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JUSTIFICACION
La cuenca del Urubamba en estos últimos años se ve afectada por las actividades que
realizan las diferentes empresas que operan a lo largo de ella, ocasionando alteraciones en
los diferentes ecosistemas presentes en la zona; por tal motivo es importe la
implementación de un laboratorio de análisis de aguas y recursos biológicos, con la
finalidad de monitorear la calidad de las aguas y vigilar sus recursos.
1.2.- INFRAESTRUCTURA
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1.2.1.- Características del Laboratorio
El laboratorio debe ser localizado en un ambiente limpio bien ventilado e
iluminado, libre de polvo, de corrientes de aire, con temperatura y humedad
controlada
Los pisos deben ser lavables, resistentes y mantenerse desinfectados, limpios
y libres de objetos salientes en los que pueda tropezar el personal. Los mismos
deben mantenerse secos y si están encerados se debe utilizar cera
antideslizante; de igual manera las paredes lisas y de fácil limpieza
Puertas y ventanas, deben ser de cierre hermético, que permitan una presión de
aire ligeramente positivo.
En cuanto a las instalaciones eléctricas, se debe revisar las conexiones,
tomacorrientes que sean adecuados de acuerdo al requerimiento de cada uno
de los equipos y suficientes tomas de energía eléctrica y puesta a tierra.
Suministro de agua, suficientes lavaderos con agua caliente y fría, para la
distribución del agua, las tuberías deben ser de acero inoxidable u otro material
no tóxico.
Las mesas de trabajo a una altura conveniente, de preferencia deben ser de
acero inoxidable, amplias y de superficies lisas y lavables para procesar
muestras.
Los ambientes deben poseer armarios, cajones y estantes para proteger a los
materiales limpios esterilizados, medios y reactivos.
El ambiente de recepción de muestras debe de contar con un escritorio sillas,
una mesa pequeña para colocar las muestras, una computadora e impresora,
archivadores y material de escritorio.
El laboratorio debe tener un grupo electrógeno.
El laboratorio debe de contar con una planta de tratamiento de residuos sólidos
y líquidos ya que se trabajará con reactivos contaminantes y estos no pueden
ser eliminados al río directamente (el tamaño dependerá de la cantidad de
muestras que se procesen)
Ventilación natural o mecánica controlada.
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.Finalizando el trabajo, limpiar las mesas con desinfectante y los materiales
desechables deben ser descartados en un lugar apropiado en bolsas se plástico.
1.3.- PERSONAL
El laboratorio de análisis de aguas y recursos biológicos debe de contar con el personal
necesario en número y tener las calificaciones para desarrollar las funciones y
responsabilidades correspondientes.
Dadas las características y la naturaleza del trabajo realizado por un laboratorio, es
importante destacar que todo personal involucrado debe mantener confidencia en las
informaciones y resultados.
Se requiere:
a) Permanentemente
Un Biólogo (análisis microbiológico).
Un Ingeniero Químico (análisis físico-químico del agua)
b) Eventuales
Para realizar los monitoreos de los recursos biológicos se requerirá profesionales
biólogos de las diferentes áreas ( peces, mamíferos mayores y menores, aves,
insectos, Anfibios y otros).
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13.-Si se trabaja con aguas contaminadas el personal del laboratorio debe ser vacunado
contra la tifoidea y tétano
14.-Reportar inmediatamente cualquier accidente.
15.-El laboratorio debe tener un botiquín de primeros auxilios con los elementos
necesarios
16.-Cada laboratorio debe tener una copia de un manual de seguridad e instrucciones
para tratamientos de emergencias, para brindar los primeros auxilios en caso de
accidentes.
Equipos.
Refrigerador.- un laboratorio de análisis de aguas debe disponer de un
refrigerador manteniendo la temperatura de 4 grados centígrados, para
almacenamiento y conservación de muestras y reactivos.
