PRACTICA N° 6

DETERMINACIÓN DE Zn EN CONSERVAS DE PESCADO POR ABSORCIÓN

ATÓMICA EN LLAMA
I. OBJETIVOS.
- Determinar Zn en Conservas de Pescado por Absorción Atómica.

II. FUNDAMENTO TEORICO

La radiación electromagnética es una clase de energía que se transmite por el espacio a enormes
velocidades. Cuando esta radiación pasa a tr"3vés de una capa de un sólido, líquido o gas, pueden
ocurrir fenómenos de absorción, emisión, fosforescencia, fluorescencia y otros; en la técnica de
Espectroscopia de Absorción Molecular o Atómica se busca que ocurra ABSORCION, proceso en el
que la energía electromagnética se transfiere a las moléculas, iones o átomos constitutivos de la
muestra.

En Espectroscopia de Absorción Atómica, la muestra se vaporiza a muy altas temperaturas,

atomizando la muestra y el analito de interés; las concentraciones de átomos seleccionados se
determinan midiendo la absorción de sus longitudes de onda característicos. Para tal efecto se
utiliza un Espectrofotómetro de Absorción Atómica.

Ahora cuando se desea analizar un metal a nivel de trazas, normalmente se utiliza una técnica
espectroscópica atómica; por ejemplo, la absorción o la emisión atómica con llama. En este caso,
la propiedad medida es la Absorción de la radiación, a la longitud de onda adecuada de los
átomos presentes en el camino óptico, o bien la emisiones de los átomos excitados en la llama.

Para realizar un análisis empleando la técnica de absorción atómica, la muestra (normalmente en

disolución) es introducida convenientemente en diferentes fuentes caloríficas (generalmente una
llama). Después de la evaporación del disolvente, la llama proporciona suficiente energía para
disociar los enlaces químicos y liberar átomos metálicos en estado fundamental que absorben
radiación electromagnética de una longitud de onda característica en cada caso. La banda de
longitudes de onda a la que absorbe cada elemento es estrecha y prácticamente única. Los
átomos no excitados absorben luz y sus electrones de valencia pasan al estado excitado. Como
resultado de esta absorción se produce una disminución de la intensidad de la radiación inicial. La
cantidad de radiación absorbida a través de la llama (camino óptico) será proporción a la cantidad
de átomos del elemento en la misma. (Ley de Lamber y Beer).

Dentro de la flama hay muchos más átomo en el estado fundamental que en el estado excitado.
Por ejemplo, para el Calcio, en una llama de 2000°K hay 1,2X107 átomos en el estado fundamenta!
por cada átomo en el estado excitado; para el Zn hay 7,3X1015 átomos en el estado fundamental
por cada átomo en el estado excitado. Aproximadamente unos 65 elementos se pueden
determinar con gran sensibilidad y precisión empleando la técnica de espectroscopia de
Absorción Atómica.
Un espectrofotómetro de absorción Atómica de llama consta de la siguiente instrumentación
básica necesaria para poder realizar medidas de absorción:

 Fuente de radiación
 Sistema de Nebulizador-atomizador
 Monocromador
 Detector

Las fuentes de radiación empleadas en el Espectrofotómetro de Absorción Atómica deben

originar una banda estrecha de intensidad adecuada y estabilidad suficiente durante periodos de
tiempo prolongados. Las más comúnmente utilizadas son las lámparas de cátodo hueco. Estas
lámparas están constituidas por un cátodo metálico (por ejemplo Zn) capaz de emitir radiaciones
de las mismas longitudes de onda que son capaces de absorber los átomos del elemento que se
desea analizar. En algunas ocasiones los cátodos están formados por más de un elemento^ de
manera que se pueden utilizar para su determinación sin necesidad de cambiar la lámpara; sin
embargo puede perderse algo de sensibilidad por lo que debe preferirse las lámparas
individuales.

El Nebulizador y el sistema atomizador suelen estar integrados en uno, especialmente en los

equipos de absorción atómica. En este sistema, la disolución de la muestra (o parte de ella) es
inicialmente aspirada y dirigida como una fina niebla hacia la llama (atomizador), lugar donde se
forman los átomos en estado fundamental. Para obtener la llama se requiere un combustible (por
ejemplo acetileno) y un oxidante (por ejemplo: aire).

La óptica de un espectrofotómetro de absorción atómica es similar a la de cualquier otro

espectrofotómetro. El monocromador (prismas, redes de difracción) permite seleccionar una de
las longitudes de onda que proceden de la emisión de la fuente. Parte de la radiación no
absorbida es dirigida hacia el detector (por ejemplo, un fotomultiplicador), cuya misión es
transformar la energía radiante no absorbida en una corriente eléctrica, que una vez procesada es
presentada al analista de diferentes maneras (por ejemplo, unidades de absorbancia).

