Research

reports A RESEARCH UPDATE

FOR THE VETERINARIAN
FROM AFFINITY PETCARE

Estudo Leishmaniose
Victor Romano, DVM
Departamento R&D Affinity Petcare S.A.
1. ANTECEDENTES

A Leishmaniose canina é uma doença causada por um parasita intracelular, endémica da zona mediterrânica. No final da década
de 90, publicaram-se 2 estudos retrospetivos, cada um dos quais incluindo 150 animais infetados de forma natural pelo parasita
Leishmania infantum, e por meio dos quais se analisaram os principais sintomas e alterações analíticas em cães com
Leishmaniose. Os resultados de ambos os estudos foram bastante semelhantes e demonstravam que as principais complica-
ções eram a linfadenopatia, palidez das mucosas, dermatite, perda de peso e anorexia.

2. OBJETIVOS Em relação às alterações analíticas, as mais frequentes

DO ESTUDO
foram a anemia, alterações das proteínas plasmáticas
Tendo em conta os dois estudos referidos e trombocitopenia.
anteriormente, foi delineado um estudo
cujos objetivos eram os de determinar Foram excluídos aqueles animais que apresentavam De igual forma, foram sendo eliminados, no decorrer
a evolução clínica e analítica (com ênfase alguma doença sistémica, além da Leishmaniose, do estudo, aqueles animais que por algum motivo
especial na distribuição de linfócitos) de exceto os animais positivos para Ehrlichia, que descontinuaram o tratamento farmacológico e/ou
cães com Leishmaniose clínica evidente, foram tratados contra esta doença (seguindo dietético.
que foram tratados com fármacos o protocolo descrito no seguinte parágrafo).
O tratamento farmacológico consistiu em:
e alimentados com um alimento concebido
Por razões dietéticas, não foram incluídos cães que Antimoniato de meglumina: 80 mg/kg/dia
especialmente para este tipo de pacientes. apresentavam azotemia, já que a dieta utilizada não durante 45 dias
era indicada para animais com alterações renais. Alopurinol: 10 mg/kg/12 h durante 90 dias
Foram incluídos no estudo cães de
(duração do estudo)
entre 1 - 9 anos de idade, diagnosticados Sintomas/ Descobertas
pelo veterinário por meio de algum dos Nos animais positivos para
Vet Rec JAAHA
métodos aceites (lavagem de aspiração 1997 1999 Ehrlichia, o tratamento foi:
da medula óssea ou aspiração do gânglio n=150 n=158 Doxiciclina: 5 mg/kg/12 h via oral durante 20 dias
linfático, IFI, ...) e que apresentavam Linfadenopatia 90 65
Imidocarb: 5 mg/kg IM injeção única
sintomatologia clínica evidente de Mucosas pálidas 60 75 O tratamento dietético consistiu em Advance
Leishmaniose canina. Dermatite 60 50 Veterinary Diets Leishmaniasis Management, cujas
No total de casos, o diagnóstico efetuado características principais são:
Perda de peso 35 25
pelo veterinário foi confirmado no - elevado teor de antioxidantes como estimulante
Anorexia 20 17
laboratório por meio de dois métodos imunitário
Anemia 60 73 - níveis de proteína adequados a animais adultos
serológicos: ELISA e PCR.
Nenhum animal podia ter sido tratado Hiperproteinemia 63 72 de elevado valor biológico, para ajudar na
Hipoalbuminemia 68 recuperação de massa muscular minimizando
contra esta doença previamente ao início
os efeitos negativos a nível dos rins
do estudo. Hipergamaglobulinemia 71
Trombocitopenia 29

Figura 1

-1-
 Research
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- alta digestibilidade e bom paladar para ajudar
Animais com valores anormais: proteínas Dia 0  Dia 30  Dia 90
na recuperação do peso (Nº de animais/21)
- conteúdo reduzido de bases purinas para 14
prevenir a formação de cálculos de xantina, como 12 13
efeito secundário do tratamento com alopurinol 12
1 11
10
0 9
8 8
8 7 7 7

