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Revista Sistemas Ambientales, Vol. 4, No 2, 2011, p.

45-54

APLICACIONES BIOTECNOLÓGICAS DE MICROORGANISMOS


HALÓFILOS
Laura Castillo-Carvajal, Blanca E. Barragán-Huerta, B*.

Laboratorio de Residuos Peligrosos. Departamento de Ingeniería en Sistemas Ambientales. Escuela Nacional de Ciencias Biológicas.
Instituto Politécnico Nacional. Av. Wilfrido Massieu s/n, Unidad Profesional Adolfo López Mateos. CP 07738. DF. México

e-mail: bbarraganh@ipn.mx

RESUMEN

Los microorganismos tienen múltiples aplicaciones industriales; en el caso de los microor-


ganismos halófilos su uso biotecnológico se ve orientada a diferentes campos, por ejemplo
en la industria alimentaria en donde se requiere preservar y conservar las características
sensoriales de los alimentos, en la industria de plásticos en la que se busca generar nuevas
tecnologías amigables con el ambiente y en la industria farmacéutica con la incorporación
de principios activos que originan nuevos productos. Se ha demostrado que los microorga-
nismos halófilos presentan una alta capacidad de bioremediación, ya que pueden ser em-
pleados como catalizadores en diversos procesos en donde se requieren condiciones extre-
mas para poder recuperar eficientemente un ambiente contaminado.

Palabras clave: Halófilas, Biotecnología, Bioremediación.

ABSTRACT

Microorganisms have several industrial applications; in case of halophilic microorganisms


their biotechnological use is oriented to different fields, for example in food industry where
it needs to preserve and maintain the sensory characteristics of the food, in the plastics in-
dustry which looks for new friendly environmental technologies and in the pharmaceutical
industry with the incorporation of active principles that are the base of new products. It has
shown that the halophilic microorganisms have a high capability of bioremediation, due to
they can be used as catalysts in different process in which need extreme conditions to recu-
perate efficiently polluted environments.

Key words: Halophilic, Biotechnology, Bioremediation.


Revista Sistemas Ambientales, Vol. 4, No 2, 2011, p. 45-56

INTRODUCCIÓN A
Los ambientes hipersalinos acuáticos en los que la
concentración de sal supera la del agua de mar
(3.5% de sales totales) pueden ser de origen natu-
ral, pero también pueden ser de origen artificial
como las salinas construidas por el hombre para la
obtención de sal. Por otra parte, la mayoría de las
salinas están ubicadas en la costa, ya que la sal se
obtiene por la evaporación del agua de mar, tal es
B
el caso de las salinas de Bras del Port en Santa Pola,
Alicante (España); existen también salinas
terrestres en las que las salmueras o aguas saladas
proceden ríos o lagos, un ejemplo de este tipo son
las salinas de Maras de la provincia de Urubamba,
Cusco (Perú), las cuales son denominadas ―estan-
que múltiple‖, debido a que las salmueras se dis-
Figura 1. Ambientes Salinos. Salar de Atacama,
tribuyen en un conjunto de balas de evaporación.
Chile (A). Zapotitlán de las Salinas, México (B).
Este tipo de salinas son útiles para realizar estu-
En la actualidad está creciendo el interés por co-
dios sobre la diversidad de los microorganismos
nocer mejor la diversidad de microorganismos
halófilos, ya que en ellas se encuentran multitud
halófilos y cada vez es mayor el número de inves-
de ambientes con distintos grados de salinidad
tigaciones relacionadas con el tema ya que estos
(Meseguer-Soria, 2004).
organismos producen una amplia variedad de
El salar de Uyuni en Bolivia y el de Atacama en metabolitos secundarios estables que pueden tener
Chile son ejemplos muy conocidos por su gran aplicaciones prácticas (González-Hernández y
extensión y alto contenido de litio. Peña, 2002; Podar y Reysenbach, 2006).

