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Es un método para la
multiplicación de Mos a nivel
de laboratorio
Además de conocer los nutrientes
apropiados para el cultivo de
Mos también conviene saber
las condiciones físicas donde
puedan desarrollarse mejor.
1. Temperatura:
El desarrollo de las bacterias
depende de la velocidad de las reacciones
químicas
La T° puede determinar la
velocidad de crecimiento y el g rado
total de desarrollo de los M.O.
Las variaciones en la T° influye
en los procesos metabólicos y en
la morfología celular
CONDICIONES FISICAS NECESARIAS PARA EL DESARROLLO
Aerobios,
(a) Los aerob ios ob li gados crecen
so lo en la superf icie.
cuando en un mismo
medio de cultivo se Representa las
desarrollan diferentes condiciones
tipos de bacterias artificiales para
que pueden tener
aspectos muy
el desarrollo de
diferentes, apariencia un solo tipo de
y características M.O.,
bioquímicas.
son importantes para conocer
las características específicas de
Cada especie
Las
El medio se
mantiene al estado El medio con placas se
liquido
temperatura
a una
de
el inoculo incuban
homogenizado
45°C para permitir
se vierte
en forma
Inoculo que el inoculo se
distribuya en una placa invertida
adecuadamente en
el medio.
petri
Técnica de la placa invertida
Esta técnica se hace de forma cual itat iva o
c uant ita tiva.
C uando se hace de forma cuant itat iva podremo s
d eterm inar e l numero de MOS
Esta técn ica tamb ién usa d iluc iones múl tiples en
tbos
Técnica de diluciones múltiples en tubos
Si no se conoce la magnitud de la población bacteriana
de la muestra
Se necesita hacer d uc
il ones
i en ubos
t para ob ener
t
colonias bien a isladas
1ml 1ml 1ml 1ml 1ml
9 ml
Agar
90 ml de SSP
Muestra 10- 10-2 10-3 10-4 10-5 10-5
1 Agregar con una colonia estéril 1.0 ml o 0.1ml
Después de la
incubación se
examinan las placas
que tengan colonias
aisladas, para aislar
159 17 2 0
cultivos puros.. muchas colonias colonias colonias colonias colonias
mas de 300
S iembra en di luciones mú ltip les en tubos
se examinan las
placas para buscar
las que tengan
colonias aisladas, de
esta placa se
pueden aislar
cultivos puros..
Siembra en diluciones múltiples
aerobios mesófilos
1mi 1m. 1m!
'9 !I'I'Il1IJ
dlihll· ... r.
Muestra
10 ml
SSP
10-1 10-2 10-3 10-4 muestras
10-5
diluidas
0,1ml
Recuento
Diluci6npar. ::t de microorganismos viables
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Tomada de Lim'
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Cuenta en placa
•
Consiste en contar
colonias que se
desarrollan
después de cierto
tiempo
•
presupone que
cada colonia
proviene de un
microorganismo
en la muestra.
Cuenta en placa
•
Consiste en contar
colonias que se
desarrollan después
de cierto tiempo
•
presupone que cada
colonia proviene de
un microorganismo
en la muestra.
– Vertido
– Superficie
AISLAMIENTO POR ACCIÓN TÉRMICA:
5. Tipo de diluyente
Técnicas de enriquecimiento de cultivo.
Sólo crecerán:
Tiempo de T° de Almacenam
M.O. Medio resiembra incubación iento
Salmonella
sp.
Agar cisteína 1 mes 35° 35°C
Bacillus Sp
Agar nutritivo 12 ó más 28° 10°C
Seudomona Sp. Agar nutritivo 3 meses 28° 10°C
Clostridium Sp. 6 meses ó
Carne cocida
más 28° 10°C
2. Preservación de cultivos por
secado rápido en congelación o
liofilización.
La liofilización es el procedimiento más eficaz
para la preservación de cultivos.
3º. Elevación.
Pueden ser muy finas (aplanadas) o gruesas
(elevadas), las colonias elevadas muestran
diferentes grados de convexidad.
Morfología de las colonias
4º. Cromogénesis o
pigmentación.
Las colonias pueden estar coloreadas
(pigmentadas) o sin color no
pigmentado, algunas especies se
caracterizan por lo matices r jo,
amarillo, café, violeta).
Micrococus amarillo