3. Esquema do estudo 6
4 3
2 2 1
2 1
O estudo foi multicêntrico e englobou 6 clínicas Eritrócitos Hct Hb TTodos Algum
veterinárias da área mediterrânica (zona endémica). 0
Tal como já foi referido, os animais com sintomas Figura 2
de Leishmaniose e possíveis candidatos a ser
incluídos no estudo por cumprirem todos os critérios Animais com valores anormais: proteínas Dia 0  Dia 30  Dia 90
(Nº de animais/21)
de inclusão foram diagnosticados pelo veterinário.
Se o diagnóstico era positivo, eram chamados para 16
14 15
a primeira de 3 consultas programadas durante os 12
90 dias de duração do estudo: 10 12
8 10 9 9
6 7 8
Dia 0: dia da primeira consulta. O veterinário 5
preenchia uma ficha de recolha de dados, que 4 3
2 4 2
2 3
incluía os sinais clínicos e a exploração clínica, com 0 1 0 1 0 0
especial atenção às lesões cutâneas. Nesta primeira Prot Alb g-Glob A/G Todos Algum
visita, eram recolhidas amostras de sangue e de Figura 3
urina. De igual forma, neste primeiro dia iniciava-se
o tratamento farmacológico e dietético.

A ração diária para cada animal era estabelecida
de acordo com as recomendações nutricionais
da Advance Veterinary Diets Leishmaniasis
Management.
Dia 30: Realizava-se uma consulta/revisão do
estado do animal e procedia-se à extração de
sangue e de urina. De igual forma, preenchia-se
a ficha de recolha de dados relativa a esta visita
intermédia.
Dia 90: era realizada a consulta do fim do estudo,
que incluía a folha de recolha de dados (idêntica
à do dia 0). Também se extraía sangue e urina, bem
como uma avaliação do estado do animal.
Durante os 90 dias de duração do estudo, os cães
continuaram com o seu estilo de vida, já que em
nenhum momento foi necessário o internamento
na clínica nem nenhuma outra atividade que
implicasse uma modificação dos seus hábitos.
nos 3 parâmetros analisados [contagem
de eritrócitos, hematócrito e hemoglobina]
e 13/21 animais apresentavam pelo menos um dos
três valores anormais. Ao fim de 30 dias, e de forma
mais clara aos 90 dias, verificava-se uma clara
melhoria, comprovada pelo facto de no fim do estudo
(dia 90) apenas 3/21 animais apresentavam, ainda,
alguma alteração, e somente 1/21 apresentava
alteração nos três parâmetros. (Figura 2)
4.1.2 Trombócitos

Da mesma forma que com os parâmetros

4. Resultados do estudo
O estudo, que decorreu entre junho e novembro de
2004, incluiu 21 animais, sem predisposição de
raça, com uma média de idades de 4,5 anos e um
peso médio de 24,8 kg.
A distribuição por pesos demonstrou uma maior
presença de animais de grande porte, resultados
que aparentam ser lógicos se se tiver em
consideração que esta doença é transmitida pela
picada de mosquitos, que por norma são mais ativos
ao anoitecer/amanhecer, e que, como tal, picam com
mais facilidade os animais que dormem no exterior.
4.1 Análises sanguíneas
4.1.1 Eritrócitos e parâmetros associados
relacionados com os eritrócitos, no início do estudo
7/21 animais apresentavam trombocitopenia, a qual
melhorava após 30 dias de tratamento (3/21), e que
apenas afetava a 1/21 animais no fim do estudo,
após 3 meses de tratamento.
4.1.3 Proteínas plasmáticas
As principais alterações detetadas no início do
estudo foram a hiperproteinemia (presente em
10/21 animais), uma hipoalbuminemia (9/21)
e uma hipergamaglobulinemia (8/21). Em relação
à condição de cada animal, 15/21 apresentavam
alguma alteração nas proteínas plasmáticas,
situação que melhorou claramente aquando
dos 90 dias do estudo, altura em que apenas
3/21 animais ainda possuíam algum parâmetro
anormal. (Figura 3)

No dia 0 do estudo, os resultados obtidos 4.1.4 Creatinina

demonstravam a presença generalizada de
alterações nos eritrócitos e nos parâmetros Apesar de os animais com azotemia não terem sido
associados: 9/21 animais apresentavam alterações incluídos no estudo, foram controlados os níveis

