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GUIA 1

CINÉTICA DE CRECIMIENTO MICROBIANO EN CULTIVOS BATCH

1.1.- Un fermentador de 10 litros de medio es inoculado con 500 mL de inóculo de 4,1 g/L. Se sabe que si se
deja crecer la cepa, al cabo de 6 horas la biomasa en el fermentador será de 6 g/L.
Determinar el tiempo de duplicación y el tiempo que deberá permanecer la cepa en el fermentador para
alcanzar la misma concentración del inóculo.

1.2.- La concentración celular en un matraz agitado es 0,5 g/L. Se sabe que el sustrato limitante es la
glucosa, cuya concentración inicial es de 10 g/L.
Si al final del cultivo (5 hrs.) se tiene que la bacteria ha llegado a una concentración de 10 g/L. Estimar al
porcentaje de carbono en esta cepa.

1.3.- Un cultivo por lotes se realizó a 15 ºC en un fermentador con 10 litros de caldo, inoculado con 300 mL
de cultivo de 5,5 g/L. Cuando ha transcurrido la mitad del tiempo de cultivo, la temperatura aumenta a 35 ºC,
manteniéndose hasta el final del cultivo. Se sabe que el tiempo de duplicación de esta cepa es, a 20 ºC, de 32
minutos, y a 30 ºC de 24 minutos. Calcular el tiempo total de fermentación si se sabe que el rendimiento de la
fuente de carbono es 0,5, siendo agregado 8 g/L de ella.

1.4.- A un fermentador con 4,9 L de caldo se agregó inóculo bacteriano de 100 mL con una concentración de
25 g/L, la cepa se dejó crecer y al cabo de “n” horas se obtiene en el fermentador una concentración de 35
g/L. Exprese, en función de n, el valor del td y del tiempo que debería haber estado la cepa en el fermentador
para alcanzar la misma concentración del inóculo (25 g/L).

1.5.- El td de una cepa a 25 ºC es 37 minutos, y a 37 ºC es 29 minutos. La cepa se inocula en un fermentador


a una temperatura de 20 ºC; luego de 3 horas se aumenta a 30 ºC y finalmente la cepa se cultiva a 37 ºC por
3 horas. Para inocular el fermentador se utilizaron 2 gramos de células que se homogeneizaron en 500 mL de
medio, e inmediatamente se inocularon en el fermentador de volumen 100 litros. Determine el tiempo total de
cultivo si se sabe que la masa seca final del reactor fue de 2 kilos.

1.6.- En un reactor por lotes se realiza un cultivo mixto con dos tipos de bacterias. Al comienzo del cultivo
(X1)0 = 2 (X2)0, y se sabe por bibliografía que µ2 = 2µ1. Determine el tiempo que debe transcurrir para que la
relación inicial se invierta. Obtenga además el tiempo en el cual la concentración de la cepa 1 es igual a la de
la cepa 2.

1.7.- Se sabe que el crecimiento de hongos filamentosos no es exponencial, y se han propuesto diversos
modelos para representarlo. Uno de ellos es el modelo de Koch:
1 1
W 3
= W0 3 + k ⋅ t donde W corresponde a la concentración micelial, t es la variable tiempo y k es
una constante de velocidad de crecimiento.

En un experimento se inoculan simultáneamente 0,2 g/L de la bacteria y el doble de hongo a un mismo


matraz (30 ºC), desarrollándose sin interacción entre ellos. Se inocula. Se ha determinado previamente que
en las condiciones de cultivo k es 0,22 (g/L)1/3 h-1 y µ es 0,44 hr-1.
a) Determine el tiempo de cultivo al cual ambas poblaciones alcanzan la misma concentración,
considerando despreciable la fase de latencia para ambos casos.
Diseño de Bioreactores

b) Si después de 5 horas de cultivo a 30 ºC se produce una falla y la temperatura baja a 25 ºC por 5 horas
más, calcule las concentraciones finales de bacterias y hongos. La energía de activación de la bacteria es
68 kcal/mol y se sabe que k es directamente proporcional al cubo de la temperatura absoluta.

1.8.- Se tiene un cultivo aerobio de Klebsiella aerogenes en un fermentador de 10 litros de medio inoculados
con 500 mL de inóculo (4,1 g/L). El nutriente limitante, glucosa, está inicialmente presente en una
concentración de 18 g/L.
a) Estimar el tiempo de cultivo, si la velocidad específica de crecimiento a la temperatura de fermentación
(28 ºC) es de 0,67 hr-1. Considere despreciable la fase de latencia y que la célula posee 50% de carbono.
b) Cuando transcurría la mitad del tiempo determinado en (a), se agregaron 3 litros de una solución estéril
de glucosa de 25 g/L, además de los otros componentes de medio. Además, se cambia la temperatura de
28 ºC a 34 ºC. Calcular el tiempo total de cultivo y la concentración celular final, si la energía necesaria
para activar su metabolismo reproductivo es de 13 kcal/mol.

1.9.- Un tipo de microorganismo fue cultivado en modalidad batch, y los siguientes datos fueron obtenidos:

Tiempo Concentración Concentración de


(h) celular (g/L) glucosa (g/L)
0 1,25 100
9 2,45 97
16 5,1 90,4
23 10,5 76,9
30 22 48,1
34 33 20,6
36 37,5 9,38
40 41 0,63

a. Determine la máxima velocidad específica de crecimiento


b. Calcule el rendimiento de sustrato
c. ¿Cuál es la máxima concentración celular que uno podría esperar si 150 gramos de glucosa fueron
usados con el mismo tamaño de inóculo?

1.10.- Una fermentación batch simple de un cultivo aeróbico bacteriano creciendo sobre metanol entrega los
resultados mostrados en la tabla adjunta. Determinar: Tiempo (h) X (g/L) S (g/L)
a. La máxima velocidad específica de crecimiento (µM) 0 0,2 9,23
b. El rendimiento global de sustrato en células (YX/S) 2 0,211 9,21
4 0,305 9,07
c. El tiempo de duplicación.
8 0,98 8,03
d. La constante de afinidad por el sustrato (KS) 10 1,77 6,8
e. La velocidad específica de crecimiento a t=10 h 12 3,2 4,6
14 5,6 0,92
16 6,15 0,077
18 6,2 0

1.11.- El crecimiento aeróbico de S. cerevisiae sobre etanol es simplemente descrito por la reacción:
C 2 H 5 OH + a O 2 + b NH 3 → c CH 1, 704 N 0 ,149 O 0 , 408 + d CO 2 + e H 2 O
Conociendo que el cuociente respiratorio es 0,66, determine el rendimiento de sustrato en células (g/g) y el
rendimiento de oxígeno en células (g/g).

Departamento de Ingeniería Química 2 IIQ-461


Agosto, 2005 Diseño de Bioreactores

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