FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

Proceso de diseño curricular

GUÍA DE LABORATORIO
Código: FCQ-P05-F05; Versión: 01: 15 de enero de 2017

Contenido del informe de laboratorio

Asignatura: Biología Celular NOTA

Número de práctica: 4 CÉLULAS EUCARIOTAS
Fecha de realización: 2018-10-15 Fecha de entrega: 2018-10-16
Integrantes / Grupo N°: Stalin Josué Chasi Tello

1. TÍTULO: CÉLULAS EUCARIOTAS

2. OBJETIVOS

 Conocer métodos de tinción sencillos para la observación de células en el microscopio.

 Reconocer características básicas de células eucariotas vegetales y animales.

 Diferenciar las características que presenta la membrana celular de la célula animal y la

pared celular de la célula vegetal.

3. FUNDAMENTO TEÓRICO

 CÉLULAS PROCARIONTES
Se trata de microorganismos unicelulares cuyo material genético no se encuentra
rodeado de membranas. La importancia de los procariontes es enorme en nuestro
planeta. A pesar de que algunos son patógenos para el ser humano, la mayoría son
indispensables para el desarrollo de la vida en la Tierra; casi todos los gases de la
atmósfera son subproductos del metabolismo de los procariontes: el nitrógeno, por
ejemplo, constituyente fundamental de proteínas y ácidos nucleicos, procede
prácticamente de la fijación bacteriana de este elemento.
.
 LAS BACTERIAS COMO PATÓGENOS VEGETALES

Las bacterias son microorganismos unicelulares, generalmente con un tamaño de 1-2

µm, que no pueden verse a simple vista. Las bacterias asociadas a las plantas pueden ser
benéficas o dañinas. Todas las superficies vegetales tienen microbios sobre ellas
(epífitos), y algunos microbios viven dentro de las plantas (endófitos). Algunos son
residentes y otros transitorios.

Las bacterias asociadas con las plantas tienen morfología variada, como puede verse
con los microscopios convencionales con una amplificación de 400x a 1000x.
Inicialmente, estas formas constituyeron una manera simple de diferenciarlas. Hay
bacilos (bastones), cocos (esféricas), bastones pleomórficos (tendencia hacia formas
irregulares) y formas espiraladas. La mayoría de las bacterias asociadas con las plantas
son bastones. Sin embargo, la ciencia moderna ha demostrado por análisis bioquímico,
genético y de biología molecular que estas bacterias son bastante heterogéneas. Algunas
están relacionadas y se agrupan con patógenos animales y humanos.

 LA TINCIÓN GRAM

La tinción de Gram es uno de los métodos de tinción más importantes en el laboratorio

bacteriológico. Su utilidad práctica es indiscutible y en el trabajo microscópico de rutina
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del Laboratorio de Microbiología las referencias a la morfología celular bacteriana
(cocos, bacilos, positivos, negativos, etc) se basan justamente en la tinción de GRAM

Las bacterias gram-positivas y gram-negativas tiñen de forma distinta debido a las

diferencias constitutivas en la estructura de sus paredes celulares. La pared de la célula
bacteriana sirve para dar su tamaño y forma al organismo así como para prevenir la lisis
osmótica. El material de la pared celular bacteriana que confiere rigidez es el
peptidoglicano. La pared de la célula gram-positiva es gruesa y consiste en varias capas
interconectandas de peptidoglicano así como algo de ácido teicoico. Generalmente,
80%-90% de la pared de la célula gram-positiva es peptidoglicano. La pared de la célula
gram-negativa, por otro lado, contiene una capa mucho más delgada, únicamente de
peptidoglicano y está rodeada por una membrana exterior compuesta de fosfolípidos,
lipopolisacáridos, y lipoproteínas. Sólo 10% - 20% de la pared de la célula gram-
negativa es peptidoglicano. Para poner de manifiesto las células gram-negativas se
utilizan una coloración de contraste. Habitualmente es un colorante de color rojo, como
la safranina o la fucsina básica. Después de la coloración de contraste las células gram-
negativas son rojas, mientras que las gram-positivas permanecen azules.

 BACTERIAS DEL YOGURT.

El yogur es un producto lácteo producido por la fermentación natural de la leche. A

escala industrial se realiza la fermentación añadiendo a la leche dosis del 3-4% de una
asociación de dos cepas bacterianas: el Streptococcus termophilus, poco productor de
ácido, pero muy aromático, y el Lactobacillus bulgaricus, muy acidificante. En esta
preparación se podrán, por tanto, observar dos morfologías bacterianas distintas (cocos
y bacilos) y un tipo de agrupación (estreptococos, cocos en cadenas arrosariadas).
Además, el tamaño del lactobacilo (unos 30µm de longitud) facilita la observación
aunque no se tenga mucha práctica con el enfoque del microscopio.

4. PROCEDIMIENTO

1. OBSERVACIÓN DE MICROFLORA BACTERIANA EN CAVIDAD BUCAL:

a. Colocar una gota de suero fisiológico sobre el portaobjetos.
b. Con un mondadientes o hisopo estéril obtener una muestra de sarro dental o mucosa
bucal, expandir la muestra con movimientos circulares en la gota de suero fisiológico.
c. Secar a temperatura ambiente y luego agregar violeta de genciana, dejar por 1 minuto,
luego lave con abundante agua.
d. Agregar a la muestra 1 gota de lugol y esperar 1 minuto, luego lave con alcohol hasta que
no salga más colorante (o con una mezcla de alcohol-acetona1:1 v/v).
e. Agregar a la muestra 1 gota de safranina durante1/2 minuto, luego Lave con
abundantemente agua.
f. Deje secar, una vez seca la muestra, observe al microscopio (con poco aumento y luego
con el objetivo 100 x). Esquematice sus observaciones.
h. Si aparecen bacterias coloreadas de morado son GRAN POSITIVA, y si aparecen de
color rojo son GRAN NEGATIVA.

