AISLAMIENTO Y OBSERVACION DE ENTERO BACTERIACEAS: ESCHERICHIA, SALMONELLA,

SHIGUELLA
INTRODUCCION:
La familia Enterobacteraceae constituye el conjunto mayor y más heterogéneo de bacilos Gram
negativos. Reciben su nombre por la localización habitual como saprofitos en el tubo digestivo,
aunque se trata de gérmenes ubicuos, encontrándose de forma universal en el suelo, el agua y la
vegetación, así como formando parte de la flora intestinal normal de muchos animales además del
hombre. Se han descrito al menos 27 géneros y 7 grupos entéricos con más de 110 especies. Estos
géneros se han clasificado en función de la homología del ADN, propiedades bioquímicas,
reacciones serológicas, susceptibilidad a bacteriófagos específicos y patrones de sensibilidad a los
antibióticos. Son bacilos Gram negativos, facultativos que fermentan glucosa, son oxidasa
negativos, reducen nitratos a nitritos y no requieren ni su desarrollo se acrecienta con NaCl.
Pueden ser móviles o inmóviles, estas características sirven para diferenciar miembros de esta
familia de otros bacilos Gram negativos facultativos fermentadores de glucosa pertenecientes a la
familia Vibrionaceae. (Guentzel, 1996).
Escherichia coli, el microorganismo más prevalente de esta familia, es una de las bacterias
prototípicas sometidas a estudio. Estas bacterias pueden ser móviles (la mayoría) o inmóviles, la
mayor parte de ellas fermentan la lactosa y son capaces de producir indol a partir de triptófano.
Bacilo gram negativo, anaerobio facultativo que no forma esporas. Salmonella Se trata de un
género de enterobacterias no formadores de esporas, anaerobias facultativas y móviles. Son
oxidasa negativa y prácticamente todas lactosas negativas. Bacilo gram negativo, no desarrollan
capsula ni esporas. Shigella spp. es responsable de la disentería bacilar. Se trata de un cuadro muy
similar al producido por las cepas enterohemorrágicas o enteroinvasivas de E. coli. Gram negativo,
anaerobio facultativo inmóvil sin desarrollo de esporas, que fermentan glucosa, pero no lactosa. El
diagnóstico se realiza a través del coprocultivo. El tratamiento se basa en la rehidratación y
tratamiento antibiótico, que estaría indicado en todos los casos. (Farmer, 1995).
Los medios de cultivos empleados para las enterobacterias son: (Brock, 1990)
1. Agar SS: Medio de cultivo utilizado para el aislamiento de Salmonella spp. y de algunas
especies de Shigella spp. a partir de heces, alimentos y otros materiales en los cuales se
sospeche su presencia. Medio de cultivo selectivo que inhiben el desarrollo de bacterias
gram positivas, de la mayoría de los coliformes. Es diferencial debido a la fermentación de la
lactosa y ácido sulfhídrico a partir del tiosulfato de sodio.
2. Agar MacConkey: Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de
fácil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permiten diferencias bacterias que
utilzian o no, lactosa en muestras clínicas, de agua y alimentos. Todas las especies de la
familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo. Selectivo que inhibe el desarrollo de
gran parte de la flora gram positiva. Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH
alrededor de la colonia.
3. TSI (Triple azúcar de hierro): Es uno de los medios de cultivo más empleados para la
diferenciación de enterobacterias según fermentación o no de glucosa y lactosa, producción
o no de ácido sulfhídrico o gas.
II. OBJETIVOS:
Los de orden general.
MATERIALES:
- Tubos de ensayos
- Mechero
- Muestra de heces
- Aza bacteriológica
- Placa Petri con Agar SS y MacConkey
-
III. PROCEDIMIENTO: DIBUJADO
IV. RESULTADOS: FOTOS
V. COMENTARIO:
VI. CUESTIONARIO:
1. ¿Cómo explicaría usted la conducta de un germen lactosa negativo, H2S positivo, sin gas,
que no aglutina con suero polivalente de Salmonella?
El suero polivalente aglutinante de Salmonella se prepara para su utilización en métodos de
cribado por aglutinación en portaobjetos para la identificación serológica de cultivos con
fines epidemiológicos y diagnósticos. El antisuero proporciona sólo una identificación
serológica. Una identificación completa de un organismo se puede realizar sólo si se utiliza
además un ensayo bioquímico.
2. ¿Cuál es la razón del empleo de medios selectivo indicadores en el coprocultivo?

