CURSO ONLINE DE NANOTECNOLOGÍA

NANOMEDICINAS
MÓDULO 2
Vía de administración tópica.
Dra. María José Morilla
 CONTENIDOS
1. Ventajas de la vía tópica

2. Barreras de la vía tópica

3. Estructura y funciones de la piel

3.1 Estructura de la epidermis
3.2 Estructura del estrato corneo
3.3 Barreras al ingreso de sustancias

4. Penetración y permeación de nanopartículas

4.1 Nanovesículas para atravesar el estrato corneo
4.2 Ejemplos de aplicaciones nanovesículas
4.3 Nanopartículas poliméricas
4.4 Nanopartículas rígidas

5. Conclusiones
 1. VENTAJAS DE LA
VÍA TÓPICA

• Evita el uso de inyectables

• Gran aceptación por parte de los pacientes

• Permite el acceso a blancos localizados pocos micrones debajo de la

superficie de la piel
neoplasias, inflamación, infecciones
incremento de la actividad y efecto prolongado
reducción de las dosis requeridas y reacciones adversas respecto
de la administración parenteral

• Evade la degradación en el tracto gastrointestinal y el metabolismo de

primer paso, respecto de la ruta oral
 2. BARRERAS DE LA VÍA TÓPICA

Propiedades fisicoquímicas Barreras anatómicas o

del API fisiológicas
Alta solubilidad acuosa Presencia del estrato corneo
Alta lipofilicidad
Alto peso molecular

¿Puede la nanotecnología ayudar a

superar estas barreras?
 3. ESTRUCTURA Y FUNCIONES
DE LA PIEL
Estructura Funciones
La piel es el órgano de mayor - Cubre y protege al organismo del
tamaño del cuerpo. medio externo: rayos UV,
(15% del peso corporal) microorganismos, aire, químicos,
1-2 mm de espesor etc.
Organizado en capas - Protege mecánicamente
- Órgano sensorial
- Termorregulación
- Excreta y absorbe sustancias
- Sintetiza vitamina D
- Reservorio de sangre:
vasoconstricción y vasodilatación
- Protege inmunológicamente

Queratinocitos, células dendríticas

dérmicas, células de Langerhands
y subset de linfocitos T constituyen
el tejido linfoide asociado a la piel
(SALT, skin-associated lymphoid
tissue)
 3.1 ESTRUCTURA DE LA
EPIDERMIS
EC: 30 capas de células muertas
Epidermis Estrato (corneocitos) (75 % del espesor
Queratinocitos
Corneo muertos de la epidermis) embebidas
EC
- Epitelio escamoso en una matriz lipídica unidas por
Estrato Solo en palmas
estratificado de 20-40 Lucido y plantas desmosomas.
capas de células Resistencia a la abrasión,
Estrato Gránulos
penetración y pérdida
diferenciación Granuloso lamelares
EG de agua.
programada y
constante Queratinocitos EG: células se aplanan y acumulan
gránulos de queratina y glicolípidos
que se exocitan.
- Las células (queratinocitos) La queratina rellena las células y
Estrato
se organizan en 5 capas Espinoso Células de otorga protección física.
Langerhands
(estratos) funcionalmente EE Los glicolípidos sellan los espacios
diferentes extracelulares y otorgan
impermeabilización.
- Los queratinocitos se EE: células salen del ciclo celular,
interconectan a través Melanocitos crecen en tamaño y establecen
de uniones intercelulares conexiones intercelulares fuertes
que generan cohesión Estrato
(desmosomas y uniones adherentes)
Células de
mecánica Basal Merkel
EB EB: células se dividen activamente.
Unidas a la membrana basal por
Dermis
hemidesmosomas
 3.2 ESTRUCTURA DEL
ESTRATO CORNEO
Cemento: los lípidos intercelulares Tres formas de
Ortorrómbica
son: ceramidas (la mitad), colesterol, Ordenada y altamente empaquetamiento
ácidos grasos de cadenas largas empaquetada (organización) lateral:
saturadas y pequeñas cantidades •Ortorrómbica:
de colesterol sulfato, Hexagonal
transporte bajo
glucosilceramidas y esteres de Ordenada y menos •Hexagonal:
colesterol densamente
empaquetada
transporte medio
•Liquida: transporte alto
Ladrillos:
Corneocitos
rellenos de Liquida

queratina
Desordenada Los lípidos intercelulares
Organización
se organizan en capas
lamelar (lamelas) entre los
corneocitos

