CARACTERIZACIÓN DE LAS CONDICIONES DEL

CULTIVO IN VITRO Y ACLIMATIZACIÓN DE PLANTULAS

DE PIÑA Y CAÑA DE AZUCAR.

1. Introducción.
El éxito de la técnica de cultivo de tejidos vegetales como un instrumento en la
propagación masiva de plantas, depende de la capacidad para manejar en el
vivero, plantas a gran escala durante el periodo de adaptación; de esta manera
se logra un alto grado de sobrevivencia a bajo costo.
El proceso de aclimatación de las plántulas obtenidas por cultivo in vitro es muy
complejo, sobre todo en especies leñosas, por lo que el control estricto de las
condiciones ambientales durante esta fase es determinante en un sistema de
Micropropagación. En este trabajo se establecen las condiciones ambientales en
que deben desarrollarse las plantas in vitro, así como las atenciones
silviculturales que deben proporcionárseles para lograr su aclimatación.

La aclimatización de las vitro plantas o plantas cultivadas in vitro.

Es un proceso crítico, ya que las estas pasan de un ambiente de baja
transpiración a otro que exige una mayor demanda hídrica, que eventualmente
puede ocasionar estrés hídrico. Igualmente, pasan de un estado heterótrofo a un
estado autótrofo con diferentes niveles de nutrientes y finalmente, de un
ambiente aséptico a uno donde pueden estar expuestas al ataque de
microorganismos saprofitos y/o fitopatógenos. En el proceso normal de
micropropagación los brotes y plantas son cultivados en medios de cultivos con
azúcares, vitaminas y otras sustancias orgánicas, lo que determina el desarrollo
heterótrofo o mixótropo de los mismos (nula o baja capacidad fotosintética). Sin
embargo, durante la fase de adaptación estas plantas están forzadas a ser
completamente autótrofas y sintetizar los compuestos orgánicos necesarios a
partir de minerales, agua, CO2 y luz.

Este cambio en las plantas así como la morfología de las mismas, determina la
susceptibilidad durante las etapas iniciales del proceso de aclimatización.
Las condiciones in vitro, como la alta humedad, baja intensidad luminosa,
temperatura constante y bajo o nulo intercambio gaseoso en el frasco, favorecen
los cambios en la morfología de las plantas y que a su vez influyen en la
capacidad de sobrevivencia y crecimiento de las plantas.
 2. Objetivos.
Conocer las condiciones de aclimatación y características de cultivo in vitro de
piña y caña de azúcar para la propagación exitosa de plantas.

3. Marco teórico
Aclimatación:
Es el cambio gradual de las condiciones ambientales; en el caso concreto, es la
transferencia de las plántulas de un ambiente aséptico cerrado a un vivero o
campo, con menor humedad relativa y mayor intensidad de luz. Pero antes de
realizar ese traslado, es necesario conocer algunos aspectos sobre las plantas
propagadas in vitro.
Características:
1. Cultivadas bajo condiciones de asepsia.
2. Ambiente controlado.
3. Crecimiento requiere de carbono exógeno, o sea son plantas heterótrofas.
4. Pobre desarrollo del aparato fotosintético: clorofila presente en las hojas pero
las enzimas responsables de la fotosíntesis están inactivas o ausentes.
5. Se han desarrollado a una humedad relativa alta: cerca del 100%; esto hace
que las plántulas sean más sensibles a pérdidas de agua.
6. Disminución o ausencia total de ceras en la cutícula de las hojas. Esto produce
más susceptibilidad a deshidratarse.
Importancia de las condiciones ambientales durante el proceso de
adaptación.
Durante este proceso intervienen factores como:
Humedad:
Las plantas in vitro están aproximadamente al 100 % de humedad y debido al
pobre control de transpiración, se requiere un cambio gradual durante la
adaptación de alta humedad a baja.
Temperatura:
En el cuarto de crecimiento a 20°- 27°C, mantener esta temperatura durante la
adaptación, pues esta condición acelera el desarrollo de raíces.
Luz:
se ha observado que las plantas producidas por cultivo de tejidos muestran
unmejor desarrollo a intensidades lumínicas bajas (15 Klux).
Proceso de aclimatación
-Trasladar los frascos con plántulas por lo menos un mes al vivero para su pre-
adaptación
-Sacar las plántulas del frasco ylavarlas con abundante agua, eliminando el
medio de cultivo adherido a las raíces.
-Sumergir las plántulas en solución fungicida (Benomil 1gr/L) por 5 min.-Envolver
las raíces con musgo blanco y colocar las plántulas en bandejas.
-Tapar las bandejas con un plástico sin que roce las plántulas. (como un mini
invernadero)
-Regar preferiblemente con nebulizadores evitando que el musgo se seque.
-Dejar un mes las plántulas en el aclimatador y luego llevarlas a condiciones de
invernadero.

4. DOCUMENTO EN ESTUDIO
Aclimatación de piña in vitro.
Las plantas enraizadas se extrajeron de los frascos y se lavaron con agua para
eliminar los restos de agar y sacarosa.

-Se establecieron en bolsas de color negro de polietileno con dimensiones de 4×4

pulgadas que contenían sustrato de compost.
-Las plantas deben crecer bajo condiciones de sombra con cubierta de sarán (70 %).
-Se debe aplicar un riego diario y fertilización foliar con 20-20-20 más elementos
menores en dosis de 2 g/l una vez a la semana.

-Las plantas permanecerán en estas condiciones durante seis semanas.

Aclimatación del cultivo in vitro de caña de azúcar.
Fase de aclimatación:
Las plantas enraizadas que se encuentran dentro del laboratorio bajo
condiciones asépticas y estrictamente controladas, deben ser sacadas al exterior
para ser plantadas en bandejas con un sustrato formado por la mezcla de arena,
suelo y abono orgánico en proporciones iguales. Esta etapa prepara a la nueva
planta para un cambio fuerte en su anatomía y en sus funciones metabólicas.
Las plantas in vitro se encuentran en un ambiente de 100% de humedad relativa
(HR) en el cual todos los nutrimentos le son suministrados artificialmente. Ellas
deberán cambiar a un ambiente con una menor HR y en donde deben absorber
el agua y sintetizar los nutrimentos necesarios para su desarrollo. Esta fase se
lleva a cabo en un aclimatador, que evita la deshidratación de las plantas.
Conforme transcurre el tiempo, la HR se disminuye paulatinamente hasta
alcanzar el equilibrio con el ambiente. Este proceso puede alcanzar de 3 a 6
semanas.
Fase de preparación del almácigo:
Una vez que las plantas están debidamente aclimatadas, se procede a preparar
las plantas para su traslado definitivo al campo, siempre bajo condiciones
controladas en invernadero. El procedimiento consiste en brindar a las nuevas
plantas las condiciones necesarias para que crezcan en tamaño, produciendo
mayor follaje y raíces que permitan a la planta soportar el trasplante definitivo al
campo.
 5. Conclusiones:
Para la obtención exitosa de plantas de caña de azúcar y piña es necesario
que pasen por un periodo de aclimatación para lograr su éxito al ser llevadas
a campo definitivo.
Se debe tener en cuenta las características climáticas que cada especie
requiere se debe controlar todos los factores bióticos y abióticos.

6. Linkografia
- http://www.scielo.org.mx/pdf/rfm/v39n3/0187-7380-rfm-39-03-00225.pdf
- https://bdigital.zamorano.edu/bitstream/11036/1086/1/T3360.pdf
-
https://www.laica.co.cr/biblioteca/servlet/DownloadServlet?c=443&s=1753&d=2
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