Calibrado analítico: Sensibilidad y Límite de Detección

La representación gráfica de Absorbancia en función de la concentración, a una longitud de onda

dada (correspondiente normalmente a la línea de emisión más intensa de la lámpara) producida
por una serie de patrones de concentración conocida, constituye la denominada curva de
calibrado o calibrado externo. Esta representación será una recta si se cumple la ley de Lambert-
Beer, sin embargo muchas veces se curva debido a que se producen desviaciones de dicha ley,
motivadas por diferentes razones, por ejemplo, por las características de la fuente o las
propiedades de la llama.

La sensibilidad y el límite de detección son dos términos asociados a la línea de calibrado que se
emplean para describir cuantitativamente las prestaciones de un instrumento de absorción
atómica. La sensibilidad se define corno la concentración del elemento en disolución acuosa que
origina una absorción del 1% o una absorbancia de 0.0044 y también como pendiente de la línea
de calibrado. El límite de detección será la concentración que origina una señal equivalente a tres
veces la desviación estándar de 10 disoluciones del blanco.
La sensibilidad varía en función de numerosos factores que afectan al número de átomos que se
forman en la llama. Son principalmente ¡os siguientes:

1. La velocidad de aspiración del material en la llama: este factor depende de la presión del
gas y algunas veces de la viscosidad.
2. Viscosidad del material que se analiza: si la disolución de la muestra no ha sido buena, la
velocidad del flujo y de aspiración será lenta.
3. Disolvente: algunos disolventes orgánicos aumentan la absorbancia por un factor de dos a
cuatro. Ello se debe a que mejoran la eficiencia de aspiración, ya que sus tensiones
superficiales son menores que las del agua.
4. Tensión superficial del disolvente: una baja tensión superficial del disolvente favorece la
formación de gotas más pequeñas, que facilitan el que mayor cantidad de muestra
alcance la llama.

El porcentaje de átomos que se encuentran en el estado fundamental depende de la temperatura

de la llama. Ocasionalmente hay elementos interferentes que previenen la formación de átomos
en el estado fundamental. Algunas veces ele elemento a determinar forma complejos estables en
la llama que no se disocian a la misma temperatura que los estándares de calibración, idealmente,
los estándares, para la calibración deben ser lo más parecidos posibles a la matriz a analizar. En
caso de que esto no sea posible debe emplearse el método de adiciones estándar.

Por otra parte las determinaciones en absorción atómica estén sujetas a numerosas
interferencias. Las principales son:

1. Emisión Molecular de óxidos metálicos y compuestos refractarios.

2. Dispersión de radiación o absorción por parte de las partículas sólidas o gotas del
disolvente no vaporizado.
3. Interferencias debidas a la presencia de muchos átomos ionizados, especialmente en
llamas calientes. La formación de iones en lugar de átomos origina una disminución de la
absorbancia.
4. Formación de compuestos Refractarios:
a) Los aniones de la muestra puedan reaccionar con el elemento a determinar originando
un compuesto refractario y una disminución de la absorbancia.
b) Los elementos de la muestra reaccionan con el oxígeno o los iones hidróxido de la llama
originando una disminución del número de átomos.

III. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL.

3.1. MATERIALES Y REACTIVOS.
 Espectrofotómetro de Absorción  Agua destilada
Atómica Shimatsu 6701  Picetas
 Balanza Analítica  Cocinilla eléctrica
 Mufla u Horno eléctrico  Ácido Nítrico cc
 Matraces Aforados  Ácido Clorhídrico 6M
 Equipo de filtración  Nitrato de zinc o cloruro de zinc
 Crisoles de Porcelana  Conserva de pescado
Imágenes
3.2. CURVA DE CALIBRACION

3.2.1. Preparar una solución stock de 1000 ppm de zinc a partir de Zn metálico Q.P o a partir de
la sal seleccionada.

3.2.2. Preparar 100 ml de las soluciones estándares de 0,1; 0,2; 0,4; 0,5 ppm de Zinc

Por diluciones sucesivas a partir de la solución stock de 1000 ppm de zinc preparar las soluciones
estándares requeridas.