Autoclave.- es esencial para esterilizar la mayoría de los soportes
microbiológicos. Este es capaz de mantener una temperatura interna de 121 Cº
bajo una presión de 15 libras, ha de estar equipado con un termómetro de
calibrado para medir la temperatura dentro de la cámara de esterilización con
un manómetro de presión y con válvulas de seguridad directamente
conectadas al tubo de suministro de vapor saturado y ha de ser capaz de alcanzar
la temperatura deseada en 30 minutos.
No es recomendable utilizar una autoclave vertical ni una olla a presión, por
las dificultades para ajustar y mantener la temperatura de esterilización y los
posibles riesgos que conlleva su uso.
Incubadora.- Las incubadoras deben de mantener una temperatura constante
en todo momento y en todas las zonas.
Balanzas.- se utilizará balanzas con una sensibilidad de almenos 0,1g para
cargas de 150g y pesas adecuadas. Para pesar cantidades pequeñas (inferiores
a 2g) se utilizarán balanzas analíticas con una sensibilidad de 1 mg para una
carga de 10g.Las mas recomendadas son las balanzas de pesada rápida y de un
solo plato.
Baño Maria.-Los baños Maria termo controlados deben emplearse en todos
los casos en que la temperatura tenga que mantenerse dentro de un margen de
tolerancia de 0 a 1 C, La tapa del baño María bebe estar bien ajustado para
impedir una excesiva evaporación de la humedad.
Horno.- El horno de aire caliente se emplea para esterilizar la mayoría de los
instrumentos de vidrio del laboratorio. Debe de ser de tamaño suficiente para
evitar el hacinamiento; ha de ser capaz de proporcionar temperatura uniforme
y debe ir equipado con un termómetro calibrado que registre con precisión
temperaturas comprendidas entre 160º y 180º C
Balanza.- El laboratorio debe constar con dos balanzas de carga superior, una
de ellas con una capacidad de 2000g y una sensibilidad de 0.1g y la otra con
una capacidad de 100 -200 g. y una sensibilidad de 1mg.
Espectrofotómetro.-Es un instrumento que permite medir la intensidad de la
luz transmitida; se utiliza mucho en análisis químicos.
Medidor de pH..-se utilizarán instrumento electrónicos, de una exactitud de al
menos de 0.1 unidades de pH, para determinaos valores de pH.
Destilador de Agua.
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Cámara de Flujo laminar.- La cámara de flujo laminar horizontales y verticales
nos permite obtener una zona estéril y esta compuesta de una cámara de acero
inoxidable, lámparas fluorescentes y luz de rayos ultravioleta. Su principal
función es de proteger de la contaminación al operador, producto y medio
ambiente.
Centrífugas.- aparato diseñado para acelerar la separación de partículas de
sólidos suspendido en líquidos.
Filtro de Membrana.- se utilizara embudos de filtración y soportes de membrana
de acero inoxidable sin costuras, vidrio o plástico resistente al autoclave, que no
tengan fugas ni sufran corrosión. Son aceptables los equipos de laboratorio de
campo , pero son necesarios equipos y procedimientos normalizados para la
filtración en el laboratorio
Agitador Magnetito.- aparato diseñado para agitar las mezclas de los diferentes
reactivos y medios de cultivo.
Termómetro
Microscopio
Sistema de filtros
Material de Vidrio
Para uso general en el laboratorio el material más adecuado es el de vidrio de
borosilicato muy resistente. Existen vidrios especiales con características tales como
alta resistencia al ataque por álcalis, bajo contenido de boro u opacidad. Se utilizarán
material de vidrio para volumetría y de uso frecuente en un laboratorio de agua.
