UNVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

INFORME DE PRÁCTICA N° 2
FISIOLOGIA DE LA MEMBRANA SEMIPERMEABLE
FRAGILIDAD OSMÓTICA

I.INTRODUCCION:
Todas las células del organismo están rodeadas de una membrana limitante, a través
de la cual obtienen sus alimentos y el oxígeno y excretan sus productos de deshecho
y el C02 resultante de su metabolismo. La membrana celular tiene propiedades bien
establecidas: Solo deja entrar las sustancias que se necesitan y solo deja salir las
secreciones, los productos de desecho y las sustancias no indispensables, en otras
palabras, es semipermeable. Estas funciones las realiza a través de diversos
mecanismos, que hemos revisado con detalle en las clases teóricas. En la presente
práctica trataremos de una de ellas que es la Osmosis. En general la osmosis significa
el paso de líquidos a través de una membrana semipermeable. Cuando dos soluciones
de diferentes concentraciones están separadas por una membrana semipermeable, el
solvente y los solutos atraviesan la membrana siguiendo las leyes que rigen el
fenómeno del ósmosis. El agua es transportada a través de la membrana celular por
una fuerza hidrostática llamada presión osmótica, dicho de otro modo, la presión
osmótica es la fuerza de atracción que ejercen las partículas sobre el agua atrayéndola.

II. MARCO TEORICO:

La osmolaridad depende del número de partículas que se encuentran es solución.
Las Unidades de Osmolaridad son el Osmol /Kg H2O, en medicina usamos el sub
múltiplo mili Osmol /Kg H20

Un Osmol por Kg es la fuerza para atraer agua que ejerce un MOL de partículas que
se encuentran en 1 Litro ó Kg de solución. Cada partícula (átomo) ejerce una presión
osmótica independientemente; por ejemplo, una mol de glucosa disuelto en un Kg (litro)
de agua ejerce una presión osmótica de 1 Osmol /kg agua; en cambio un mol de ClNa
disuelto en un litro de agua ejercerá una presión Osmótica de dos Osmoles debido a
las dos partículas en que se disocia, una de sodio y otra de cloro. (Na+ y Cl- )

La capacidad de una partícula para producir un flujo de agua a través de la

membrana celular se llama tonicidad.

Una solución extracelular que permite que el agua fluya hacia dentro de la célula
haciendo que ésta se hinche se llama hipotónica (Hipo osmolar)
Una solución que permite que el agua fluya hacia fuera de la célula se llama
hipertónica. (Híper osmolar) La membrana del glóbulo rojo nos servirá en la presente
práctica para demostrar este fenómeno y asimismo demostrar que la membrana
tiene ciertos límites de resistencia normales a variaciones de la tonicidad en el medio
interno.

Aplicación Medica:

Existen algunas enfermedades en las cuales se producen alteraciones en la membrana

que generan hemólisis por mayor fragilidad de la membrana, son defectos genéticos
heterogéneos que afectan a las proteínas constitutivas de la membrana del eritrocito.
La Enfermedad Esferocitosis es una de ellas, en la en la cual se ha demostrado una
disminución de la proteína membrana Espectrina del hematíe, y el grado de déficit de
la proteína Espectrina parece asociarse con la gravedad clínica de esta enfermedad,
pues los hematíes son muy frágiles y se hemolizan produciendo anemia intensa.

Fundamento:

Se llama resistencia globular osmótica a la que presentan los hematíes suspendidos

en soluciones salinas hipotónicas. Si empleamos soluciones salinas de 0.76 a 0.9 % y
suspendemos dentro de ellas los hematíes veremos que éstos se conservan sin
alteración durante varias horas, y que una vez sedimentados (espontáneamente ó por
centrifugan), el líquido que sobrenada es claro y transparente como la misma solución
salina. Pero si efectuamos suspensiones de hematíes en soluciones de cloruro sódico
a concentraciones progresivamente decrecientes observaremos que al llegar a una
determinada concentración empiezan a destruirse, liberándose la Hb, lo que confiere
al líquido una ligera coloración rojiza que no desaparece por centrifugación. Esto se le
llama hemólisis inicial o resistencia mínima, que normalmente se presenta entre las
concentraciones de 0.46 y 0.42 %. Esta hemólisis de los hematíes va aumentando en
cantidad a medida que la solución de cloruro sódico va siendo más hipotónica hasta
presentarse una hemólisis total. Esta hemólisis total se observa entre las
concentraciones de 0.34 a 0.30 %

Tipo de Medios:

Hipotónico: Cuando tiene menor cantidad de solutos y más de líquidos (solvente) por
lo que la célula se hincha y entra en estado de turgencia.

