PRÁCTICA No.

3: Preparación de medios de cultivo, medios selectivos y

diferenciales
OBJETIVO GENERAL
-Reconocer y preparar diferentes medios de cultivo siguiendo las instrucciones proporcionadas en el laboratorio, aplicando los
conceptos básicos de nutrición y preparación de los mismos.

De los medios de cultivo suministrados por su tutor, registre la información solicitada y prepare el medio de cultivo.

Nombre del medio de cultivo: SABOURAUD

Forma de preparación: 65 g de Sabouraud por un litro de agua destilad. Reposar 5 minutos y mezclar hasta uniformar. Calentar agitando frecuentemente
y hervir 1 minuto hasta disolver completamente. Distribuir en tubos o en otros recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 118-121°C durante 15
minutos
Cálculos:
Composición (g/L):
65g Sabouraud* 60ml Agua destilada = 3,9 g Sabouraud
1000ml agua destilada
Peptona de cafeína
Peptona de carne
Glucosa
Agar- Agar

Nombre del medio de cultivo: BBL, SIM Medium

Forma de preparación: Suspender 30 gramos de SIM Medium en 1 litro de agua destilada. Mezclar bien. Con calor y agitación frecuente y hervir por un
minuto. Distribuir y esterilizar por autoclave a 121°C por 15 minutos.
Cálculos:
Composición (g/L):

30g SIM Medium* 672ml Agua destilada = 20,16 g SIM Medium

1000ml agua destilada Caseína digestiva pancreática.
Pectina de digestiva de tejido animal
Amonio de sulfato ferroso
Tiosulfato de sodio
Agar
 Nombre del medio de cultivo: Agar M.R.S
Forma de preparación: Suspender 62 gramos del medio en un litro de agua destilada. Calentar agitando constantemente hasta ebullición. Distribuir en
recipientes adecuados, esterilizar en autoclave 121°C por 12 minutos.
Cálculos:
Composición (g/L):

62g Agar M.R.S* 635ml Agua destilada = 39,37 g Agar M.R.S Peptona bacteriológica
1000ml agua destilada Extracto de carne
Extracto de levadura
Dextrosa
Tween 80
Fosfato di potásico
Acetato de sodio
Citrato amónico
Sulfato de magnesio
Sulfato de manganeso
Agar bacteriológico

DISCUSIÓN:

La preparación adecuada de un medio de cultivo nos permite disponer de los nutrientes y condiciones necesarias para favorecer el
crecimiento de los microorganismos en el laboratorio. Para la preparación del medio de cultivo en tubos de ensayo se adicionan 5ml
y en cajas de Petri entre 12 y 15 ml de la preparación del medio de cultivo. Al realizar la esterilización de los medios se dejaran
enfriar a temperatura ambiente y en el caso de medios sólidos contenidos en tubos deberán, inclinarse para que al solidificarse
adopten la forma de agar inclinado ó pico de flauta. No se trabajó con la ayuda de la cámara de flujo laminar por lo tanto
después de que el medio se solidifique se debe llevar a autoclave según especificaciones del laboratorista.

CONCLUSIÓN

Conocer y saber cómo se prepara un medio de cultivo, el tipo de microorganismos que en este interactúan, la composición de los
medios de cultivo y su clasificación, nos permite utilizar el medio de cultivo más adecuado para el proceso que se vaya a llevar a
cabo en el laboratorio y así obtener los resultados ideales.
BIBLIOGRAFÍA

http://britanialab.com.ar/esp/productos/b02/tetrationatocaldo.htm
http://www.bdigital.unal.edu.co/4999/1/albertorojastrivino.2011.pdf
http://www.frro.utn.edu.ar/repositorio/catedras/quimica/5_anio/biotecnologia/practicoI.pdf
http://www.britanialab.com/productos/351_hoja_tecnica_es.pdf
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/tetrationato.pdf
http://www.condalab.com/uploads/media/1011__AGAR_BISMUTO_SULFITO_REv_0_Abril_2010_01.pdf
https://www.bd.com/europe/regulatory/Assets/IFU/HB/CE/PA/ES-PA-255084.pdf
http://www.ingenieroambiental.com/4014/coliformes2.pdf
http://www.fbioyf.unr.edu.ar/rrii/varios/pdf2010sharapin/sharapin2010_caceres-controlcalidad.pdf
http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/nutritivoagar.htm
http://britanialab.com.ar/esp/productos/b02/cerebcorinfusagar.htm
http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/tsiagar.htm
http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/lisinahierroagar.htm
http://electronic-systems.com.mx/pdf/AGAR%20DEXTROSA%20Y%20PAPA.pdf
http://www.probiotek.com/producto/agar-de-dextrosa-y-papa/
http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/embagar.htm
http://www.mibius.de/out/oxbaseshop/html/0/images/wysiwigpro/Fluorocult_LMX_Broth_modif_110620_engl.pdf