( Anexo Nº 02)
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b) Envases de Seguridad.-Los envases de seguridad están diseñados para minimizar las
consecuencias de un accidente o para evitar la diseminación de materiales peligrosos. Se
utilizan para transportar productos químicos, sobre todo ácidos y álcalis concentrados,
Para disolventes inflamables, emplease envases sometidos a controles de calidad por los
organismos pertinentes.
c) Instalaciones de Almacenamiento.-Para guardar los materiales de laboratorio, hay que
conocer sus propiedades así como las consecuencias de accidentes tales como derrames,
explosión o fuego. Por lo general no debe almacenarse grandes cantidades de reactivo
en las áreas de trabajo, sino utilizar envases mas pequeños que sólo contengan lo suficiente
para el trabajo diario o semanal. Evítese la mezcla, en caso de accidente, de productos
químicos que puedan combinarse dando lugar a compuestos explosivos, inflamables o
peligrosos; para ello deberán almacenarse por separados, los materiales peligrosos en un
recinto con recipientes específicos.
d) Equipos de vertidos de sustancias.- La zona de almacenamiento y de trabajo debe
disponer de equipo para el vertido de productos químicos; estos equipos pueden
comprarse o prepararse en el laboratorio, utilizar equipos de tamaño adecuado para las
cantidades utilizadas de ácido, base y disolventes.
e) .Avisos de Seguridad en las paredes.- Colocar en un lugar central para informar de
las sustancias peligrosas existentes en el laboratorio.
Equipo de Protección Personal
El equipo y materiales de protección personal están constituidos por: guardapolvos,
Mascarillas, gafas de protección y guantes de goma pueden; utilizarse para manipular
líquidos peligrosos y lavado de materiales de vidrio; los de cuero, para los materiales
radioactivos, y los quirúrgicos para el material patógeno.
Material de Limpieza
Detergentes
Desinfectantes
Escoba
Recogedor
Tachos de basura
Franelas para el limpiado de mesas
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Identificar los aspectos clave, problemas y causas de la preocupación
Consultar a los representantes de los diferentes grupos de interés, incluyendo a los
pobladores
Definir el área que va a abarcar el análisis del agua de acuerdo a las dimensiones del
problema (por ejemplo: ubicación de los puntos de descarga de contaminantes;
detección del área en que aparecen de manera patente o visible las manifestaciones de la
contaminación, ubicación de las poblaciones, entre otros).
Identificar los problemas de acuerdo a las referencias que se obtenga en los dos puntos
anteriores y establecer prioridades para los parámetros a evaluar.
Toma de Muestras
Ningún análisis de laboratorio tiene sentido si la muestra tomada no es representativa
del agua que se está examinando. La falta de cuidado en tomar las medidas necesarias
para preparar una muestra, puede alterar por completo los resultados de un análisis. Es
muy raro que los resultados de una sola muestra sean suficientes para determinar el
grado de contaminación del agua por lo general, es necesario tomar duplicado o triplicado.
Pero deben ser paralelos a las otras muestras y los otros análisis (una muestra, en
muchos casos, complementada con el análisis de otros indicadores, dependiendo de cada
caso).
Es pertinente subrayar el hecho que el propósito de este documento es brindar pautas
generales para la mejor y fácil manera de tomar una muestra y manejar la prueba hídrica
en casos de contaminación. El posterior análisis de las muestras se realizará en
laboratorios calificados y compete a los laboratoristas la responsabilidad de hacerlo
profesionalmente.
Un aspecto fundamental para el personal a cargo de la toma de muestra: Cuanto más
alto sea el nivel profesional o capacitación del personal a cargo de la recolección de las
muestras, tanto mayor será la seguridad y credibilidad que tendrá el resultado del
análisis como evidencia de contaminación. En la mayoría de casos, es necesario y
oportuno llevar a cabo un entrenamiento del personal; este entrenamiento lo debe
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realizar personas versadas en el tema. Las actualizaciones periódicas aseguran o refuerzan
el conocimiento y se pueden conocer nuevas técnicas.
Es importante tener en cuenta que, en algunos casos, es necesario tomar medidas
especiales para dotar al personal con el conocimiento y las medidas necesarias para
protegerlo en la manipulación de muestras contaminadas (por ejemplo, en el caso de
epidemias e indicios de la presencia de agentes patógenos potencialmente peligrosos -
entre otras sustancias perjudiciales para la salud-) o en el manejo de muestras con
sustancias tóxicas, cancerígenas, corrosivas, volátiles, reactivas, etc.