CALCULOS

𝐶1 × 𝑉1 = 𝐶2 × 𝑉2 𝐶1 × 𝑉1 = 𝐶2 × 𝑉2

0.1 × 100 = 1000 × 𝑉2 0.2 × 100 = 1000 × 𝑉2

𝑉2 = 0.01 𝑉2 = 0.02
 𝐶1 × 𝑉1 = 𝐶2 × 𝑉2 𝐶1 × 𝑉1 = 𝐶2 × 𝑉2

0.4 × 100 = 1000 × 𝑉2 0.5 × 100 = 1000 × 𝑉2

𝑉2 = 0.04 𝑉2 = 0.05

3.3. TRATAMIENTO DE LA-MUESTRA

 En un crisol de porcelana, pesar aproximadamente 5gr de conserva de pescado,

 Poner la muestra en mufla a 600 por espacio de 2horas aproximadamente.
 Retirar la muestra de la mufla y añadir 10mI aproximadamente de HCI
 Calentar para disolver las cenizas.
 Filtrar en fiola de 100mI
 Luego del filtrado, llevar a volumen con agua destilada.
 Seguir el procedimiento de encendido, calibración instrumental y lectura absorbancia
y/o concentración utilizando la flama de aire acetileno.
 Anotar las condiciones analíticas instrumentales.
 Realizar el cálculo para expresar el contenido de Zn en mg/100g de muestra.

IV. CALCULOS Y EXPRESION DE RESULTADOS

Análisis: Determinación de Zn en conservas de pescado

Método: Absorción Atómica en llama
Muestra: Conserva de pescado - Grated de Sardina
Procedencia: Grupo Gloria S.A.
Mesa 1:

Peso del crisol= 38,4507 gr

Peso de la muestra = 5,037 gr
Zn= 0,4301

0,431 mg 1000ml
x 100ml

X= 0,0431mg

Entonces en una muestra de 5,037 gramos habrá:

0.0431𝑚𝑔 𝑚𝑔
𝑥100𝑔𝑟 = 0,856
5,037 𝑔𝑟 100 𝑔𝑟 𝑑𝑒 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑒𝑟𝑣𝑎

Mesa 2:

Peso del crisol= 35,0930 gr

Peso de la muestra = 5,0415 gr
Zn= 0,3840

0,3840 mg 1000ml
x 100ml
 X= 0,0384mg

Entonces en una muestra de 5,037 gramos habrá:

0.0384𝑚𝑔 𝑚𝑔
𝑥100𝑔𝑟 = 0,762
5,0415 𝑔𝑟 100 𝑔𝑟 𝑑𝑒 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑒𝑟𝑣𝑎

Mesa 3:

Peso del crisol= 17,8691 gr

Peso de la muestra = 5,0151gr
Zn= 0,3851

0,3851 mg 1000ml
x 100ml

X= 0,03851mg

Entonces en una muestra de 5,037 gramos habrá:

0.03851𝑚𝑔 𝑚𝑔
𝑥100𝑔𝑟 = 0,768
5,0151 𝑔𝑟 100 𝑔𝑟 𝑑𝑒 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑒𝑟𝑣𝑎

4.1. TABLA DE RESULTADOS.

Muestra 1

Absorbancia Conc.(ppm)
Agua destilada -0.0467 0.000
Muestra 1 0.1600 0.4386
Muestra 1 0.1599 0.4382
Muestra 1 0.1607 0.4404
Promedio 0.1602 0.4391
Muestra 2

Absorbancia Conc.(ppm)
Muestra 2 0.1398 0.3831
Muestra 2 0.1403 0.3847
Muestra 2 0.1413 0.3874
Promedio 0.1405 0.3851

Muestra 3

Absorbancia Conc.(ppm)
Muestra 3 0.1363 0.3737
Muestra 3 0.1424 0.3903
Muestra 3 0.1416 0.3881
Promedio 0.1401 0.3840
4.1.1. Curva de Calibración

𝑨𝒃𝒔 = 𝟎. 𝟑𝟔𝟒𝑪𝒐𝒏𝒄 + 𝟎. 𝟎𝟎𝟎

𝑪𝒐𝒓. 𝑪𝒐𝒆𝒇. [𝒓] = 𝟎. 𝟗𝟗𝟗𝟎𝟖

TABLA DE REFERENCIA
N° de Concentración
Absorbancia
Muestra (ppm)
1 0,100 0,0678
2 0,200 0,1257
3 0,400 0,2556
4 0,600 0,3874
Fuente: Laboratorio Análisis instrumental

GRAFICA DE CURVA DE CALIBRACION

Abs vs Concentración
y = 0.0879x
0.45 R² = 0.93
0.4
0.35
Absorbancia

0.3 0,0678 0,1257

0.25 0,2556 0,3874
0.2
0.15
0.1
0.05 Linear (0,0678
0,1257 0,2556
0
0,3874)
0.1 0.2 0.4 0.6
Concentración (ppm)
TABLA DE REFERENCIA
N° de Concentración
Absorbancia
Muestra (ppm)
1
2
3
4
Fuente: Elaboración propia

GRAFICA DE CURVA DE CALIBRACION

En cada caso determinar la expresión de la recta, coeficiente de correlación y pendiente.

