Universidad Nacional de Cajamarca

Facultad de Medicina Humana

Escuela Académico Profesional de Medicina Humana

“PRESENCIA DE MICROORGANISMOS EN EL AMBIENTE QUIRÚRGICO E

HISOPADO DE FOMITES QUIRÚRGICOS EN UNA CLÍNICA DE LA CIUDAD
DE CAJAMARCA. JULIO, 2018”
Gallardo Llanos, Arturo; Marrufo Cabrera, Mardely; Muñoz Medina, Christian; Román Cruzado,
Williams; Vásquez Barrantes, César. Facultad de Medicina Humana, Cajamarca-Perú.

RESUMEN
Objetivo general: Identificar
microorganismos en el ambiente quirúrgico
de una clínica local mediante sedimentación
en placas de agar e hisopado de fomites
quirúrgico. Objetivos específicos:
Demostrar presencia de microorganismos
patógenos y no patógenos y determinar la
eficacia de los mecanismos de esterilización
utilizados en el material médico. Establecer
la posibilidad de riesgo a la que se exponen
los pacientes por la presencia de dichos
microorganismos. Materiales y métodos: Se
obtuvieron muestras mediante hisopado de
superficies de la sala de cirugía y calidad
ambiental mediante métodos de cultivo y
pruenas bioquímicas. Resultados: Se
identificó la enterobacteria Gram negativa
Serratia Spp y 0 UFC/m3 para hongos
filamentos.
PALABRAS CLAVE: microorganismo,
fomite, Serratia spp, hongos filamentosos,
ambiente quirurgico.
ABSTRACT
Main objective: Identify microorganisms in
a surgical environment of a local clinic using
the technique of sedimentation in Petri’s
plates with agar and swabbing of surgical
fomites. Specifics objectives: Demonstrate
the presence of pathogenic and non-
pathogenic microorganisms and determine
the effectiveness of the sterilization
mechanisms used in medical equipment
following procedures. Establish the
possibility of risk to which patients are
exposed due to the presence of said
microorganisms. Materials and methods:
We will obtain samples due the swabbing of
superficies in the surgical room, we hope to
obtain, recover, isolate and identify
microorganism that have clinical importance
like Enterobacter cloacae, Escherichia coli,
Klebsiella pneumoniae, Pseudomona
aeruginosa and others that are inoffensive to
the human health.
KEY WORDS: microorganism, fomite,
post-surgery patients.
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INTRODUCCIÓN
El medio ambiente hospitalario contiene numerosos microorganismos, pero sólo en algunos casos
se ha demostrado claramente una relación causa-efecto entre la presencia de microorganismos en
este medio y el desarrollo de infección en humanos.
Los microorganismos tienen una determinada supervivencia en el ambiente y cuando una
superficie es contaminada, este puede sobrevivir allí días, semanas e incluso meses. Prácticamente
cualquier superficie o medio hospitalario es susceptible de estar colonizada por microorganismos
potencialmente patógenos, ello hace que se puedan transmitir de manera cruzada, generalmente a
través de las manos del personal sanitario, a otras superficies tanto animadas como inanimadas.
El tipo de microbio varía según la localidad, según el ambiente y otros factores, en el área
hospitalaria adquieren gran importancia, especialmente los estafilococos por ser el germen que con
más frecuencia puede infectar a pacientes durante procedimientos quirúrgicos. (1)
Siendo el quirófano uno de los ambientes que requieren especial atención en el aspecto de sanidad,
se debe tener control y método de esterilización adecuados.
La experiencia ha demostrado que el mejor sistema de control de contaminación de ambientes es
el llevado a cabo mediante el empleo de placas de Petri. Estas son expuestas, se ponen en contacto
con superficies y tienen un medio de cultivo para lograr el crecimiento bajo ciertas condiciones de
temperatura y humedad, técnica que se realiza en el Laboratorio y así se logra obtener el
microorganismo que se ha recogido y sus características.
Entre los microorganismos más comunes en las salas de cirugía se pueden citar a Pseudomona
aeruginosa y Proteus vulgaris, Streptococcus y Staphylococcus y otros bacilos como Clostridium
difficile. En especial merece la mayor atención, por su capacidad de producir infecciones el
Staphylococcus aureus. Estos microorganismos pueden ser "llevados" a la sala por el personal,
equipo e instrumental o por el paciente.
La infección intrahospitalaria (IIH) representa el mayor desafío que a través de la historia y todavía
hoy enfrentan el personal de salud. La infección y su principal complicación, la sepsis, son la
primera causa de muerte en las unidades de cuidado intensivo y, en general, en los servicios
quirúrgicos.
El uso de los métodos de vigilancia para controlar y prevenir las infecciones intrahospitalarias se
conoció en Viena, por Ignaz Semmelweiss en 1840, quien logró disminuir la frecuenta de fiebre
puerperal en la sala de obstetricia del Hospital General de Viena del 10% al 1%, ordenando a sus
estudiantes el lavado de las manos cuando pasaba de la sala de autopsias a la de obstetricia.
Luego, Joseph Lister, en 1867 habló de desinfección de la piel, de las manos y de los instrumentos;
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utilizó el ácido carbónico en salas de cirugía, y junto con Floraence Ninthingale introdujeron los
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conceptos de asepsia y antisepsia. Caínzos M: Infección en Cirugía. Edicioncs Mosby/Doyma,

