectro UV‐Visible de fracción E6 diluido 
en metanol. 

Para  los  IC50  obtenidos  gracias  a  estas  curvas,  se 


obtuvo el siguiente cuadro 

Cuadro  1.  Cuadro  comparativo  de  concentración 


antioxidante  que  causa  una  disminución  en  la 
absorbancia DPPH del 50%. 

IC50 Ácido ascórbico  3.20 mg/L 

  IC50  Extracto  semilla  de  0.11 mg/L 


aguacate 
Figura 4.  Espectro UV‐Visible de fracción E7 diluido 
 
en metanol. 
Con  estos  resultados  se  puede  observar  que  el 
Prueba de antioxidantes por método DPPH 
extracto de semilla de aguacate tiene un potencial 
Para  la  prueba  de  antioxidantes  se  obtuvo  las 
antioxidante  siete  veces  mayor  al  del  ácido 
siguientes  curvas  que  permitieron  determinar  el 
ascórbico. Que si bien no es tan alto, compite con  Interamericano  de  Cooperación  para  la 
uno  de  los  considerados  mejores  antioxidantes  Agricultura ES) Nueva San Salvador; 2003.  
para el organismo.  3. TELIZ,  D.  El  aguacate  y  su  manejo 
integrado.  Coordinador  Editorial  Daniel 
Conclusiones 
Téliz. México D.F,  Mundi‐Prensa; 2000 
4. NATIONAL  CANCER  INSTITUTE.  1992. 
 Se concluye que acorde con lo señalado por la 
Beneficios  del  Aguacate.  The  California 
teoría,  se  identificaron  varios  compuestos 
Avocado Comision. www.avocado.org 
dentro  del  análisis  fitoquímico  que 
5. LASTRA  M.  J.  Bosques  Naturales  de 
anteriormente  le  habían  sido  atribuidos  a  la 
Asturias. Universidad de Oviedo; 2001. 
semilla  de  aguacate,  como  la  presencia  de 
6. RODRÍGUEZ N. H. La utilidad de las plantas 
carbohidratos,  alcaloides,  cumarinas  y 
medicinales  en  Costa  Rica.  Costa  Rica, 
compuestos fenólicos.  
EUNA; 2007. 
 La  semilla  de  aguacate  demostró  tener  un 
7. OSUNA  T.L,  TAPIA  P.  E,  AGUILAR  C.A. 
potencial antioxidante mayor en comparación 
Plantas  medicinales  de  la  medicina 
con  el  del  ácido  ascórbico  (Vitamina  C),  que 
tradicional  mexicana  para  tratar 
puede  ser  atribuible  a  la  presencia  de 
afecciones  gastarointestinales:  estudio 
compuestos  fenólicos.  Esto  resulta  de  gran 
etnobotánico,  fotoquímico  y 
aporte  ya  que  dado  a  esto  no  solo  puede 
farmacológico.    Universitat  de  Barcelona, 
generar  efectos  antioxidantes  ante  la 
Publicacions I edicions; 2005. 
oxidación  lipídica  del  mismo  fruto,  sino  que 
8. PAREDES  L.O,  GUEVARA  L.  F,  BELLO  P.  L. 
pueden  estudiarse  sus  efectos  antioxidantes 
Los  alimentos  mágicos  de  las  culturas 
en el organismo humano. 
indígenas  mesoamericanas.  México,  FCE, 
 La  semilla  de  aguacate  demuestra  ser  un 
producto que puede resultar beneficial para la  SEP, CONACYT, CAB; 2006. 
salud como antioxidante.   9. MONTIEL  L.  M. Introducción  a  la Flora  de 
 Existe  además  un  aporte  a  disminuir  el 
Costa  Rica.  Costa  Rica,  Editorial 
impacto  ambiental  ya  que  la  semilla  de 
aguacate es considerada material de desecho.  Universidad de Costa Rica; 1991. 
  10. CALABRESE,  F.  El  aguacate.  2ª  ed.  Trad. 
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natural  con  efectos  saludables  sobre  el 
sistema  cardiovascular.  Nutr  Hosp. 
2012;27(1):76‐89 

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