Isotónico: Es cuando está en su estado normal y la célula está constantemente en

homeostasis. La célula no cambia de forma, ni establece ningún mecanismo de
compensación.

Hipertónico: Indica una mayor cantidad de solutos a comparación de la cantidad de

solutos de la célula la célula por entrar en homeostasis deja entrar algunos solutos y
eso hace que la célula entre en estado de plasmólisis.
Causas de aumento de la Fragilidad Osmótica Globular:
(Los hematíes son más frágiles que lo normal, tienen poca resistencia ante ligeras
hipotonías, y se hemolizan muy fácilmente)
-Anemia Hereditaria Esferocítica, en la Enfermedad Hemolítica del recién nacido por
incompatibilidad ABO
-Después de alguna injuria térmica (quemaduras)
-Anemias Hemolíticas sintomáticas en algunos casos de: Linfoma Maligno, Leucemias,
Cáncer, Cirrosis, etc.

Causas de Disminución de la Fragilidad Osmótica:

(Los hematíes son más resistentes que lo normal a la hipotonía):
En la primera Infancia, tempranamente en la infancia.
En algunas Anemias por deficiencia de Hierro
Talasemia mayor ( ó anemia de Cooley, ó anemia del Mediterráneo )
Anemia Drepanocitica ( Hoz, Sickle cell anemia)
Anemia Megaloblástica Nutricional
Post Esplenectomía y algunas hepatopatías con ictericia

Fragilidad en Medio Acido:

- En la Hemoglobinuria paroxística nocturna, que cursa con anemia hemolítica, usualmente
la fragilidad globular realizada en sol. salina solamente, es normal, pero, la fragilidad globular
realizada en MEDIO ÁCIDO( pH ácido)

Fragilidad Mecanica:

La FRAGILIDAD MECANICA está aumentada en la Ovalocitosis hereditaria (o

Eliptocitosis), en los casos que evolucionan con anemia hemolítica.
III. MATERIALES Y SOLUCIONES:

 Solución salina al 0.9 %

 Pipetas graduadas: 1 ml al 0.01
10 ml al 0.1
5 ml al 0.1
 Micropipetas de 0.1 ml
 Fiola de 100 ml
 Muestra de sangre venosa desfibrinada ó hematíes lavados.
 Agua destilada
 Tubos de vidrio 13x 100 mm sin reborde
 Propipeta
 Alcohol
 Jeringa de 3 y 1
 Heparina Sodica

IV. PROCEDIMIENTO:

N° Tubo Sol. NaCl Agua Destilada Mesclar por %NaCl de Sol

1%ml Inversión resultante
1 0.5 4.5 Si 0.10%
2 1.25 3.75 Si 0.20%
3 1.5 3.5 Si 0.30%
4 1.75 3.25 Si 0.35%
5 2.0 3.0 Si 0.40%
6 2.12 2.88 Si 0.425%
7 2.25 2.75 Si 0.45%
8 4.0 1.0 Si 0.80%
9 4.25 0.75 Si 0.85%
10 --- 5.0 --- 0%

1) Tabulamos los tubos del 1 al 10

2) Agregamos la solución NaCl a cada tubo, de acuerdo a los valores que nos indican
en nuestra tabla, con ayuda de nuestra pipeta.

3) Agregamos agua destilada a cada tubo, de acuerdo a la cantidad que nos indica, con
ayuda de nuestra pipeta
4) Empezamos a invertir cada muestra, teniendo en cuenta que en el último tubo no se
hace este paso

5) Una vez obtenido la muestra de sangre, agregamos muestra de sangre a cada tubo y
lo dejamos reposar por 10 min. Este paso lo realizamos con ayuda de la jeringa.

6) Volvimos a invertir cada tubo de ensayo y lo llevamos a centrifugar por 10 min.

 7)
8) Finalmente obtuvimos cada tubo de ensayo en la que pudimos
diferenciar cada uno de ellos, en que medio se encontraban.

HIPOTONICO HIPOTONICO ISOTONICO

TOTAL PARCIAL

Control de hemolisis
total para comparación
visual

V. CONCLUSION:

Esta práctica nos sirvió para determinar la resistencia de la membrana de

los glóbulos rojos al hemólisis en presencia de diferentes concentraciones
de soluciones salinas hipotónicas a temperatura ambiente y vimos en cuál
de ellas se presenta hemólisis inicial y total, los cuales del tubo 1 al 3 se
observaba en un medio hipotónico total, 4, 5 y 7 en un medio hipotónico
parcial, donde el tubo 6 también debió ser así, pero por error de cantidad
no se pudo observar ese medio en el tubo, y en el tubo 8 – 9 se
encontraban en medios Isotónicos.