Equipo Necesario
Las muestras de agua para análisis químicos y/o físicos, deben ser tomadas en frascos
de vidrio neutro y de plástico de polipropileno o policarbonato (esterilizables en
autoclaves) de boca ancha, limpia e incolora, con tapas herméticas igualmente limpias.
Generalmente, los frascos para los análisis químicos y físicos no necesitan ser estériles,
pero deben estar bien limpios. Lávelos con un detergente adecuado y enjugarlos 3 a 5
veces en agua destilada para remover los residuos y olores.
Para el caso de análisis microbiológico debe recordarse que si es preciso esterilizar los
frascos y tapas. También se deben seguir pautas precisas para la toma de las muestras,
su manipulación y su transporte. En el caso de análisis microbiológicos, las muestras
deben ser analizadas en un plazo máximo de 24 horas después de tomadas También para
las de análisis físicos y químicos.
Es necesario contar con cajas herméticas (Kuler) que guarden las muestras a una
temperatura adecuada (4-8 °C). De no ser así, los resultados de los análisis
microbiológicos, físicos, químicos, pueden verse alterados por efecto de la temperatura.
Es mejor usar “hielo sintético” (baterías que se congelan) y no hielo normal, para evitar
la presencia de agua derretida.
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equipo no esterilizado. En ambos tipos de toma de muestra, las principales
consideraciones son las mismas: obtener muestras representativas de agua sin
contaminarlas, cerrar muy bien los envases o frascos y llevarlos rápidamente al lugar
donde se realizará el análisis.
La persona que toma las muestras no debe usar crema, repelente contra insectos, etc. al
tomar muestras para análisis físico-químico (por ejm. pesticidas).
Estabilidad de la Muestra
Las concentraciones de los agentes nocivos que se van a determinar en una muestra
pueden alterarse durante el lapso que transcurre entre el momento del muestreo y el
momento del análisis, como consecuencia de:
a. contaminación externa durante la toma de muestra,
b. contaminación causada por el recipiente, o
c. por procesos químicos, físicos o biológicos dentro de la muestra.
Si no se toman las precauciones adecuadas pueden producirse errores graves. Por ello,
deben tomarse en cuenta los métodos uniformes recomendados para evitar la
contaminación causada por el recipiente y reducir al mínimo la modificación de las
concentraciones de agentes nocivos durante el almacenamiento y transporte. Debe
recordarse que, el método de preservación de la muestra con frecuencia está
determinado por el método de análisis que se emplea. Para evitar complicaciones,
deben realizarse pruebas para verificar que la concentración de la sustancia en cuestión
no se modifica considerablemente en el período entre la toma de muestra y su análisis.
(Ver Anexo Nº 04)
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1.- Número de la muestra (se trata de un número correlativo) del muestreador y/o del
laboratorio. Es muy importante darle la debida atención para que no haya lugar a
confusión.
2.- Tipo de análisis a realizar: bacteriológico, físico, químico, otros.
3.- Nombre del lugar preciso donde se tomó la muestra incluyendo:
4.- Ubicación exacta del lugar (si se puede georeferenciar, es ideal).
5.- Temperatura del agua al momento de la toma de muestra (existen aparatos que
miden, simultáneamente, la temperatura, el pH y el oxígeno disuelto. Son datos
muy útiles si se toman en el lugar mismo).
6.- Fecha y hora de la toma de muestra.
Con respecto a la etiqueta, es importante recomendar que se llenen con lápiz, plumón
indeleble o crayón graso. el uso de tientas no es recomendable porque pueden borrarse o
disolverse.
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pronto. Por lo tanto, éstas deben ser almacenadas cuidadosamente y ser transportadas
de manera tal que, al momento del análisis, desde el punto de vista técnico y científico, se
pueda garantizar que aún son representativas de la fuente de agua sujeta del análisis. La
temperatura de almacenamiento debe ser, preferiblemente entre 4 y 8 °C, para
mantener su estado y no facilitar procesos naturales que la alteren. Se debe llevar un
registro del tiempo y de la temperatura de almacenamiento.