Barcelona. 1994.
Los controles de una zona o ambiente hospitalario deben ejercerse cada vez que se puedan hacer,
es decir, cuanto más frecuente se hagan los cultivos mejor vigilado estará el ambiente. El elemento
más importante de la bioseguridad es el estricto cumplimiento de las prácticas y procedimientos
apropiados y el uso eficiente de materiales y equipos, los cuales constituyen la primera barrera a
nivel de contención para el personal y el medio. La falta de atención a las normas establecidas
incrementa el riesgo de contagio ya que existe un contacto muy cercano entre profesional y
paciente, lo cual puede desembocar en la transmisión de enfermedades que pueden ser fatales para
cualquiera de los dos. (2)
Realizaremos el hisopado en algunos objetos del ambiente quirúrgico.
Se recomienda la colocación de placas de Petri en las zonas identificadas del suelo del ambiente.
Los valores admisibles para hongos filamentosos son 0 UFC/m3.
Recuento de aerobios: los valores de bioseguridad admisibles dependen también del tipo de
quirófano (se indican en unidades formadoras de colonias (UFC) por m3:
-Ambiente muy limpio <10 ufc/m3
-Ambiente limpio <10-100 ufc/m3
-Ambiente aceptable 100-200 ufc/m3
En los quirófanos de clase A se debe garantizar un ambiente muy limpio.
MARCO CONCEPTUAL
ÁREA QUIRÚRGICA
DEFINICIÓN DE ÁREA QUIRÚRGICA Conjunto de locales e instalaciones especialmente
acondicionadas y equipadas, selectivamente aisladas del resto del hospital, que constituyen 38 una
unidad física y funcionalmente diferenciada, cuya finalidad es ofrecer un lugar idóneo para tratar
quirúrgicamente al paciente.
QUIRÓFANO Es una estructura que debe estar cerrada completamente independiente del resto
del hospital en el cual se practican intervenciones quirúrgicas, actuaciones de anestesia y de
reanimación necesarias para el buen desarrollo de una intervención y de sus consecuencias, que
tienen lugar en general en el exterior del quirófano. Los quirófanos deben agruparse en una sola
planta y constituir una unidad funcional independiente, asegurar el cumplimiento de las diferentes
funciones referentes a la circulación, instrumentación, preparación de material y ropa quirúrgica,
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higiene y acondicionamiento ambiental y apoyo a las funciones del anestesista que permitan la
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realización de la actividad quirúrgica. (3)