Explicar cuál es el significado de la pendiente.
Si realizó la curva de calibración explicar las diferencias con la curva de calibración de referencia.

4.1.2. Concentración de Zinc en la muestra de conserva de pescado

Concentración Concentración
N° de (ppm) en mg de zinc
Muestra lectura de por 100g de
solución conserva
1 0.4301 0,872
2 0.3851 0,762
3 0.3840 0,768
4
Fuente: Elaboración propia

CALCULOS

4.1.3. Aplicación de la ley de Lambert y Beer

Absortividad
N° de Concentración Concentración
Absorbancia Molar
Muestra (ppm) (mol/Lt)
Específica (E)
1 0.4391 6.7161 × 10−6 0.1602 0.3648
2 0.3851 5.8901 × 10−6 0.1405 0.3648
3 0.3840 5.8734 × 10−6 0.1401 0.3648
4
Fuente: Elaboración propia

Concentración Concentración
Absortividad
(ppm) en mg de zinc
N° de Muestra Molar A b
lectura de por 100g de
Específica
solución conserva
1 0.3648 0.1602 0.3648 0.4391 8.7173mg
2 0.3648 0.1405 0.3648 0.3851 7.6385mg
3 0.3648 0.1401 0.3648 0.3840 7.6568mg
4
Fuente: Elaboración propia
Hacer los cálculos correspondientes, establecer las diferencias logradas y las limitaciones
encontradas.

CÁLCULOS

𝑨= 𝜺×𝒃×𝒄

Despejamos:

𝐴
=𝜀
𝑏×𝑐

Muestra 1: Muestra 2: Muestra 3:

0.1602 0.1405 0.1401
=𝜀 =𝜀 =𝜀
1 × 0.4391 1 × 0.3851 1 × 0.3840

𝜀 = 0.3648 𝜀 = 0.3648 𝜀 = 0.3648

Hallamos la concentración (mol/Lt)

𝑚𝑔𝑟 𝑔𝑟 1𝑚𝑜𝑙 𝑚𝑜𝑙
0.4391 𝑙𝑡
× 1000𝑚𝑔𝑟 × 65.38𝑔𝑟 = 6.7161 × 10−6 𝑙𝑡

𝑚𝑔𝑟 𝑔𝑟 1𝑚𝑜𝑙 𝑚𝑜𝑙

0.3851 𝑙𝑡
× 1000𝑚𝑔𝑟 × 65.38𝑔𝑟 = 5.8901 × 10−6 𝑙𝑡

𝑚𝑔𝑟 𝑔𝑟 1𝑚𝑜𝑙 𝑚𝑜𝑙

0.3840 𝑙𝑡
× 1000𝑚𝑔𝑟 × 65.38𝑔𝑟 = 5.8734 × 10−6 𝑙𝑡

Masa de conserva mesa 1 Masa de conserva mesa 2 Masa de conserva mesa 3

5.0371g 5.0415g 5.0151g

Concentración mg de zinc por 100g de conserva:

Mesa 1: Mesa 2: Mesa 3:

Peso del crisol= 38,4507 gr Peso del crisol= 35,0930 gr Peso del crisol= 17,8691 gr
Peso de muestra = 5,037 gr Peso de muestra= 5,0415gr Peso de muestra= 5,0151gr
Zn= 0,4301 Zn= 0,3840 Zn= 0,3851

Mesa 1: Mesa 2: Mesa 3:

5.0371 0.4391mg 5.0415 0.3851mg 5.0151 0.3840mg
100 × 100 × 100 ×

X=8.7173mg X=7.6385mg X=7.6568mg

V. ANÁLISIS DE RESULTADOS

De acuerdo a la tabla de composición por 100 gramos de porción comestible para el Zn es

de 0.9 y comparando con nuestros resultados no hay mucha variación ya que estos
oscilan entre 0.7 y 0.9
VI. CONCLUSIONES

Se concluye que la presencia de Zn por cada 100 gramos es de 0.9 (ver tabla anterior). Nuestros
resultados obtenidos fueron de 0.7 y 0.9, ello no hace inferir que la muestra usada se encuentra
dentro de la norma.

VII. RECOMENDACIONES

La calcinación debe realizarse a una temperatura de 600°C en un tiempo de 2 horas a una

temperatura constante.

La muestra una vez calcinada debió ser tratada inmediatamente y así evitar que ésta absorba
humedad del medio ambiente.