En México existen algunas salinas que han sido Generalidades de los Microor-ganismos Halófi-
utilizadas desde tiempos prehispánicos para la los
obtención de sal (Figura 1). Estos ambientes son
ricos en microorganismos halófilos con gran po- Los microorganismos pertenecientes a la familia
tencial biotecnológico poco explorado. Las aplica- Halobacteriaceae abundan en salinas y lagos
ciones biotecnológicas de los microorganismos hipersalinos, ambientes bajo los cuales muy pocos
extremófilos halófilos son diversas entre las cuales seres vivos pueden crecer. Una característica fun-
se pueden citar: producción de alimentos fermen- damental de los miembros de esta familia es que
tados, producción de salsa de soya, colorantes, son halófilos obligados, necesitando concentra-
extremozimas resistentes a altas concentraciones ciones de NaCl mayores de 1.5 M para crecer,
de sal (amilasas, proteasas, etc.), aditivos utiliza- además, toleran bastante bien las temperaturas
dos en cosméticos, plásticos biodegradables y elevadas, ya que los ambientes que habitan, por la
producción de agentes gelificantes como exopoli- posición geográfica y por tratarse de aguas estan-
sacáridos (EPS). cadas, suelen ser lugares muy cálidos con tempe-
(http://cbt.fcyt.umss.edu.bo/trabajo/verarticulo.ph raturas que pueden llegar a mas de 50°C
p?cod_art=5 (http://www.lluisvives.com/servlet/SirveObras/01
593741546702713008813/012969_2.pdf). Algu-
nos estudios han demostrado que los microorga-
nismos halófilos cuentan con estrategias que les
permiten enfrentar el estrés osmótico manteniendo
altas concentraciones intracelulares de sal y sinte-
Aplicaciones biotecnológicas de microorganismos halófilos Castillo y Barragán

tizando solutos compatibles que les permiten en un factor limitante para el desarrollo de estos
balancear su presión osmótica (González- microorganismos. Un detalle importante que se
Hernández y Peña, 2002).Las arqueas halófilas debe resaltar es que aunque los halófilos son orga-
son básicamente heterótrofas aerobias, muchas de nismos quimioheterótrofos, se han descrito casos
estas especies pueden crecer en medios inorgáni- de fijación de CO2 (Oren, 2002).
cos con un solo compuesto orgánico como fuente
de carbono. Debido a las altas concentraciones de En la tabla 1 se presentan algunos de los géneros
sal y a las elevadas temperaturas de las salinas, la de los microorganismos considerados como haló-
solubilidad de oxígeno es muy baja convirtiéndose filos.

TABLA 1. MICROORGANISMOS HALÓFILOS

Dominio Género Referencia


Arquea Halobacterium sp. Oren, 1999
Methanohalobium sp. Zhilina y Zavarin, 1987
Methanohalophilus sp. Paterek y Smith, 1988
Bacteria Acetohalobium sp. Zhilina y Zavarin, 1990
Halorhodospira sp. Imhoff y Süling, 1996
Actinopolyspora sp. Skerman et al., 1980
Salinibacter sp. Antón et al., 2002
Halanaerobium sp. Rainey et al., 1995
Halothermothrix sp. Rainey et al., 1995
Halocella sp. Rainey et al., 1995
Halobacteroides sp. Rainey et al., 1995
Haloanaerobacter sp. Rainey et al., 1995
Salibacillus sp. Mota et al., 1997
Halobacillus sp. Mota et al., 1997
Marinococcus sp. Mota et al., 1997
Salinococcus sp. Mota et al., 1997
Tetragenococcus sp. Mota et al., 1997
Halomonas sp. Vreeland et al., 1980
Chromohalobacter sp. Ventosa et al., 1989
Salipiger sp. Martínez-Cánovas et al., 2004
Palleronia sp. Martínez-Checa et al., 2005
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Producción de Enzimas regeneración de proteínas desnaturalizadas, para la