- 2-

de creatinina em todos os animais, para verificar
o estado renal dos animais do estudo, que estavam
a ser tratados com alopurinol e antimoniato de
meglumina, e alimentados com uma dieta com
níveis moderados de proteínas.
Todas as amostras realizadas nos 21 animais
durante o estudo (3 amostras por animal)
apresentaram níveis dentro do normal,
demonstrando o bom estado renal dos cães.
4.2 Sintomatologia clínica
4.2.1 Peso e Estrutura Corporal
Durante os três meses do estudo, deu-se um
aumento do peso corporal de 8 %, em média.
Dado que a avaliação do peso não tem em conta
o estado do animal (baixo peso/sobrepeso),
estudou-se o Índice de Massa Corporal (BCS, do
Inglês “Body Condition Score”), utilizando para
o efeito uma tabela de 9 pontos.
Este método avalia o animal em função de
parâmetros objetivos (palpação das costelas,
observação da cintura, etc.) e classifica os animais
de acordo com a avaliação de uma escala de 1 - 9,
onde 1 representa um animal magro, 5 é o peso ideal
e 9 representa um animal extremamente obeso.
Utilizando a avaliação BCS nos animais que no
início do estudo apresentavam um peso abaixo
do ideal (BCS menor ou igual a 4), ou seja, aqueles
animais que realmente necessitam aumentar de
peso, durante os 90 dias de tratamento deu-se um
aumento de 24 %.
De igual forma, verificou-se um relação entre o
BCS e certos parâmetros de saúde: os animais que
apresentavam um BCS menor que 4 no início do
Alterações dermatológicas
(Nº de animais/21)
18
18
16 Dia 0
Dia 90
14
12
10
8 9
6 29,8
4 5 5
2 3
0 0 2
0
3 2 1 0
Avaliação subjetiva da gravidade
Figura 4
estudo (peso inferior ao ideal) apresentavam piores
resultados em certos parâmetros (contagem de
eritrócitos, hemoglobina e hematócrito; proteínas
totais, albumina e globulinas; proteína C reativa),
indicando que não só a sua condição corporal era
pior do que a dos outros animais (maior que 4),
como também o seu estado geral.
4.2.2 Linfadenopatia
A linfadenopatia presente na maioria dos animais
com Leishmaniose deveu-se à estimulação dos
folículos linfoides e à proliferação dos macrófagos,
devido, basicamente, a uma resposta imunitária
deficiente. Assim, a melhoria na linfadenopatia é um
sinal de melhoria do estado imunitário do animal.
No início do estudo, 12/21 animais apresentavam
linfadenopatia importante (avaliada pelo veterinário
como sendo de grau 3 ou 4 numa escala de 1 - 4).
Esta situação reverteu-se durante o tratamento: no
fim do estudo apenas 2/21 animais apresentavam
a referida inflamação dos gânglios linfáticos.
4.2.3 Alterações dermatológicas
Para avaliar as alterações da pele, pediu-se
aos veterinários que avaliassem o seu estado
numa escala 0 - 3, onde 0 representa ausência
e 3 representa uma pele muito afetada.
A evolução foi muito positiva: no início do
estudo 14/21 animais apresentavam alterações
consideradas graves (valores de 2 e 3 numa
escala de 0 - 3), enquanto que no dia 90 nenhum
animal apresentou um valor de 2 nem de 3 (todos
apresentavam lesões leves ou ausência de lesões).
(Figura 4) ou seja, uma proteína que aumenta
a resposta à inflamação/infeção, de forma rápida.
Igualmente, se não existe uma nova infeção e a
inflamação for diminuindo, os níveis desta proteína
Proteína C Reativa (CRP) ng/ml
(Nº de animais/21)
60
50 53,1
40
30
20 24,5
10 15,3
0 0
Dia 0 Dia 30 Dia 90
Figura 5
-3-
Research
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também diminuirão. O seu estudo permite conhecer
o estado inflamatório do animal.
Os níveis de CRP no início do estudo foram de
53,1 ng/ml, dando-se uma rápida diminuição
aquando dos 30 dias (24,5 ng/ml) e uma diminuição
mais lenta até aos 90 dias (15,3 ng/ml). (Figura 5)
4.3.2 Vitamina E
No início do estudo, os níveis de vitamina E eram
de 7,1 μg/ml, enquanto que aos 30 dias os níveis
aumentaram para 22,9 μg/ml, e até 38,6 μg/ml no
final do estudo.
Este aumento dos níveis de vitamina E é de suma
importância para animais com Leishmaniose, já
que a vitamina E estimula o sistema imunitário:
aumenta a atividade dos macrófagos e dos
neutrófilos, estimula a produção de linfócitos CD4+
(T helper), incrementa as interleucinas essenciais
para a resposta celular tipo Th1 (IL-2) e diminui os
mediadores da resposta humoral Th2 (IL-6, PGE2).
Assim, é possível potenciar a imunidade celular,
essencial para uma boa resposta imunitária,
diminuindo-se a imunidade humoral, responsável
por parte dos sintomas da doença.
4.3.3 Populações de linfócitos
Os animais com Leishmaniose apresentam
geralmente um desequilíbrio nas populações
de linfócitos. Em particular, os linfócitos CD8+
(T citotóxicos) encontram-se elevados e os
CD4+ (T helper) baixos.
O tratamento combinado de fármacos e nutrição
deverá reverter esta situação, ajudando o animal
a possuir uma resposta imune mais eficaz para
lutar contra a infeção.
% linfócitos
(Nº de animais/21) Dia 0
Dia 90
60
50 53,3
40 42,8
35,7
30
20
10
CD4+ CD8+
Figura 6
 Research
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No início do estudo, os valores de CD4+ e de CD8+ Desta forma, a linfadenopatia poderia representar
Relação linfadenopatia/ Dia 0
estavam alterados (42,8 % e 35,7 % respetivamente). um bom indicador de resposta imunitária eficaz nos
população linfócitos Dia 90
Esta situação alterou-se após os 90 dias do animais com Leishmaniose. (Figura 7)
tratamento, quando os valores se normalizaram 1,6
1,6
(CD4+ 53,3 % e CD8+ 29,8 %). (Figura 6) 1,5
1,4