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PRESIÓN POSITIVA El aire debe ser expulsado desde los quirófanos hacia las zonas no estériles,
extrayendo las partículas flotantes. Para conseguir este objetivo, la instalación de aire
acondicionado ha de estar calculada para obtener mayor presión en el quirófano. La diferencia de
presión ha de ser como mínimo de cinco milibares entre cada zona, es decir: dentro del quirófano
habrá presión atmosférica + quince milibares, en las zonas pre y post-quirúrgicas será de presión
atmosférica +10 milibares, y por último en la zona de entrada-salida de pacientes será de presión
atmosférica + 5 milibares.
HUMEDAD Y TEMPERATURA El control de la temperatura y la humedad del área quirúrgica
es automático, con sensores de ambiente que mandan una señal a los reguladores y éstos, a su vez,
gobiernan las etapas de producción de frío o calor. Debe conservar una alta humedad relativa de
50 y 60% para ayudar a reducir la posibilidad de una explosión. Las chispas se forman con mayor
facilidad si la humedad es baja. La Temperatura se debe conservar entre 18 a 21° C (termostato)
aunque se necesitan temperaturas mayores durante la cirugía pediátrica y en pacientes quemados.
CONTROL DEL AMBIENTE El hombre se calcula que emite en su entorno próximo un N°
determinado de partículas de 0,5 a 10 um de diámetro. Estas partículas se ponen en suspensión en
el aire, y se producen por las escamas cutáneas, la sudoración y principalmente por gotas de Flügge
de las vías respiratorias. El mejoramiento del ambiente en Quirófano se obtiene principalmente
con un personal bien entrenado, que usa la ropa quirúrgica correctamente, que transita solo lo
indispensable dentro del quirófano, que habla lo menos posible durante las intervenciones y que
se apega a las normas de asepsia y antisepsia. (4)
CLIMATIZACIÓN El quirófano debe estar aislado del exterior y dotado de un sistema de aire
acondicionado provisto de filtros especiales (retienen el 99% de las partículas mayores de 3
micras). Con control de filtros y grado de humedad (revisión c/6 meses). Este sistema de aire
acondicionado debe de ser de flujo laminar y debe tener un control de humedad.
MATERIAL QUIRÚRGICO. - Serie de sustancias, elementos o productos, que utilizamos para
muy diversos fines y concebidos para entrar en contacto con tejidos o fluidos orgánicos. Ej.
Suturas, hemostáticos, drenajes.
MANEJO DE MATERIAL ESTÉRIL
Vida útil de un producto estéril: Es el tiempo que transcurre desde que es procesado hasta que se
utiliza o hasta que alcanza la fecha de caducidad, momento en el que debe ser retirado para volver
a ser esterilizado, si es reutilizable.
Manejo Instrumental Quirúrgico: Desde que el material sale del esterilizador comienza la
manipulación de los productos, dejar enfriar el material o evitar condensados, lavarse las manos
antes de tomar el material y usar ropa de trabajo (ropa limpia). (5)
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NORMAS DE BIOSEGURIDAD
a) Normas generales de Bioseguridad:
Conservar el ambiente de trabajo en óptimas condiciones de higiene.
Maneje todo paciente como potencialmente infectado.
Las normas universales deben aplicarse con todos los pacientes que reciben atención hospitalaria.
Lávese cuidadosamente las manos antes y después de cada examen clínico o de cualquier otro
procedimiento asistencial.
Utilice en forma sistemática guantes de látex en procedimientos que conlleven manipulación de
elementos biológicos o químicos y cuando maneje instrumental o equipo contaminado en la
atención de pacientes. Antes de quitárselos se debe proceder a lavarlos con jabón. (6)
Emplee respirador y gafas durante procedimientos que puedan generar salpicaduras o gotitas
aerosoles de sangre u otros líquidos corporales.
Realizar desinfección y limpieza a las superficies, equipos de trabajo al final de cada
procedimiento y al finalizar la jornada de trabajo.
MANEJO DE LA LIMPIEZA DE QUIRÓFANO La limpieza hospitalaria es uno de los pilares
para la atención de los usuarios y es una actividad altamente técnica cuya correcta implementación
tiene un rol fundamental en la bioseguridad y en satisfacción del usuario y del personal de salud.
PRINCIPIOS GENERALES
 Limpieza: Es la remoción de todo material extraño de la superficie de un objeto y este se consigue
usando agua y detergente o productos enzimáticos.
 Desinfección: Es el procedimiento químico o físico que tiene por objetivo destruir los
microorganismos patógenos. (7)
MATERIALES Y MÉTODOS
El estudio se realizó en una clínica local, en el mes de julio del presente año, este estudio de
vigilancia se realizó específicamente en las superficies de la sala de cirugía.
TOMA DE MUESTRAS
Las muestras se tomaron con hisopos de algodón estéril, previamente humedecidos en solución
salina, mediante estos se tomará muestras hisopando superficies, instrumentos e inmobiliario que
se encuentra en sala de operaciones. (8)
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AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS

Las muestras fueron incubadas un promedio de 24 horas, luego fueron sembradas en:
AGAR Müller-Hinton: Para aislar y mantener especies de Neisseria y Moraxella.
AGAR Sangre: Para el conteo de UFC
Agar Mac Conkey: Para la identificación morfológica de las colonias
AGAR Sabouraud: Para el recuento de hongos.
Las placas fueron procesadas dentro de un periodo comprendido entre las 24 y 48 horas en un
ambiente libre de contaminación. Se utilizó una placa control en donde se comprobó la calidad del
medio de cultivo. (9)
Después del crecimiento se procedió a su diferenciación realizando coloración Gram, pruebas de
catalasa, y pruebas bioquímicas.
ANÁLISIS DE DATOS
Los datos fueron analizados y comparados con los valores de UFC determinados por la OMS (10)
SALA DE OPERACIONES, 3ER PISO, CLÍNICA SANTA ANA

HISOPADO DE FOMITES
LEYENDA
ÁREA DE MUESTRA 1: MESA DE INSTRUMENTAL OPERATORIO
ÁREA DE MUESTRA 2: MESA DE INSTRUMENTAL PRE OPERATORIO
ÁREA DE MUESTRA 3: MESA DE INSTRUMENTAL POST OPERATORIO

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MÉTODO: HISOPADO
RESULTADOS
TAMAÑO DE
VALORES
CONTEO LAS
ÁREA AGAR CATALASA PERMITIDOS INTERPRETACIÓN
(UFC) COLONIAS
(UFC)
(mm)
CATALASA
1 A. Sangre 50 1.4 250 CONFORME
+
CATALASA
1 A. MacConkey 51 1.1 250 CONFORME
+
2 A. Sangre 41 CATALASA+ 1.3 250 CONFORME

2 A. MacConkey 8 1.2 250 CONFORME

CATALASA+
CATALASA
3 A. Sangre 2 1.6 250 CONFORME
+
CATALASA
3 A. MacConkey 12 1.3 250 CONFORME
+

PRUEBAS BIOQUÍMICAS

PLACAS CON AGAR MAC

PRUEBAS CONKEY
BIOQUÍMICAS
1 2 3
TSI K/K K/K K/K
GAS ++ - -
LIA K/K K/K K/K
CITRATO + + +
S - - -
I - - -
M + - +

CONTROL DE CALIDAD DEL AIRE

CALIDAD DEL PLACAS

AIRE 1 2 3
A. Sb 0 0 0
A. MH 4 3 2
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EJECUCIÓN

Se organizó la visita a la clínica Santa Ana, donde se nos informó el procedimiento y las medidas
de bioseguridad a seguir durante la toma de muestra, las cuales constaron de los siguientes pasos:
El lavado de manos clínico, colocación y retiro de vestimenta protectora y se nos permitió el
ingreso a la sala de operaciones.

El procedimiento llevado a cabo antes del ingreso fue:

• Cambio de vestuario apropiado (esterilizado y de sala)

• No se utilizó ningún tipo de prendas (aritos, reloj, uñas acrílicas etc.)

• Se inició con la colocación del gorro, seguido de la camisa, pantalón, y zapateras)

• Se realizó el lavado de manos (lavado clínico)

• Se colocaron los guantes estériles según técnica.

DISCUSIÓN
Las muestras de hisopado fueron cultivadas en agar sangre y agar MacConkey. El agar sangre es
un medio de cultivo altamente nutritivo, adecuado para el cultivo de una gran variedad de
microorganismos incluyendo aquellos de mayores exigencias para su desarrollo. Su formulación
permite la recuperación de la mayoría de los patógenos de importancia clínica, obteniéndose
características de desarrollo con valor predictivo. El agar MacConkey es un medio de
cultivo selectivo y diferencial para bacterias diseñado para aislar selectivamente bacilos Gram
negativos y entéricos.

Posteriormente, se llevó a cabo la prueba de catalasa que es un enzima presente en la mayoría de

los microorganismos que poseen citocromos. Las bacterias que sintetizan catalasa hidrolizan el
peróxido de hidrógeno en agua y oxigeno gaseoso que se libera.
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PRUEBAS BIOQUÍMICAS

CITRATO DE SIMMONS

El medio de cultivo es diferencial en base a que los microorganismos capaces de utilizar citrato
como única fuente de carbono usan sales de amonio como única fuente de nitrógeno, con la
consiguiente producción de alcalinidad

TSI (TRES AZUCARES Y HIERRO)

Una vez completado el período de incubación, observar el desarrollo microbiano en la superficie

tendida y en la columna del tubo. Considerar el viraje de pH por alcalinización hacia el rojo (K) o
acidificación (A) hacia el amarillo. Se comparó producción de H2S, fermentación de carbohidratos
y producción de gas.