Organización
de los lípidos Las lamelas presentan
entre los distancias repetitivas de
corneocitos 6 nm (short perodicity
phase, spp) o 13 nm
(long perodicity phase,
lpp)

Imagen tomada de Increase in short-chain ceramides correlates with an altered lipid organization and decreased barrier
function in atopic eczema patients. Janssens et al., 2012. J Lipid Res. 53(12):2755-66. doi: 10.1194/jlr.P030338
 3.3 BARRERAS AL INGRESO
DE SUSTANCIAS

Estrato Corneo Barrera a la penetración

i: Barrera a la difusión (permeación): ii. Barrera nano-porosa: caminos hidrofílicos
rol los lípidos intercelulares

Log K´p = 0.77 log Kow – 0.013 MW – 2.3  3 a 10 corneocitos se

agrupan y forman
K’p: coeficiente de permeabilidad; clusters en columnas,
Kow coeficiente de partición octanol/agua; de 100 - 250 μm de
MW: peso molecular diámetro

La difusión ocurre a través de los lípidos cañones hidrofóbicos

intercelulares zonas de lamelas de 10 - 25μm de
desordenadas (liquidas) espesor

Solo las moléculas de peso molecular <400-500 Da

y de polaridad intermedia (log P 1-3) podrán
permear a través del EC, el resto permanecerán en Esta organización deja algunos caminos hidrofílicos:
la superficie de la piel. - Tortuosos
- Abundancia relativa variable de 108- 104 cm-2
en la superficie
- Tamaño: 5-30 nm
 4. PENETRACIÓN Y PERMEACIÓN
DE NANOPARTÍCULAS
Dos grupos de nanopartículas:

4.1 Nanopartículas flexibles “soft” biodegradables

- Nanovesículas lipídicas (liposomas, transfersomas, etosomas,

niosomas, invasomas)
- Nanopartículas lipídicas y poliméricas

Funciones: Incrementar la permeación a través del EC

Lograr efectos locales en el tejido subcutáneo
Acceder al SALT y generar una respuesta inmunologica

4.2 Nanopartículas rígidas “hard”

-Óxidos metálicos: TiO2 y ZnO presentes en pantallas solares y

producidas en gran cantidad
-Nanopartículas metálicas, puntos cuánticos (quantum-dots) importantes
en términos de exposición no intencional
 4.1 NANOVESÍCULAS PARA ATRAVESAR
EL EC: FLUIDEZ VS DEFORMABILIDAD
Prof. Elka Touitou Escuela de Farmácia de la
Universidad Hebrea, Israel. Inventora de los Etosomas

Supra-Vir, tratamiento herpes labial

(producido por Trima en Israel)
Body Shape, un gel anticelulitis
 4.1 NANOVESÍCULAS PARA ATRAVESAR
EL EC: FLUIDEZ VS DEFORMABILIDAD
Transfersomas
Marca registrada en Alemania
por la empresa IDEA
Prof. Gregor Cevc en los 90´

Osteoartritis
Blancos locales:
dermatitis atópica, psoriasis, tratamiento de escaras,
cicatrización, cáncer de piel de tipo no melanoma.
Tratamientos antifúngicos y antileishmaniasis
Blancos debajo de la piel:
Anti-inflamatorios y osteoartritis