2. OBSERVACIÓN DE Lactobacillus EN UNA MUESTRA DE YOGURT:

a. Colocar una gota de yogurt y una pequeña gota de agua en el extremo de un portaobjetos
y con otro realice un frotis (extender el material).
b. Dejar secar al ambiente, luego colocar una gota de azul de metileno, dejar de 1 minuto,
luego lave con abundantemente agua.

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c. Deje secar, una vez seca la muestra, añada una gota de glicerina, coloque el cubreobjetos,
observe al microscopio (con poco aumento y luego con el objetivo 100 x). Esquematice sus
observaciones.

3. OBSERVACIÓN DE ALGAS EN AGUA ESTANCADA:

a. En un portaobjetos agregue una gota de agua estancada y colocar un cubreobjetos.
b. Observar la preparación húmeda, si la imagen no es muy clara agregué una gota de aceite
de inmersión y observe con 100 x. Esquematice sus observaciones.

5. OBSERVACIÓN DE PLACAS PREPARADAS:

a. Observe una placa preparada con 40x y 100x., e identifique a que células corresponden y
esquematice sus observaciones.

5. RESULTADOS

GRÁFICOS:

1. OBSERVACIÓN DE MICROFLORA BACTERIANA EN CAVIDAD BUCAL:

Se observó una coloración rojiza en

gran acumulación en las bacterias de la
cavidad bucal al teñirlas con colorante
para su identificación.

2. OBSERVACIÓN DE Lactobacillus EN UNA MUESTRA DE YOGURT:

Se observó coloración azul levemente

en las bacterias del yogurt puesto que
sus bacterias son Gran positivas.

3. OBSERVACIÓN DE ALGAS EN AGUA ESTANCADA:

Presencia de microorganismos vivos,

bacilos de color verde que se desplazaban
a gran velocidad.

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4. OBSERVACIÓN DE PLACAS PREPARADAS:

Las muestras preparadas se tiñeron de un

color morado azulado, mostrándonos que
estas bacterias eran Gram positivas.

6. DISCUCIÓN DE RESULTADOS

El método cualitativo utilizado fue válido, ya que, las características cualitativas que se
esperaban observar e identificar, como las diferentes tinciones de cada muestra bacteriana,
diferentes tipos de células y sus partes, fueron vistas con perfecta claridad.

El yogurt tenía escasa cantidad de tinción, por lo que se le puede catalogar como un error
sistemático al hecho de que, el colorante no se pudo fijar fuertemente a las bacterias por la
escases de tiempo que se dio para teñirse.
Un error aleatorio que se dio fue en el agua estancada ya que tenía gran cantidad de residuos
vegetales e inertes, por lo que el operador pudo confundir dichos residuos con
microorganismos.

7. CONCLUSIONES

 La tinción Gram lo que diferencia es el tipo de pared celular de la bacteria y de esto

depende el color que tome en presencia de esta prueba.
 Las células animales se distinguen de las células vegetales en que carecen de paredes
celulares y de cloroplastos y debido a la carencia de pared celular rígida, las células
animales pueden adoptar variedad de formas e incluso pueden fagocitar otras
estructuras como las identificadas en el microscopio.
 En la célula se encuentra disperso el material genético y esto es lo que permite
visualizar en el microscopio, a todos estos organismos se los llama eucariontes.

8. CUESTIONARIO

1. ¿Qué tipo de organismos son las bacterias?

Las bacterias son organismos unicelulares procariontes, esto quiere decir que están
formados por una sola célula carente de núcleo
2. ¿El yogurt es un alimento más fácil digerible que la leche, ¿por qué?
Si, en primer lugar, por la acción de bacterias que transforman la lactosa de la leche en
ácido láctico durante el proceso de fermentación, dando origen al yogurt como lo
conocemos, y en segundo lugar, porque durante la fermentación se produce una
predigestión de las proteínas, lo que facilita su posterior asimilación.

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3. ¿Qué tipo de bacterias se pueden encontrar en los nódulos de raíces y en las agallas de
las plantas?
Namatodos que dañan las raíces de multitud de plantas. Se introducen en ellas y
absorben sus jugos.
4. Realice una tabla en la que se pueden observar las enfermedades que pueden causar las
bacterias gram positivas y gram negativas.

Bacterias gram positivas Bacterias gram negativas

Neumonía lobar Gonorrea
Gatroenterítis Fiebre tifoidea
Infección de vías urinarias Sífilis
Sepsis Meningitis
Celulitis Pielonefritis
Fiebre reumática Apendicitis
Meningitis neonatal Formación de cálculos
Tétanos Infecciones de las vías aéreas

9. BIBLIOGRAFÍA

 Nim, G. V. (2000). Introducción a la microscopía aplicada a las ciencias biológicas.

México: Universidad Nacional Autónoma de México.
 Rodríguez, G. (1998). Microbiología médica. Madrid: Haurcort Brace.
 Tortora, F. C. (2007). Introducción a la microbiología. Madrid: Panamericana.

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