SIM (SULFURO–INDOL-MOTILIDAD)

Se observó el crecimiento o turbidez va más allá de la línea de siembra. Positivo: se observa un

crecimiento y turbidez que abarca más allá de la línea de siembra. Negativo: se observa crecimiento
sólo en la línea de siembra, el resto de la superficie se observa límpida.

Indol: agregar 3 a 5 gotas del Reactivo de Indol (Provisto separadamente). Observar el cambio de
color en la parte superior del tubo. Negativo: No se observa color rojo.

LIA

El Medio de Lisina y hierro (L.I.A.) es un medio de cultivo ampliamente utilizado para la

diferenciación de bacilos Gram negativos entéricos, y se compara la producción de H2S, lisina
decarboxilasa y lisina deaminasa.
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Serratia spp es un género de bacteria Gram negativa, anaerobio facultativo, baciliforme de la

familia Enterobacteriaceae, con resultados en pruebas bioquímicas:
 TSI: K/K
 LIA: K/K
 CITRATO DE SIMMONS: +
 SIM: -

CONLUSIONES

El ambiente quirúrgico examinado, no presenta microorganismos patógenos, y las UFC están en

el rango normal.

 Se identificó el microorganismo Serratia spp, una enterobacteria Gram -, patógeno

oportunista, que se desempeña en ambientes intrahospitalarios.
 Se determino
 El ambiente quirúrgico presenta las condiciones adecuadas para la realización de sus
procedimientos.
 Se recomienda el cuidado y atención al microorganismo encontrado, por ser de importancia
patógena en pacientes hospitalizados, principalmente en inmunodeprimidos.

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REFERENCIAS
1. Saltos IBCAM. Repositor digital. [Online].; 2014 [cited 2018 07 10. Available from:
http://www.dspace.uce.edu.ec/handle/25000/4590.

2. ALICIA B. CUYO SLMMQG. Tesis de grado "Evalución del cumplimiento de las normas de
bioseguridad en la sala de operaciones en el hospital de las fuerzas armadas N°1, durante el
periodo de junio a diciembre 2013. Universidad Nacional del Ecuador. 2014 Apr; 1(1).

3. Acosta YP. Medidas de bioseguridad que aplica el personal de salud en el área de quirófano
en la clínica San Miguel Arcangel-2016. UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN
MARCOS. 2017 Julio; 1(1).

4. Aline M. Amara ADFPABPGF. Importancia de la protección de la mesa de instrumentos

quirúrgicos en la contaminación intraoperatoria de cirugías limpias. Latino-Am. Enfermagem.
2013 Febrero; 1(21).

5. Marco R. Jacinto CRUGHDPMM. Susceptibilidad a betalactámicos y resistencia por

betalactamasas de espectro extendido (BLEE) en Enterobacteriaceae aisladas de reservorios
ambientales de un hospital general en Cajamarca, Perú. Rev Med Hered. 2011 Junio; 22(2).

6. Marco R. Jacinto CRUGHD. Pseudomonas aeruginosa productora de betalactamasa clásica y

de espectro extendido en reservorios de un servicio de neonatología. Rev. Perú. med. exp.
salud pública. 2008 Junio; 25(2).

7. Marco R. Jacinto CRUGHD. Frecuencia de aislamientos ambientales de Staphylococcus

aureus y su actividad beta-lactamasa en un hospital de Cajamarca, Perú. Infectio. 2009
Septiembre.; 13(3).

8. César R. Bohórquez DCAGAP. Determinación de la calidad bacteriológica del aire en un

laboratorio de microbiología en la Universidad Distrital Francisco José de Caldas en Bogotá,
Colombia. Producto de la investigación. 2016 Mayo; 13(26).

9. Hospital de México. Anteproyecto Instructivo Sobre Control Microbiológico En Salas De

Cirugía. [Online].; 2000 [cited 2018 07 12. Available from:
http://www.binasss.sa.cr/re/hcr/n151977/ar6.pdf.
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10. José B. Andrés CEBADI. Procedimientos en Microbiología Clínica. Primera ed. Emilia
Página

Cercenado RC, editor. España: Seimc; 2012.

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ANEXOS
AGAR SABORAU (HISOPADO)

AGAR MAC CONKEY (HISOPADO)

AGAR SANGRE (HISOPADO)

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AGAR SABORAU (CONTROL AMBIENTAL)

AGAR MUELLER HINTON (CONTROL AMBIENTAL)

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TINCIÓN GRAM DE LA PLACA NÚMERO 1

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