La Columna de Winogradsky

I. OBJETIVO:
 Reconocer e interpretar los diferentes estratos de la Columna de
Winogradsky, en base a su microbiota colonizadora y sus
interrelaciones.

II. FUNDAMENTO TEORICO:

La columna de Winogradsky es una demostración clásica de cómo los
microorganismos que ocupan microespacios altamente específicos de
acuerdo con sus tolerancias medioambientales y sus necesidades vitales.

La columna de Winogradsky es un dispositivo ideado por el microbiólogo

ruso Serguei Winogradsky que consiste en un cilindro de vidrio lleno de agua
con nutrientes, y con fango depositado en el fondo. Incubando este recipiente
bajo la luz solar, o con una bombilla apropiada, se desarrolla con el tiempo
una amplia variedad de microorganismos que aparecen en forma
estratificada en función del gradiente de gases y de sustancias que ellos
mismos crean, formando microambientes oxidantes y reductores a lo largo
de la columna. En las zonas inferiores se forman bandas de microorganismos
anaerobios (ambiente reductor) y en las superiores crecen microorganismos
aerobios (ambiente oxidante).

Además, es un sistema que permite observar en el laboratorio el proceso

evolutivo del microorganismo, es decir, el proceso de adaptación a los
diferentes ambientes empleados diferentes estrategias para la obtención de
energíLa necesidad vital es el requerimiento de carbono y energía e ilustra
como diferentes microorganismos desarrollan sus ciclos, y la
interdependencia que llega a existir entre ellos (las actividades de un
microorganismo permiten crecer a otro y viceversa). Esta columna es un
sistema completo y autónomo de reciclamiento, mantenido sólo por la
energía de la luz. (2) Al pasar algunos días se diferenciación claramente la
formación de tres estratos, se los identifica debido a su color característico,
los cuales presentamos a continuación:
En la zona media, microaerófila, se hayan bacterias oxidado-reductoras aerobias y
bacterias fotosintéticas que usan los compuestos químicos para su metabolismo. Una
capa superior, pueden hallarse organismos aeróbicos como algas verdes eucariotas y
cianobacterias que liberan oxígeno y mantienen esta zona de la columna aeróbica,
dichos organismos crecen rápidamente en esta capa de la columna. Cuadro de
identificación de potenciales microorganismos en base a la coloración de estratos.

Calor Microorganismo
Verde Algas y cianobacterias
Rojo/marrón Cianobacterias o Tiobacilos
Rojo/púrpura Bacterias púrpuras no del azufre
Blanco bacterias sulfo-oxidadoras
Rojo/purpura Bacterias púrpuras de azufre
verde Bacterias verdes del azufre
Negro Bacterias sulfo-reductoras o
fermentadoras

Zonas de la columna de winogradsky:

Zona aeróbica:
Esta es la parte de la columna más rica en oxígeno y más pobre en azufre. El agua de
la parte superior de la columna contiene abundantes poblaciones de microorganismos
aerobios, que aparecen normalmente en hábitats acuáticos ricos en materia orgánica
(estanques poco profundos, arroyos, etc.). Suelen ser microorganismos flagelados, lo
que les permite moverse y establecerse en nuevas áreas, así como microorganismos
fotosintéticos: algas (diatomeas) y cianobacterias filamentosas.

Zona microaerófila:
Es la zona en la que solapan ambos gradientes, el de oxígeno y el de sulfuro de
hidrógeno. Aparecen bacterias oxidadoras del azufre como Beggiatoa, Thiothrix o
Thiobacillus, que usan como fuente de carbono lamateria orgánica, y oxidan el H2S que
llega por difusión desde las capas inferiores a azufre elemental

Zona anaeróbica
Esta zona contiene H2S (procedente del fondo), en la zona anaeróbica
superior predominan las bacterias fotosintéticas anaerobias, y en la columna se
observan unaserie de bandas de colores rojo y verde.
Bacterias rojas no del azufre:
Rhodospirillum, Rhodomicrobium o Rhodopseudomonas, son bacterias anaerobias
fotoorganótrofas, que sólo pueden realizar la fotosíntesis en presencia de una fuente de
carbono orgánico. Forman una capa de color rojo-anaranjado. Las bacterias verdes no
del azufre son termófilas y, por lo tanto, no crecen en la columna a temperatura
ambiente.
- Bacterias rojas del azufre:
(Chromatium,Thiospirillum,Thiocapsa ,forman una capa de color rojo-púrpura) y
bacterias verdes del azufre(Chlorobium,Pelodyctium). Estas bacterias son fotolitótrofas
y realizan una fotosíntesis anoxigénica. Estos microorganismos aparecen como zonas
decrecimiento en el lodo de la columna, pero también pueden desarrollarse en el agua
si los fotótrofos oxigénicos son escasos.
También pueden aparecer bacterias metano génicas que generan CH4, que se observa
como burbujas de gas en el fondo de la columna

La columna de la práctica se enfoca sobre todo al ciclo del azufre, pero se podría
desarrollar igualmente la reproducción de otros ciclos biogeoquímicos equivalentes para
nitrógeno, carbono y otros elementos.
Todas las formas de vida en la Tierra dependen de reacciones de oxidación y reducción
que operan mediante transferencia de electrones. En los sistemas vivos, estas
reacciones redox aparecieron originalmente en microorganismos procariotas y forman
en la actualidad un verdadero circuito electrónico dentro de la biosfera. Para mantener
este circuito vital a nivel planetario se necesita que las sustancias oxidantes y las
reductoras estén de algún modo conectadas, permitiendo la continuidad del
metabolismo global. Las principales vías de conexión que hacen posible el
mantenimiento de este circuito son fundamentalmente de tipo geofísico, como la
atmósfera y los océanos. Los organismos intercambian gases y sustancias con el medio
ambiente, y la evolución de estas reacciones ha modelado en parte la química de la
superficie terrestre.
PROCEDIMIENTO:
1. En el recipiente deben colocar en el fondo una mezcla del fango o lodo
recolectado, junto con las tiras de papel periódico, las hojas secas, procurando
que quedo una capa compacta de todo (sin formación de burbujas). La mezcla
debe ser homogénea y alcanzar una altura de 10 cm.

2. Agregar la puntilla de hierro o el hierro rallado.

3. Agregar cuidadosamente el agua de charca hasta que quedo casi lleno el

frasco, dejando un espacio 4 cm aproximadamente de aire.

4. Disponga el plástico de vinipel para tapar el recipiente y dejar en un sitio donde

recibe abundante luz solar.

5. Permite la incubación y se realiza registros fotográficos observando los

cambios.
III. PROCEDIMIENTO