PRUEBA DE COOMBS DIRECTO

 Lavar los GR del paciente 3 veces con solución salina y suspenderlos del 3-5%
 Marcar dos tubos como CD y Control
 Adicionar:

CD CONTROL
Suero de Coombs 2 Gotas
GR Paciente 1 Gota 2 Gotas
SS - 2 Gotas

 Centrifugar 15-45 Seg

 Resuspender los botones celulares suavemente y observar la presencia de
aglutinación
 Graduar la aglutinación 0, 1+,2+,3+,4+
 Si el resultado es negativo, adicionar:

CD CONTROL
Células Control de 1 Gota 1 Gota
Coombs

 Repetir la centrifugación de 15-45 seg

 La aglutinación en este punto refleja la presencia de suero antiglobulina
libre y confirma que la reacción era realmente negativa.

NOTA: Si se presenta aglutinación en cualquier fase de la prueba en el tubo control, no se

puede realizar la lectura.

CELULAS CONTROL DE COOMBS

 Lavar tres veces glóbulos rojos O positivos

 Colocar 8 o 10 gotas de suspensión de glóbulos rojos O positivos
 Colocar la misma cantidad de antisuero anti D al tubo
 Incubar a 37ºC por 30 minutos
 Lavar de 5 a 6 veces en solución salina 0.85%
 Probar estos glóbulos rojos con una gota de suero de Coombs y buscar
aglutinación
 Este control dura 4-5 días a 4ºC
 PRUEBA DE COOMBS INDIRECTA
 Separar el suero del paciente con el que se va a realizar la prueba
 Lavar GR O Positivo 3 veces con SS y suspenderlos del 3-5%
 Marcar dos tubos como CI y Control
 Adicionar:

CI CONTROL
GR O Positivo 2 Gotas 2 Gotas
Suero del paciente 2 Gotas 2 Gotas

 Centrifugar 15-45 Seg

 Resuspender los botones celulares suavemente y observar la presencia de
aglutinación
 Si el resultado es negativo, adicionar:

CI CONTROL
Albumina bovina 2 Gotas -
Solución salina al 0.85% - 2 Gotas

 Incubar a 37ºC por 20 minutos

 Después de la incubación los GR se lavan tres veces con SS al 0.85%
 En el último lavado descartar la SS al 0.85% hasta que quede la muestra en la
paredes del tubo
 Adicionar:

CI CONTROL
Suero de Coombs 2 Gotas -
Solución salina al 0.85% - 2 Gotas

 Centrifugar 15-45 Seg

 Resuspender los botones celulares suavemente y observar la presencia de
aglutinación
 Graduar la aglutinación 0, 1+,2+,3+,4+
 Si el resultado es negativo, adicionar:

CI CONTROL
Células control de 1 Gota 1 Gota
Coombs

 Repetir la centrifugación de 15-45 seg

 La aglutinación en este punto refleja la presencia de suero antiglobulina
libre y confirma que la reacción era realmente negativa.