PRACTICA 3

EXTRACCION DE DNA
I. INTRODUCCION
Los ácidos nucleicos son macromoléculas de suma importancia biológica. Todos los
organismos vivos contienen ácidos nucleicos en forma de acido desoxiribonucleico (ADN)
y acido ribonucleico (ARN). Algunos virus solo contienen ADN, mientras otros solo
poseen ARN.
El ADN constituye el depósito fundamental de la información genética. Esta información es
copiada o transcripta en las moléculas de ARN, cuyas secuencias de nucleótidos contienen
el código para las secuencias especificas de aminoácidos. Entonces se produce la síntesis de
proteínas, en un proceso llamado de traducción del ARN. Esta serie de fenómenos ha
recibido el nombre de dogma central de la Biología Molecular, que puede resumirse de la
siguiente manera:

En las células superiores el ADN se halla principalmente en el núcleo integrando los

cromosomas. Una pequeña cantidad se halla en el citoplasma, dentro de las mitocondrias y
los cloroplastos. El ARN se localiza tanto en el núcleo donde se forma, como en el
citoplasma, donde tiene lugar la síntesis proteica.
Toda la vida celular actual almacena su información en código de tripletes en moléculas de
DNA lineales o circulares. Es innegable que se debe tomar en cuenta la estructura así como
la secuencia de nucleótidos o de aminoácidos y la composición del producto del gen para
evaluar las homologías y la magnitud y el significado de la divergencia evolutiva en los
genes y sus productos.
II. OBJETIVOS
- Examinar un extracto crudo de DNA en células hepáticas
- Interpretar el origen del sistema de Información: RNA – DNA
III. MATERIALES
 Que debe traer el alumno: Que proporciona el laboratorio.
1. Hígado de pollo 5. 4 tubos de ensayo en sus gradillas
1. Guantes descartables 6. Agitadores de vidrio con ganchos en
2. Colores las puntas
3. 10 ml de alcohol de 95% 7. Pipetas
helado 8. Mortero de porcelana
4. Detergente Lava (que 9. Centrífuga 5 600 RPM
contenga lauril sulfato de 10. Microscopio
sodio)

IV. PROCEDIMIENTO
1. 10 gr de hígado molido en mortero y transferido a un vaso de precipitado con 10 ml de
solución de lauril sulfato de sodio al 5%. Esta mezcla debe haberse agitado
suavemente durante 1 hora, antes de centrifugarse por 10 minutos a 3500 RPM..

2. Vierte 2 ml de sobrenadante del preparado de extracto de hígado en un tubo de ensayo.

3. Agrega poco a poco, 3 ml de alcohol al 95% que haya estado en congelamiento. Si el
procedimiento se realizo como es debido, se habrá formado una capa de alcohol
encima de la capa de extracto.
4. Toma ahora una varilla de vidrio con gancho, introdúcele en el extracto, levantándola
hasta la capa de alcohol frió . Deberá observarse la formación de una pequeña fibra en
el gancho del vidrio.
5.- Por medio de la repetición de este procedimiento es posible extraer una pequeña
cantidad de estas fibras que contienen DNA, RNA y otras sustancias orgánicas y
observar al microscopio (10x, 40x)
 V. RESULTADOS

VI. DISCUSIÓN

1. Cómo describiría la consistencia de este material fibroso?

2. Que indica esto con respecto a la estructura de la molécula de ADN?
3. A que se debe que en este tipo de experimentos los resultados sean casi siempre
mezclas en lugar de sustancias puras?
4. Por que únicamente 20 aminoácidos están incluidos en el código genético cuando
muchos otros no están?

VII. CONCLUSIONES

VIII. REFERENCIA BIBLIOGRAFICA

 PRACTICA 04
CODIGO GENETICO
I. INTRODUCCIÓN
El ADN contenido en el núcleo celular almacena toda la información hereditaria bajo la
forma de genes. Estos elementos para expresarse deben ser copiados en una molécula más
ligera (RNA) mensajero, que sea capaz de llevarlos al citoplasma y conectarse con los
ribosomas, donde se efectuara su traducción en proteínas. Son estas proteínas a su vez las
que van a determinar las características morfológicas y fisiológicas que un organismo uni o
pluricelular presenta.
Teniendo en cuenta que el DNA posee 4 bases nitrogenadas distintas y que por lo menos
existen 20 aminoácidos diferentes capaces de ligarse para formar las proteínas, es evidente
que la traducción está regida por una clave. Por lo tanto, la existencia de caracteres
hereditarios no es sino la expresión de ciertas regiones del DNA a través del Código
Genético. En dicho código consideraremos los siguientes aspectos fundamentales:
a) El RNA m tiene los codones o tripletes de bases, por ejemplo UUU.
b) El RNAt unido a un aminoácido específico lleva el anticodon que debe ser
complementario al codon, por ejemplo: AAA.
c) En general, la última letra del codon no es muy importante para el reconocimiento del
anticodon.
d) Un RNAt específico reconoce su aminoácido, por ejemplo: Nat con anticodon AAA se
une a fenilalanina. ( Phe).
e) Los aminoácidos se ligan uno a uno a medida que aparecen los codones formando una
cadena de proteínas.
f) El proceso se realiza en el citoplasma con la participación de los ribosomas y diversos
elementos esenciales (toda la maquinaria de la síntesis de proteínas).
g) El crecimiento de la cadena continúa hasta que aparezcan codones que indiquen
terminación.
II. OBJETIVOS
El objetivo de la práctica es familiarizar al alumno con el fenómeno de formación de
proteínas como respuesta a una secuencia de codones específicos, que en otras palabras es
la expresión de los caracteres hereditarios, teniendo como punto de partida los genes
contenidos en el DNA.
III.MATERIALES
Grupos de 5 jugadores:
- 9 naipes de cada base nitrogenada ( AGUC), las que serán repartidas entre 3 jugadores.
Cada uno recibirá 12 naipes al azar.
- Una tabla de codones con los aminoácidos específicos que será utilizada por el 4º.
Jugador (Cuadro 1)
- Una baraja de 25 naipes que contengan: 5 Quimiotripsina, 5 Tripsina, 5 Exopeptidasa, 5
Bromuro de cianógeno, 5 Bromosuccinimida, y 15 naipes en blanco, que los tendrá el
5º. Jugador.
IV. PROCEDIMIENTO
Vamos a formar cadenas de proteínas uniendo aminoácidos según los codones que
aparezcan.
El juego se inicia de la siguiente manera:

