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INGENIERÍA GENÉTICA DE BACTERIAS:

• Vectores: clonado de cualquier secuencia de ADN.


• Clonar: introducir un fragmento de ADN en un vector.
• Más usados: plasmídicos y virales.
• Finalidad: ventajas selectivas, proteínas recombinantes

• Los plásmidos tienen la capacidad de autoreplicarse y son elementos génicos factibles de ser
transferidos entre bacterias e introducidos en una cepa deseada.
Enzimas de Restricción
• “Endonucleasas”
• Cortan los enlaces fosfodiester del material genético (ADN de doble cadena) a
partir de una secuencia que reconocen (secuencias palindrómicas).
• Punto de corte: sitio o diana de restricción con 4-6 pares de bases (o en un sitio
no muy lejano a éste).
• En bacterias: defensa para degradar material genético extraño que entre en la
célula (las bacterias metilan su ADN para distinguirlo del extraño).

Extremos cohesivos Extremos romos


Tipos de enzimas de restricción:

Tipo I y Tipo III:


• Actividad de restricción (cortan) y modificación (metilan).
• Corte a cierta distancia de la secuencia de reconocimiento:
 Tipo I: lejos de la secuencia de reconocimiento, aguas arriba o abajo.
 Tipo III: 5-8 bases antes o después de la secuencia que reconocen.
• Necesitan ATP.

Tipo II:
• Sólo actividad de restricción.
• Cortan dentro de la secuencia que reconocen.
• No necesitan ATP.

Nomenclatura: Nomenclatura Ejemplo Corresponde a:


E Escherichia Género de la bacteria
co coli Especie de la bacteria
R RY13 Cepa de la bacteria
Orden de identificación de la
I 1era enzima identificada
enzima en la bacteria
• ADN: en pares de bases o bp
• ARN: en nucleótidos o nt
• Proteínas: en Daltons o Da
Gen reportero
• Se lo vincula a una secuencia regulatoria de
otro gen de interés.
• Codifican para proteínas de simple detección
PLANTA
GEN RESISTENCIA TRANSGÉNICA
PORTADORA DEL GEN
Penicilina G, ampicilina,
Bla TEM-1 Maíz
amoxycilina
aph 3'-2 (NPTII) Kanamicina, neomicina Tomate
Aph 3'-3 Amikacina Tomate
Aad 9 Estreptomicina, espectinomicina Algodón
1

4
PLÁSMIDO Ti (Tumour inducing plasmid )
• Las bacterias que lo portan inducen tumores en las raíces o en el tronco de
determinadas especies vegetales.
• Agrobacterium tumefaciens (Rhizobium rhizogenes) y otras de su género.

Ingeniería genética: capacidad


de Agrobacterium para transferir
genes a las plantas

• El plásmido se desarma
suprimiendo los genes que
inducen el tumor.
PLÁSMIDO Ti (Tumour inducing plasmid )

• Partes esenciales del ADN-T son dos pequeñas repeticiones (25 pares de bases) en los
extremos (para la transformación de la planta).
• Los genes que se desea introducir en la planta son clonados en la región ADN-T del
plásmido desarmado, junto con un marcador seleccionable.
• Después de la modificación, se hace crecer a las plantas en un medio que contiene el
antibiótico, de forma que las que no tienen el ADN-T integrado en su genoma morirán.
BIONATURIS
Grupo biotecnológico que se dedica
al desarrollo y la producción de
medicamentos biológicos para salud
humana y animal

Baculovirus presentan 2 formas distintas durante su ciclo


• Virus ocluidos: presentes en una matriz proteica de
polihedrina, son responsables de la infección primaria
del huésped.
• Virus de gemación: se liberan de las células huésped
durante la infección secundaria.

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