Imagen tomada de Drug-free gel containing ultra-deformable phospholipid vesicles (TDT 064) as topical therapy for the treatment of pain associated
with osteoarthritis: a review of clinical efficacy and safety. Current Medical Research & Opinion Vol. 30, No. 4, 2014, 599–611
Philip G. Conaghan, Johannes W. Bijlsma, Werner Kneer, Elspeth Wise, Tore K. Kvien, Matthias Rother
 4.1 NANOVESÍCULAS PARA ATRAVESAR
EL EC: FLUIDEZ VS DEFORMABILIDAD
Nanovesículas fluidas Nanovesículas ultradeformables
(Etosomas) (Transfersomas)

Composición: Composición: 85:15 p/p fosfolípidos: activador

2-5% fosfatidilcolina (PC) de borde (surfactantes de simple cadena de alta
20-45% etanol y agua hasta 100% p/p movilidad; ej. colato de sodio, Tween 80, 20)
 4.1 MECANISMO DE ACCIÓN

Etosomas Nanovesículas ultradeformables

- Actúan como incrementadores (enhancer) Penetración a través del EC por mecanismos que
de permeación. dependen de su adaptabilidad estructural
- El etanol disrumpe la organización e incrementa
la fluidez de los lípidos del EC
- Disrumpen la barrera lipofílica de la piel

Las vesículas podrían penetrar por los poros si la

fuerza de la presión osmótica supera la resistencia
a la deformación de las vesículas

Imagen tomada de Sattler KD, ed. Handbook of Nanophysics:

CRC Press 2010
 4.1 MECANISMO DE ACCIÓN
Nanovesículas Ultradeformables
i) Carrier: llevan API hasta cierta profundidad dentro de la piel hidrofóbicos

ii) Enhancer de permeación: ingresan al EC y modifican los lípidos intercelulares,

facilitando la penetración API hidrofílicos

No penetran el EC intactas
rodamina-PE en la
Mapas bi-dimensionales de los coeficientes de
membrana lipídica
difusión fluoroforos

estreptavidina-Atto
647N en el espacio
acuoso interno

Las dos sondas no difunden juntas

Imagen tomada de Structural and dynamical aspects of skin studied by multiphoton excitation fluorescence microscopy-based methods. Maria Bloksgaard,
Jonathan Brewer, Luis A. Bagatolli. Eur J Pharm Sciences 50 (2013) 586–594
 4.2 EJEMPLOS DE APLICACIONES
R
Transfenac : diclofenac en Transfersomas

Diclofenac en Transfersomas
efecto prolongado Debido a su tamaño (100 nm), el diclofenac en
10 veces mayor concentración en transfersomas es removido menos eficientemente
el musculo bajo la piel (ratones, por el plexo capilar, permanece mas tiempo en el
ratas y cerdos) vs producto sitio de acción y llega en menor concentración a la
comercial Voltaren sangre vs Voltaren
New, highly efficient formulation of diclofenac for the topical, transdermal administration in ultradeformable drug carriers, Transfersomes. Cevc G,
Blume G. Biochimica et Biophysica Acta 78137 (2001) 1-15
 4.3 NANOPARTÍCULAS
POLIMÉRICAS
Nanopartículas de PLGA 300 nm covalentemente marcadas con fluoresceína y cargadas
físicamente con Texas Red tras 5 h de incubación con piel humana
Micrografía de 2-fotones a Verde muestra las capas de
z = 15 μm de profundidad de queratina; azul Np marcadas
la piel, donde se observa la con fluoresceína; rojo
fluorescencia de la queratina. Texas Red

Las nanopartículas poliméricas no penetraron, se acumularon en la superficie de la piel y en las

arrugas, desde donde el Texas Red se liberó y penetró la epidermis

Imagen tomada de Sattler KD, ed. Handbook of Nanophysics: CRC Press 2010
 4.4 NANOPARTÍCULAS RÍGIDAS

La penetración de nanopartículas rígidas a través de la piel intacta es poco probable

Las nanopartículas se acumulan en las arrugas y los apéndices, principalmente en los

folículos pilosos, pero no atraviesan el EC.

Las nanopartículas permanecerán acumuladas, hasta que sean removidas por crecimiento
capilar o por el sebo (eventos muchos mas lentos que el descamado del EC). Desde allí
pueden liberar iones que pueden ser tóxicos y que pueden acceder a la dermis y/o al
torrente sanguíneo.