De igual modo, o indicador CD4+/CD8+ passou de 1,2 5. Conclusões 1,2

no dia do início do estudo para 1,8 no final do mesmo 1,0 1,1
Após 90 dias de tratamento combinado
Uma observação interessante foi a relação existente farmacológico/ nutricional adequado, os animais 0,8
entre os níveis de linfócitos CD4+ e a linfadenopatia. alcançaram uma recuperação quase total. 0,6

Foi observado que os animais com níveis elevados - Melhorou a resposta imunitária, como se pode 0,4
de CD4+ após 90 dias de tratamento farmacológico demonstrar pelo aumento da vitamina E, pela 0,2 0,3
e nutricional (animais com boa resposta imunitária) normalização das populações de linfócitos
apresentavam uma redução mais evidente na (aumento de CD4+/ diminuição de CD8+) 0,0
CD4+ dia 90<50 CD4+ dia 90>50
linfadenopatia, quando comparados com os animais e pela normalização dos níveis de proteínas
com níveis de CD4+ menos elevados aquando do plasmáticas (diminuição das proteínas totais
fim do estudo. e das gamuloglobulinas e aumento da albumina). Figura 7

- Melhoraram os parâmetros hematológicos,

desaparecendo quase por completo a anemia
RECUPERAÇÃO Animais com valores % Normalização e a trombocitopenia. No fim do estudo, apenas
anormais
30 dias 90 dias 3/21 animais apresentavam algum sinal de anemia,
Proteínas Totais 10 30 % 90 % enquanto que somente 1/21 animais apresentava
trombocitopenia.
g-Glob 8 63 % 100 %
Albumina 9 0 % 78 % - Melhoraram os sintomas clínicos da maioria
dos animais (linfadenopatia grave em apenas
2/21 animais; sintomas cutâneos graves ausentes
RBC 12 42 % 83 %
em todos os animais; melhoria do Índice de Massa
Hct 11 36 % 90 % Corporal (BCS), sobretudo nos animais com peso
Hb 10 20 % 80 % inferior ao ideal)
Plaquetas 7 57 % 86 %

LEITURAS RECOMENDADAS
Linfadenopatia 12 – 83 %
Ciamarella P, et al: A retrospective clinical study of canine leishmaniasis in
Dermatologia 14 – 100 % 150 dogs naturally infected by Leishmania infantum. Veterinary Record 1997;
22: 539-543
CRP 17 6 % 75 %
Koutinas A, et al: Clinical Considerations on Canine Visceral Leishmaniasis in
32 % 87 % Greece: A retrospective Study of 158 Cases (1989-1996). J Am Anim Hosp Assoc
1999; 35: 376-383

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Affinity Petcare S.A.
Parque de Oficinas St. Cugat Nord
Pr. Xavier Cugat, 2 – Edifício D, 3º Andar

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08174 St. Cugat Nord – BARCELONA
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