El uso de los medios para la determinación de los patógenos bacterianos entéricos causantes de
enfermedades gastrointestinales más comunes son los siguientes:

 Para detectar Salmonella y Shigella se usa un medio selectivo y diferencial, como

MacConkey o Eosin metylene blue agar, dado que inhiben los organismos gram
positivo.
 Algunas especies de las bacterias entéricas como la Salmonella y la Shigella no
fermentan la lactosa. Sin embargo, muchas otras varillas gram negativas entéricas son
fermentadores de lactosa.
 En caso de identificarse estas últimas, se indica un agar con triple azúcar de hierro.
 Los cultivos anaeróbicos generalmente no se indican, dado que los anaerobios rara vez
se convierten en patógenos en el intestino. No obstante, se observa una gran cantidad
de anaerobios en las heces.
 3. ¿Cuál es la razón del empleo paralelo sin inhibidor alguno?

4. ¿Qué papel cumplen los sueros polivalentes y los monovalentes?

El antisuero puede clasificarse en monovalente, cuando es eficaz contra una determinada
especie de veneno o polivalente, cuando es eficaz contra una amplia gama de especies, o
varias especies diferentes.
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
- Farmer, JJ 3rd. Enterobacteriaceae: introduction and identification. En: Manual of Clinical
Microbiology. Murray PR, et al, editors. Washington, DC: ASM Press; 1995. p. 438.)
- Guentzel M.N. (1996).
Escherichia, Klebsiella, Enterobacter, Serratia, Citrobacter, and Proteus. In: Barron's
Medical Microbiology (Barron S et al, eds.), 4th ed., Univ of Texas Medical Branch
- Brock, M. J. (1990), Biología de los Microorganismos. Washington, DC: ASM. p. 438.
- American Association for Clinical Chemistry. Stool Culture. Tomado de
labtestsonline.org.
- Healthline Media. Stool Culture. Tomado de healthline.com
- NorthShore University HealthSystem. Análisis de heces. Tomado de
northshore.org
- University of Rochester Medical Center Rochester. Stool Culture. Tomado de:
urmc.rochester.edu
- S. National Library of Medicine. Coprocultivo. Tomado de : medlineplus.gov.

http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/pdf/Enterobacterias_Medicine2010.pdf
https://es.slideshare.net/fedevet/identificacion-deenterobacteriasmicr-1
https://es.slideshare.net/roberchavez/medios-de-cultivo-y-pruebas-bioquimica-presentation
https://es.scribd.com/doc/20181274/11-ENTEROBACTERIACEAE

INTRODUCCIÓN
Los bacilos Gram negativos conforman un grupo compuesto por múltiples familias bacterianas
entre las que destacan la familia Enterobacteriaceae, Vibrionaceae, Pseudomonadaceae y otras.

La familia Enterobacteraceae constituye el conjunto mayor y más heterogéneo de bacilos Gram

negativos. Se han descrito al menos 27 géneros y 7 grupos entéricos con más de 110 especies.
Estos géneros se han clasificado en función de la homología del ADN, propiedades bioquímicas,
reacciones serológicas, susceptibilidad a bacteriófagos específicos y patrones de sensibilidad a los
antibióticos. Son bacilos Gram negativos, facultativos que fermentan glucosa, son oxidasa
negativos, reducen nitratos a nitritos y no requieren ni su desarrollo se acrecienta con NaCl.
Pueden ser móviles o inmóviles, estas características sirven para diferenciar miembros de esta
familia de otros bacilos Gram negativos facultativos fermentadores de glucosa pertenecientes a la
familia Vibrionaceae.

Excepto las especies de Shigella, que rara vez causan infecciones fuera del tracto gastrointestinal,
la mayoría de las Enterobacterias son capaces de producir una variedad de infecciones
extraintestinales. Sin embargo, un pequeño número de especies incluyendo Enterobacter
aerógenes, Enterobacter cloacae, Escherichia coli, Klebsiella pneumoneae, Proteus mirabilis y
Serratia marcescens dan cuenta de la gran mayoría de las infecciones. Las infecciones del tracto
urinario (más del 70%) principalmente cistitis son las más comunes, heridas por infecciones
respiratorias, de heridas, del torrente sanguíneo y del SNC. Así mismo Escherichia coli es un
contaminante de agua potable por lo que se le emplea como un indicador de contaminación fecal
y se determina la potabilización del agua haciendo un recuento de coliformes fecales. De igual
forma especies de Salmonella se pueden contraer vía la ingesta de alimentos, por la cual es
necesario hacer pruebas de detección de Salmonella.

OBJETIVO
1. Que el alumno identifique las características culturales y bioquímicas de las especies más
representativas de la Familia Enterobacteriaceae.
2. Que el alumno aprenda las técnicas de aislamiento, identificación y conservación de los bacilos
entéricos

Las Enterobacteriaceae no forman esporas, algunas producen toxinas y pueden ser encapsuladas y
son organismos catalasa positivos. Son quimioautótrofos, y necesitan para su crecimiento
compuestos simples de carbono y nitrógeno, generalmente sólo con D-glucosa, aunque algunas
requieren aminoácidos y vitaminas. La m a y o r í a d e l a s e s p e c i e s p u e d e n a i s l a r s e
del intestino del hombre y de otros animales,