La penetración de este tipo de nanopartículas es un tema especialmente controvertido,

ya que la literatura reporta resultados diferentes según:

-Tipo de piel usada: cerdo, roedores, humana

-Tratamiento previo de la piel: hidratación, tape-stripped (remoción del EC con
cinta adhesiva), stress mecánico (grado de estiramiento).
-Tamaño, forma, superficie y estado de agregación en el medio de dispersión
de las nanopartículas,
-Volumen, forma y tiempo de aplicación
 EJEMPLOS DE ESTUDIOS DE
PERMEACIÓN DE DIFERENTE TIPO DE
NANOPARTÍCULAS RÍGIDAS
Tipo de Diámetro Diámetro en Tipo piel Permeación Referencia
nanopartícula núcleo (nm), suspensión
forma (nm)
ZnO 20-40 20-30 humana, in No Zvyagin et al.
vivo 2008

TiO2 26-30 20-30 humana, in No Roberts et al.

vivo 2008

Au-citrato 15, 102 y 118 rata 15 nm Si (5%) Sonavane et al.

esféricas 102 y 118 nm 2008
No (*)
Quantum-Dot- 4.6 esféricos 14 cerdo Si Ryman-
COOH Rasmussen et
al. 2006
Quantum-Dot- 4.6 esféricos 14 rata No Zhang et al.
COOH 2008

Quantum-Dot- 29 esféricos, ratón Si Mortensen et al.

COOH glicerol 2008

Quantum-Dot- 6x 12, elípticos 18 rata No Zhang et al.

COOH 2008

* La piel fue excesivamente hidratada por la aplicación de un gran volumen de muestra, lo que agranda los poros
pre-existentes. Algunos datos sostienen que poros normales de 0.5–7 nm pueden agrandarse hasta 15–40 nm, esto
explicaría porque solo las nanopartículas de 15 nm y no las de mayor tamaño, pudieron permear la piel.
Marc Schneider, Frank Stracke, Steffi Hansen, Ulrich F. Schaefer. Nanoparticles and their interactions with the dermal barrier.
Dermato-Endocrinology 1:4, 197-206; 2009
 5. CONCLUSIONES

1. La penetración de material particulado en la piel sana es un

evento muy complejo

2. No existe una forma matemática que describa el proceso, es por esto

que aun es necesaria la experimentación.

3. Los datos recolectados experimentalmente son muy variables y

dependen de muchos factores no estandarizados.

4. Las nanovesículas flexibles o ultradeformables logran incrementar

la penetración de los API

5. La piel es un órgano muy importante para la aplicación de API ya

sea para tratamientos locales, como subcutáneos y la generación
de respuesta inmunológica
 6. REFERENCIAS

Zvyagin AV, Zhao X, Gierden A, Sanchez W, Ross JA, Roberts MS. Imaging of zinc oxide nanoparticle
penetration in human skin in vitro and in vivo. J Biomed Opt. 2008 Nov-Dec;13(6):064031.

Sonavane G, Tomoda K, Sano A, Ohshima H, Terada H, Makino K. In vitro permeation of gold nanoparticles
through rat skin and rat intestine: effect of particle size. Colloids Surf B Biointerfaces. 2008; 65(1):1-10.

J. P. Ryman-Rasmussen, J. E. Riviere, and N. A. Monteiro-Riviere. Penetration of intact skin by quantum

dots with diverse physicochemical properties,” Toxicol. Sci. 91, 159–165 2006.

Zhang LW, Monteiro-Riviere NA. Assessment of quantum dot penetration into intact, tape-stripped,
abraded and flexed rat skin. Skin Pharmacology and Physiology 2008; 21:166-80.

Mortensen LJ, Oberdörster G, Pentland AP, DeLouise LA. In Vivo Skin Penetration of Quantum
Dot Nanoparticles in the Murine Model: The Effect of UVR. Nano Letters 2008; 8:2779-87.