estabilización de proteínas, para la producción de
Los biotecnólogos han explotado a los extremófi- proteínas recombinantes y para la producción de
los como fuente de enzimas denominadas extre- importantes sustancias inmunosupresoras y fi-
moenzimas (Hendry, 2006), las cuales ofrecen siológicamente activas (Margesin and Schinner,
nuevas oportunidades para biocatálisis y biotrans- 2001).
formaciones como resultado de su extrema estabi-
lidad (Hough y Danson, 1999). Las bacterias haló- Producción de Biopolímeros
filas moderadas crecen óptimamente en un rango
de salinidad de 0.5 a 2.5 M; además producen una Los microorganismos halófilos tienen la capaci-
serie de enzimas hidrolíticas extracelulares tales dad de producir biopolímeros de diferentes clases
como: amilasas, proteasas, lipasas, nucleasas y ente los cuales encontramos: exopolisacáridos,
esterasas (Margesin and Schinner, 2001; Ventosa biosurfactantes, liposomas, lectinas y bioplásticos.
et al., 2005). En los últimos años, el interés por el Los exopolisacáridos (EPS) son biopolímeros
estudio de estas enzimas se ha incrementado debi- producidos extracelularmente por bacterias halófi-
do a sus propiedades catalíticas y potencial de las, teniendo aplicaciones en la industria alimenta-
aplicación industrial en la formulación de deter- ria, farmacéutica y en procesos de biodegradación
gentes, elaboración de productos dietéticos, proce- (http://cbt.fcyt.umss.edu.bo/trabajo/verarticulo.ph
samiento de cuero, papel y alimentos cárnicos, así p?cod_art=5). Los exopolisacáridos sulfatados son
como también en la síntesis de enantiómeros puros poco frecuentes entre los exopolisacáridos de
de fármacos, biodegradación de residuos tóxi- cos y origen microbiano, sin embargo, algunos microor-
contaminantes industriales, entre otros (Ven- tosa et ganismos halófilos estudiados sintetizan políme-
al., 2005; Sánchez-Porro et al., 2003). ros en cuya composición se detectan grupos sulfa-
to. Una de las ventajas de estos exopolisacáridos
Aunque el potencial de las halobacterias para es que tienen actividad moduladora de la prolife-
catalizar reacciones bajo condiciones extremas de ración de distintos tipos celulares, entre ellos
sal es bien conocido, hasta ahora no hay muchos células tumorales y bloquea la entrada de células
reportes de su aplicación en forma inmovilizada, virales en células hospederas, además, los exopo-
debido a que estas células son muy frágiles y se lisacáridos le dan la capacidad a las células bacte-
lisan con la disminución de sal en el medio exter- rianas de formar biofilms permitiéndoles la ad-
no; sin embargo, se ha observado que la produc- hesión a diferentes superficies.
ción de α-amilasa por parte de microorganismos
halófilos se ha logrado mantener durante 45 días, Otras de las ventajas que le conceden los exopoli-
inmovilizando los microorganismos en perlas de sacáridos a las bacterias halófilas es la capacidad
alginato y películas de alcohol polivinílico (Bagai de captar metales pesados, su actividad viscozante
and Madamwar, 1996). y emulgente, adicionalmente algunos exopolisacá-
ridos pueden ser fuentes de oligosacáridos ricos en
Las hidrolasas producidas por microorganismos fucosa, presentando potenciales aplicaciones en
halófilos han sido usadas en la industria farmacéu- cosmética y medicina (Mata-Gómez, 2006).
tica para la elaboración de algunos medicamentos
como antibióticos, hormonas y pesticidas (Joshi et El exopolímero poli(γ-D-ácido glutámico) (PGA)
al., 2000: Sudge et al., 1998), también han sido puede ser usado como un espesante, humectante,
usadas para el tratamiento de superficies marinas material de liberación sostenida, o portador de
contaminadas con petróleo (Stosz et al., 1995). medicamentos biodegradable en la industria far-
Algunas celulasas haloestables han sido aisladas macéutica o alimentaria (Kunioka, 1997).
de Salinovibrio sp. (Wang, et al, 2009). Por otro
Los biosurfactantes mejoran la remediación de
lado, se han caracterizado isomerasas termoesta-
suelo y agua contaminados con aceite, disminuyen
bles que permiten que la manipulación del DNA sea
la tensión superficial, incrementan la solubilidad y
más conveniente y eficiente; la Peptidil prolil cis-
movilidad de hidrocarburos hidrofóbicos, promo-
trans isomerasa (PPIasa) ha sido usada para la
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viendo la degradación (Figura 2). Los microorga- Biotecnología Alimentaria


nismos halófilos o halotolerantes productores de
biosurfactantes podrían jugar un papel importante Los microorganismos halófilos juegan un impor-
en la acelerada remediación de medios ambientes tante papel en los procesos de fermentación que
salinos contaminados con aceite (Margesin and ocurren en presencia de sal; estos microorganis-
Schinner, 2001). mos catalizan la fermentación y generan los co m-
puestos encargados de dar características de sabor,
consistencia y aroma a los productos resultantes,
adicionalmente los microorganismos halófilos
producen compuestos que pueden servir como
control de microorganismos no deseados (Marge-
sin and Schinner, 2001).

Los microorganismos halófilos han sido usados


para la producción de suplementos alimenticios y
colorantes para alimentos; una alternativa promi-
soria para la producción de ácidos grasos poliinsa-
turados de cadena larga, son las bacterias marinas,
Figura 2. Producción de emulsificantes del petró-
las cuales permiten procesos de purificación con-
leo por bacterias halófilas aisladas en el Departa-
vencionales, rápidos rangos de producción y
mento de ISA-ENCB (Foto: Mónica Benítez)
buena consistencia del producto y rendimiento. En
Se ha aplicado la gelificación de exopolisacáridos el caso de los colorantes, los β-carotenos son usa-
bajo condiciones alcalinas para remover coloran- dos en la industria de alimentos como colorantes
tes de efluentes textiles (Margesin and Schinner, naturales, como precursores de la vitamina A,
2001). como aditivos en cosméticos, preparaciones mul-
tivitamínicas, y productos saludables.
Los liposomas son usados en medicina y cosméti-
cos para el transporte de compuestos a sitios es- Se ha reportado que las bacterias halófilas extre-
pecíficos en el cuerpo. Lípidos vinculados al éter mas tienen un óptimo crecimiento y un buen ren-
de arqueas halófilas tienen una alta estabilidad dimiento en la producción de carotenoides en
química y resistencia contra las esterasas y por lo presencia de 25% de NaCl (Margesin and Schin-
tanto más alto rango de supervivencia que los ner, 2001).
liposomas basados en derivados de ácidos grasos
(Margesin and Schinner, 2001).

