Objetivos

General

 Determinar la curva de crecimiento de E. coli en función del tiempo.

Específicos

 Calcular la tasa de variación de crecimiento especifico de E. coli.

 Enunciar la dependencia de la selección de un método para la cuantificación del
crecimiento microbiano mediante los resultados obtenidos.

Tabla N°1. Datos de tiempo y absorbancia

Número de
Horas Tiempo (h) Absorbancia (650nm)
mediciones
Blanco 0.096
0 8:25 0 0.141
1 9:05 0.66 0.145
2 10:15 1.83 0.155
3 11:20 2.92 0.18
4 12:10 3.75 0.21
5 14:14 5.82 0.598
6 16:25 8 0.683
7 18:33 10.13 0.877
8 9:05 24.59 1.376

1.6

1.4

1.2

0.8

0.6

0.4

0.2

0
0 5 10 15 20 25 30
 Gráfica 1. Absorbancia vs tiempo

Tabla N°2. Conteo de Colonia

DILUCIONES
TIEMPO SD 10−1 10−2 10−3 10−4 10−5 10−6 10−7 10−8 10−9 10−10
0 N.C N.C≥300
≥300
1 N.C N.C≥300
≥300
2 N.C≥300 N.C≥300 NC≥30
3 N.C≥300 N.C≥300 NC≥30 NC≥30
4 N.C≥300 N.C≥300 N.C≥300 N.C≥300 120
5 N.C≥300 N.C≥300 N.C≥30 N.C≥300
6 N.C≥300 N.C≥300 N.C≥30 104 15 13
7 N.C≥300 164 64 12 SC SC
8 N.C≥30 172 65 5 SC SC
SD:= Sin dilución ; N.C:= No contables. ; SC:= Sin crecimiento

Cálculo demostrativo de UFC/ml

𝑛ú𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑐𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖𝑎𝑠 ∗ 1/𝑓𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛

𝑢𝑓𝑐/ 𝑚𝑙 =
𝑚𝑙 𝑑𝑒 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑠𝑒𝑚𝑏𝑟𝑎𝑑𝑎
104 ∗ 1000000
𝑢𝑓𝑐/ 𝑚𝑙 =
0,1 𝑚𝑙
𝑢𝑓𝑐/ 𝑚𝑙 = 1,04 ∗ 109

Tabla N°3. Unidades Formadoras de Colonias (UFC)

tN Tiempo(h) UFC/ml Ln (UFC/ml)

6 8 1,04E+09 20,76
7 10,13 1,64E+09 21,22
8 24,59 1,72E+09 21,27
 8.00E+09

7.00E+09

6.00E+09

5.00E+09
UFC/ml

4.00E+09

3.00E+09

2.00E+09

1.00E+09

0.00E+00
0 5 10 15 20 25 30
Tiempo (h)

Gráfica 2. Unidades formadoras de colonias al variar el tiempo (h)

Tabla N°4. Crecimiento logarítmico

Δ Ln (UFC/ml)
Medición 𝟏𝟎−𝟔 𝟏𝟎−𝟕 𝟏𝟎−𝟖
7-6 0,45547553 1,45083288 -0,08004271
8-7 0,04762805 0,01550419 -0,87546874

25

y = 0.8688x + 3.1797
20

15

10

0
0 5 10 15 20 25

Gráfica 3. linealización del crecimiento de E. coli.

 Tabla N°5. Absorbancia vs Unidades Formadoras de Colonias (UFC)

Absorbancia UFC/mL

0,683 1,04E+09

0,877 6,40E+09

1,376 6,50E+09

8.00E+09
7.00E+09
6.00E+09
5.00E+09
UFC/ml

4.00E+09
3.00E+09
2.00E+09
1.00E+09
0.00E+00
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6
Abasorbancia

Gráfica 4. Absorbancia vs UFC/ml

Cálculo de la tasa de crecimiento de E. coli

L(%)= log (UFC/ml)

L (%)= log (6,5 E 09)

L= 9.8%