Informe de Laboratorio Nº _2_

BIOQUÍMICA 2 – Semestre 2009-II

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

FACULTAD DE INGENIERÍA INDUSTRIAL Y DE SISTEMAS
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL

INFORME DE LABORATORIO Nº 2

BIOQUÍMICA 2

TEMA:

_________Extracción de ADN_____

INTEGRANTES:

CÓDIGO APELLIDOS Y NOMBRES CORREO ELECTRÓNICO

2008015460 Peña Moran María Isabel maritza_crazy168@hotmail.com

2008015683 Salome Ordoñes Vanessa vanessalome@hotmail.com

2008003532 Salvatierra Ccachulli Amys Celestina syma_0210@hotmail.com

2008235371 Serrano Yarleque Soraida Brigitte brigitte_1415@hotmail.com

2008013626 Zambrano Sayas Linda Lady adriana_2330@hotmail.com

DOCENTE:

Ing. Guillermo Chumbe Gutiérrez

Semestre 2009 – II

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I. INTRODUCCIÓN

ADN es la abreviatura del ácido desoxirribonucleico (en inglés, DNA). Constituye el

material genético de los organismos. Es el componente químico primario de los
cromosomas y el material del que los genes están formados.

La extracción de ADN requiere una serie de etapas básicas. En primer lugar tienen
que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al
núcleo de la célula. A continuación debe romperse también la membrana nuclear
para dejar libre el ADN. Por último hay que proteger el ADN de enzimas que puedan
degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol.

Por eso que en este informe de laboratorio mostramos, su definición y algunos conceptos y
conocimientos que debemos tener y están relacionados a este tema; y también contiene la
práctica de laboratorio que realizamos y los cálculos correspondientes.

II. MARCO TEÓRICO

ÁCIDOS NUCLEÍDOS
Son moléculas constituidas por C, H, O, N y P. Relacionados con la conservación,
constituye el material genético de los organismos. Es el componente químico
primario de los cromosomas y el material del que los genes están formados. Se
componen de un pequeño grupo de unidades monomericas denominadas
nucleótidos, unidos mediante enlaces covalentes fosfodiester.

Tenemos:

 ARN
 ADN

El ADN:

Esta formado por dos cadenas de polinucleotidos complementarios y dispuestos en

doble hélices sus bases nitrogenadas son adenina, timina, citosina, guanina;
carecen de uracilo.

La complementación de bases se debe a la formación de enlaces tipo puente de

hidrogeno.

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La extracción de ADN de una muestra celular:

Se basa en el hecho de que los iones salinos son atraídos hacia las cargas
negativas del ADN, permitiendo su disolución y posterior extracción de la célula.

Para esto tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para
poder acceder al núcleo de la célula. A continuación debe romperse también la
membrana nuclear para dejar libre el ADN. Por último hay que proteger el ADN de
enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en
alcohol.

III. MATERIALES Y MÉTODOS

MATERIALES Y REACTIVOS:

Para la siguiente determinación se utilizo lo siguiente:

3.1 Materiales
 Gradilla
 Colador o Centrífuga
 Rallador
 mortero

3.2 Muestra
 Cebolla
 Ajos
 Tomate
 Leche

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3.3 Material de vidrio

 Tubos de ensayo
 Varillas de vidrio
 Vasos de precipitado de 150 – 250 ml (12 unidades)
 Pipetas

3. 4 Reactivos
 Agua (destilada o mineral)
 Sal de mesa
 Bicarbonato sódico
 Detergente líquido o champú
 Alcohol isoamílico a 0ºC.

3.5 Equipos
 Nevera
 Balanza analítica

METODOLOGìA:

La extracción de ADN requiere una serie de métodos básicos. En primer lugar

tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder
acceder al núcleo de la célula. A continuación debe romperse también la
membrana nuclear para dejar libre el ADN. Por último hay que proteger el ADN
de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en
alcohol.

IV. DESCRIPCIÓN DE LA PRÁCTICA

Preparar el tampón con los siguientes ingredientes y mantener en la nevera o en un

baño de hielo triturado: 120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No
usar agua del grifo. 1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura. 5 g de bicarbonato
sódico. 5 ml de detergente líquido o champú.

AGUA DESTILADA:

120ml

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SAL DE MESA:

1,5g

BICARBONATO DE SODIO:

5g

CHAMPU:

5ml

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La solución
TAMPON

Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales que pueda haber
(cebolla, ajo, tomates, etc.) y cortarla en cuadraditos.

Tomate cebolla ajos leche

Triturar la muestra con un mortero. Así se romperán muchas células y otras quedarán
expuestas a la acción del detergente.

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Mezclar en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular con 10 ml del tampón frío y
agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos. Separar después los restos
vegetales más grandes del caldo molecular haciéndolo pasar por un colador lo más
fino posible. Lo ideal es centrifugar a baja velocidad 5 minutos y después pipetear el
sobrenadante.

Retirar 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y añadir con pipeta 10 ml de

alcohol isoamílico enfriado a 0ºC. Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la
cara interna del recipiente, teniendo éste inclinado. El alcohol quedará flotando sobre
el tampón.

ALCOHOL ISOAMÍLICO:

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Se añade 10ml de
alcohol isoamílico a 0ºC
a cada caldo molecular…
AJOS:

TOMATE:

LECHE:

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CEBOLLA:

Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separación

entre el alcohol y el tampón. Remover la varilla hacia delante y hacia atrás y poco a
poco se irán enrollando los fragmentos de mayor tamaño de ADN. Pasado un minuto
retirar la varilla atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedará adherido
a su extremo con el aspecto de un copo de algodón mojado.

Ajo Tomate

Leche Cebolla

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V. RESULTADOS Y DISCUSIONES
Describir lo encontrado en la experiencia realizada

1. Tubo de ensayo ( Cebolla) : la coloración que presenta es blanquecina se

pequeñas muestras de ADN
2. Tubo de ensayo ( ajos): la coloración que presenta amarillento pálido donde
también podemos apreciar pequeñas muestras de ADN
3. Tubo de ensayo (Tomate): la coloración presenta rojiza, fragmentos de ADN
en la parte Central.
4. Tubo de ensayo (leche): la coloración de tipo cremosa, mayor conglomeración
de fragmentos de ADN.

Resultados finales de la Practica de la Extracción de

ADN

VI.
CONCLUSIONES
A modo de conclusión podemos decir que este informe ha dado a conocer
aspectos de la vida natural perceptible como imperceptible a muestras
sentidos, es decir, explica aquello que podemos ver a simple vista como lo
que no lo podemos ver tan fácilmente.

El método utilizado para la extracción de DNA, permite purificar en un grado

relativamente alto (porque depende con la precisión de la toma de muestras y

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de procedimiento su éxito) y pudimos determinar que es factible utilizarlo en

posteriores ocasiones ya que es muy fácil de utilizar y se presta para varias
aplicaciones.

VII. BIBLIOGRAFÍA

http://www.cienciahoy.org.ar/hoy08/adn.htm

http://www.jpimentel.com/ciencias_experimentales/pagwebciencias/pagweb/la
_ciencia_a_tu_alcance_II/quimica/Experiencias_quimica_extraccion_de_adn.
htm

Editorial Aduni tercera edición de biología y anatomía

http://html.rincondelvago.com/experimentos.html
AUTOR
Julián Esteban Londoño

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