COLORANTE WRIGHT

Para diagnóstico “in vitro”

Principio del método Técnica

Los colorantes tipo Romanowsky están formados por Azul de Metileno y
sus derivados oxidados, colorantes básicos, y el colorante ácido Eosina.
WRIGHT
Los colorantes básicos se unen a los componentes ácidos de las células,
ácidos nucleicos, gránulos en neutrófilos y proteínas ácidas que se tiñen de
1. La extensión, secada al aire y sin fijar, se cubre totalmente
un color rojo púrpura mas o menos intenso, mientras que la eosina se une
con un volumen conocido de colorante (1 ml. aprox.) que se
a la hemoglobina, componentes básicos de las estructuras celulares y los
deja actuar durante 5 min.
gránulos de los eosinófilos.
2. Posteriormente, se añade, gota a gota, igual volumen de agua
El balance entre el azul de metileno y sus derivados oxidados y entre estos
tamponada (pH 6,8) soplando ligeramente con la pipeta para
y la Eosina, proporciona una tonalidad más o menos azul y una mayor o
conseguir una mezcla homogénea.
menor intensidad en la coloración, que son característicos de cada tipo de
colorante Giemsa, May-Grünwald o Wright.
3. Después de 5 min. se vierte el colorante, se lava con agua
tamponada (pH 6,8) y se deja secar al aire.
Utilización
Para la tinción de células sanguíneas y de médula ósea.

Resultados
Reactivos Eritrocitos: Color rosa o rosa - anaranjado.
Wright 1 x 500 ml Ref. 99 79 39 Plaquetas: Color violeta pálido o púrpura.
Neutrófilos: Núcleo violeta oscuro. Citoplasma rosado con granulaciones
rojo violeta.
Composición
Eosina-azul de metileno según Wright 2,5 g/L Eosinófilos: Núcleo violeta. Citoplasma azul con gránulos rojos o rojo
Metanol 1L anaranjado.
Basófilos: Núcleo azul oscuro o púrpura. Gránulos púrpura casi negros.
Linfocitos: Núcleo púrpura. Citoplasma azul celeste.
Conservación y estabilidad Monocitos: Núcleo laxo violeta. Citoplasma azul celeste.
Almacenado a temperatura ambiente (15 - 25º C), el reactivo permanecerá
estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta. Los resultados indicados son orientativos ya que la intensidad y la
Evitar el frío excesivo que puede provocar la precipitación del colorante. tonalidad del color varían con el pH usado en la tinción.
En general la coloración con el reactivo de Wright da lugar a coloraciones
más rojizas al disminuir el pH del agua tamponada utilizada.
Precauciones
A causa del contenido en metanol, el colorante es tóxico e inflamable.
Se aconseja consultar las fichas de datos de seguridad antes de su uso.. Notas
La eliminación de los residuos debe hacerse según la normativa legal La metódica de tinción indicada es la utilizada de rutina en nuestros
vigente. laboratorios.
La manipulación de las muestras y del reactivo debe hacerse con las Cada usuario puede aplicar las diversas variantes de este procedimiento,
debidas precauciones aplicando las directrices de seguridad del laboratorio. tanto manual como automático, que se ajuste a su metódica estándar.
La intensidad de la coloración es proporcional al tiempo de tinción.
Para obtener resultados óptimos el colorante debe preservarse de la
Muestra humedad.
Extensiones de sangre secadas al aire. Se recomienda que sean finas y Para los procesos de lavado se recomienda utilizar agua tamponada
homogéneas para obtener una mejor fijación del colorante sin sobrecolo- en lugar de agua corriente. Esta tiene un pH y un contenido en sales
raciones. variables que, junto con concentraciones elevadas de cloro, pueden alterar
Para obtener buenos resultados se aconseja realizar la tinción durante los resultados de la tinción y dar lugar a resultados no consistentes.
las dos horas siguientes a la preparación. Las extensiones viejas, pueden
teñirse de forma irregular.
La muestra idónea es sangre capilar pero si se usa sangre venosa se Bibliografía
aconseja utilizar EDTA como anticoagulante. El uso de la Heparina está Clark, G., Staining procedures (1981), 4thed. Williams & Willkins.
desaconsejado. Krafts Woronzoff-Dashkoff, Kristine, Clinics in Laboratory Medicine. Vol
22 (2002).
Biological Stains (1977) 9th ed. Ed. by R .D. Lillie; Williams & Willkins.
Material necesario
Láminas para la extensión de la sangre.
Sistema, manual o automático, de tinción.
Agua tamponada.
Microscopio.

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QUIMICA CLINICA APLICADA S.A.
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Revisión: Julio 2011 PRO4_REG9_WRI_2