Las lectinas, proteínas selectivas unidas a azúcar,


son herramientas útiles para la investigación de la
superficie celular y marcadores celular.

Son usadas como marcadores de las modificacio-


nes de la superficie celular para la detección de
células malignas (Margesin and Schinner, 2001).

Las bacterias halófilas también han sido usadas


para la producción de bioplásticos, los polihi-
droxialcanoatos (PHA) son compuestos bacteria-
nos acumulados intracelularmente. Figura 3. Pigmentos naturales en los alimentos

Como plásticos biodegradables podrían reempla- Bioremediación


zar termoplásticos derivados del aceite en algunos
campos (Margesin and Schinner, 2001).
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La presencia de sodio y condiciones salinas en los


suelos, interfiere en el crecimiento adecuado de la
mayoría de los cultivos y por lo tanto constituye
uno de los problemas más serios que enfrenta la
agricultura sostenible en todo el planeta. La FAO
y la UNESCO calculan que el área total de suelos
salinos en el mundo es de 397 millones de hectá-
reas y los suelos sódicos corresponden a 434 mi-
llones de hectáreas (Oldeman, 1991; Brandt and
Thornes, 1996; FAO, 2000; FAO, 2002). La recu- Figura 4. Degradación de Naranja II por halófilos
peración de los suelos sódicos se ha hecho princi- aislados en el Departamento de ISA-ENCB (Foto:
palmente cambiando el sodio en complejo coloidal Laura Castillo).
por otro catión, aplicando principalmente sales
solubles de calcio ó sales de calcio con baja solu- Se han aislado bacterias halófilas capaces de de-
bilidad (cal agrícola), siendo esta una opción cos- gradar compuestos orgánicos halogenados como
tosa, Sánchez-Leal y Arguello- Arias, (2006) tricloroetileno, los cuales son de gran importancia
proponen una alternativa en la cual algunas bacte- debido a su persistencia y toxicidad (Fuse, 1998).
rias halófilas son capaces de capturar sodio in
Algunos autores han aislado bacterias halófilas
vitro y pueden ser posiblemente utilizadas en un
capaces de degradar lindano, DDT y 2,4-D (Oes-
biorreactor para la bioremediación de suelos sódi-
terhelt et al., 1998; Maltseva et al., 1996).
cos y salinos, formando un consorcio entre bacte-
rias autóctonas y bacterias a las cuales se les ha Conclusiones.
comprobado su capacidad de capturar sodio.
Los microorganismos halófilos presentan un gran
Se han aprovechado la habilidad de microorga- potencial de aplicación en diferentes campos de la
nismos halófilos/ halotolerantes de utilizar aminas biotecnología, el uso de microorganismos para la
aromáticas como una fuente de carbono y energía degradación de contaminantes es un campo de
( Li et al, 2010) y se ha comprobado que crecen investigación en desarrollo. El uso de microorga-
sobre compuestos aromáticos (Cuadros- Orellana nismo para la obtención de metabolitos o enzimas
et al, 2006; Arulazhagan and Vasudevan, 2009; Li presenta ventajas biotecnológicas debido a que las
et al 2006; Peyton et al, 2006 ). Asimismo se han condiciones extremas requeridas para su creci-
desarrollado procesos para el tratamiento biológi- miento impiden los problemas de contaminación
co eficiente de ecosistemas contaminados con inherentes a los procesos fermentativos.
productos del petróleo en presencia de sal (Betan-
cur-Galvis et al, 2006). Agradecimientos.
Existen algunos reportes sobre la capacidad de los Este trabajo forma parte de las actividades enmar-
microorganismos halófilos para degradar coloran- cadas en el proyecto SIP 20110775 del Instituto
tes textiles (Kolekar et al, 2008). En el Laborato- Politécnico Nacional.
rio de Residuos Peligrosos hemos realizado el
aislamiento de microorganismos halófilos a partir
de ambientes salinos ubicados en Chile y México
(Figura 4).
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