1. Cada grupo de 5 alumnos nominara a un compañero que pasara a otro en calidad de

juez y será el jugador No. 1.
2. Los jugadores que tienen las bases nitrogenadas barajaran sus cartas y el jugador No.1
depositara la primera que corresponde a una base nitrogenada . Lo mismo harán los
otros dos jugadores, formándose entonces el primer triplete. (Por ejemplo: ACU)
3. El jugador No.4 seleccionara el anticodon respectivo, anotando en una hoja de papel el
No. de la jugada, codon, anticodon y aminoácido.
4. El quinto jugador sacara al azar un naipe de su baraja. Si el naipe es blanco, el juego
continua, si corresponde a los compuestos mencionados anteriormente, cumplirá lo que
indica el naipe de acuerdo al cuadro No.2
5. Si la cadena ha sido cortada , en la siguiente jugada deberá iniciarse otra cadena. Se
continuara con la numeración de la jugada que prosigue.
6. Se deben realizar un total de 100 jugadas , el juego será ganado por el grupo que puede
formar la cadena más larga de proteína.
7. Cada grupo a su vez hará el análisis de la cadena mas larga que logro formar. (Cuadro
No.3)
V. CUESTIONARIO
Haga un resumen de su práctica indicando:
a) Número total de cadenas formadas durante la practica
b) Número de aminoácidos en cada cadena.
Analice y describa las siguientes características de la proteína mas larga que pudo formar.
a) Si se trata de una proteína acida, básica o neutra.
b) Si se trata de una proteína hidrofobica o hidrofilica
Cuál es el codon de iniciación en los procariontes ? explique su rol.
 CUADRO NO.1

CODIG0 GENETICO

U C A G

Fenilalanina Serina Tirosina Cisteina U

U Fenilalanina Serina Tirosina Cisteina C

Leucina Serina PARA PARA A

Leucina Serina PARA Triptofano G

Leucina Prolina Histidina Arginina U

Leucina Prolina Histidina Arginina C

C Leucina Prolina Glutamina Arginina A

Leucina Prolina Glutamina Arginina G

Isoleucina Treonina Asparagina Serina U

A Isoleucina Treonina Asparagina Serina C

Isoleucina Treonina Lisina Arginina A

Metionina Treonina Lisina Arginina G

Valina Alanina Ac.Aspartico Glicina U

G Valina Alanina Ac.Aspartico Glicina C

Valina Alanina Ac.Glutamico Glicina A

Valina Alanina Ac.Glutamico Glicina G

 CUADRO 2

ACCIÓN DE DIVERSOS AGENTES SOPBRE LA CADENA PROTEICA

AGENTE ACCION EN
EL JUEGO

TRIPSINA Enzima proteolitica que Se corta la

ataca uniones Arg. X y Lys cadena
X (siendo X cualquier
aminoácido, menos prolina)
No ataca aminoácido
terminales y se requiere
que la cadena tenga por lo
menos 5 AA)

Quimiotripsina Enzima proteolitica que Se corta la

ataca uniones Trp-X, Tyr-X cadena
y Phe- X (siendo X
cualquier aminoacido,
menos prolina). No ataca
aminoácidos terminales y
se requiere que la cadena
tenga por lo menos 5 AA)

Exopeptidasa Enzima que ataca el Se descuenta

aminoácido Terminal y lo un aminoácido
separa de la proteína y continua el
juego

Bromuro de cianógeno Modifica la metionina Se corta la

cadena

Bromosuccinamida Modifica el triptofano Se corta la

cadena
 CUADRO NO. 3

ALGUNAS CARACTERISTICAS DE LOS AMINOACIDOS

AMINOACIDOS ABREVIATURA PM NATURALEZA QUIMICA

Glicina Gli 75 Neutra hidrofilica

Alanina Ala 89 Neutra hidrofilica

Valina Val 117 Neutra hidrofilica

Leucina Leu 131 Neutra hidrofobica

Isoleucina Ileu 131 Neutra hidrofobica

Serina Ser 105 Neutra hidrofobica

Treonina Thr 119 Neutra hidrofilica

Cisteina Cys 121 Neutra hidrofilica

Metionina Met 149 Neutra hidrofilica

Ac. Aspartico Asn 123 Acida hidrofilica

Asparagina Asn 132 Acida hidrofilica

Ac. Glutamico Glu 147 Acida hidrofilica

Glutamina Glm 146 Acida hidrofilica

Arginina Arg 174 Basica hidrofilica

Lisina Lys 146 Basica hidrofilica

Histidina His 155 Basica hidrofilica

Fenilalanina Fen 165 Neutra hidrofilica

Tirosina Tyr 181 Neutra hidrofilica

Triptofano Trp 204 Neutrahidrofilica

Prolina Pro 115 Neutra hidrofilica