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4.- PARAMETROS A MEDIR EN EL LABORATORIO DE AGUA
Análisis Fisicoquímico
Determinación Temperatura
Determinación pH
Determinación Salinidad
Determinación Turbiedad
Determinación Conductividad
Determinación Alcalinidad
Determinación Cloruros
Determinación Acidez
Determinación TDS (Total Sólidos Disueltos)
Determinación Dureza
Determinación Sulfatos
Determinación Nitratos
Determinación Nitritos
Determinación Aceites y grasas
Determinación de Hidrocarburos
Determinación Metales pesados (Cu, Cr Fe Mn, Pb, Zn)
Biológico
Oxigeno Disuelto OD
Demanda Química de oxigeno DQO
Demanda Bioquímica del Oxigeno DBO
Microbiológico
Coliformes totales y fecales
Heterótrofos
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4.1.-ANALISIS FISICOQUIMICO DEL AGUA
Determinación de pH.
El pH es una medida de la concentración de iones de Hidrógeno en el agua, fuera del
rango normal de 6 a 9 pueden ser dañinas para la vida acuática (por debajo de 7 son ácidas
y por encima de 7 son alcalinas). Estos niveles de pH pueden causar perturbaciones
celulares y la eventual destrucción de la flora y fauna acuática.
Determinación de la Conductividad.
La conductividad de una muestra de agua es una medida de la capacidad que tiene la
solución para transmitir corriente eléctrica.
Esta capacidad depende de la presencia, movilidad, valencia y concentración de iones, así
como de la temperatura del agua.
Determinación de Sólidos Totales Disueltos.
Los Sólidos Totales Disueltos (STD) constituyen una medida de la parte de sólidos en una
muestra de agua que pasa a través de un poro nominal de 2,0 µm (o menos) en condiciones
específicas.
Determinación de la Salinidad.
La salinidad es el contenido de sal disuelta en un cuerpo de agua. Dicho de otra manera,
es la concentración de sal que hay en el agua y puede ser expresada en partes por
millón (ppm) La salinidad es un factor ecológico de alta importancia, influenciando
mucho sobre los tipos de organismos que podrán vivir en esos cuerpos de agua
Determinación de la Temperatura.
La lectura de la temperatura se utiliza en el cálculo de diversas formas de alcalinidad, en
estudios de saturación y estabilidad respecto al carbonato de calcio, cálculo de la
salinidad y en operaciones generales de laboratorio, en estudios limnológicos que
requieren conocer la temperatura del agua en función a la profundidad. La temperatura
elevada con secuencia de descargas de agua calentada, puede tener un impacto
ecológico significativo. A menudo la identificación de la fuente hídrica como en los
manantiales profundos, sólo es posible efectuando medidas de temperatura
Materiales y Métodos
Equipo Multíparamétrico.
Para el uso y procedimiento del método seguir con las recomendaciones del fabricante.
Flujograma para Análisis por Instrumentos (Anexo Nº 05)
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4.1.2.- METODOS VOLUMETRICOS
DETERMINACION DE LA ALCALINIDAD
En las aguas naturales, o sea en aquellas que no han sufrido tratamiento alguno, los
bicarbonatos representan generalmente la alcalinidad, desde que son formados en
considerable cantidad por acción del CO2 sobre materiales básicos del suelo.
Para los propósitos de la presente norma técnica peruana se aplica las siguientes
definiciones.
pH de Punto Final: Cuando se debe solamente al contenido total de carbonatos (CO3) y
bicarbonatos (HCO3), el pH en el punto de equivalencia de la titulación, es determinado
en función de la concentración de dióxido de carbono La concentración de dióxido de
carbono a su vez, de las especies totales de carbonato presentes originalmente y de
cualquier pérdida que pueda haberse producido durante la titulación. Como puntos de
equivalencia para las concentraciones de alcalinidad correspondientes en mg CaCO3/L,
se sugieren los valores de pH que se expresa.
pH de Punto Final
Condiciones de la Alcalinidad Alcalinidad de
medición total Fenoptaelina
Alcalinizad en mg 4,9 8,3
CaCO3 /L: 4,6 8,3
30
150 4,3 8,3
500
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