Practica No.

8
Paola Yoval Colorado.

Universidad veracruzana.
Área académica técnica fac. De química farmacéutica biólogica.
Laboratorio de bioquímica.

Práctica no. 8 cristalización de la albúmina de huevo.

1. Objetivo.

El alumno separará por medio de cristalización una proteína, a partir de huevo.

2. Fundamento.

Las sales neutras ejercen efectos pronunciados sobre la solubilidad de las

proteínas globulares, esta capacidad para influir en la solubilidad de las proteínas
está en función de su fuerza iónica, que constituye una medida, tanto de la
concentración como del número de las cargas eléctricas existentes en los cationes
y los aniones aportados por la sal. A baja concentración, las sales incrementan la
solubilidad de muchas proteínas, fenómeno que recibe el nombre de solubilización
por salado. Las sales de iones divalentes tales como el MgCl2 y el (NH4)2SO4
son más eficaces para la solubilización de las proteínas que las sales de iones
monovalentes tales como el NaCl, NH4Cl y el KCl.

La adición de disolventes orgánicos miscibles en agua, particularmente etanol y

acetona, disminuye la solubilidad de la mayor parte de las proteínas globulares en
el agua, de tal manera que producen su precipitación.

3. Material y reactivos.

 Probeta de 200 mL
 Embudo de filtración
 Varilla de vidrio
 Gasa
 Reactivos
 Ácido acético 1N
 Solución de sulfato de amonio al 50%
 Huevo.
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4. Procedimiento.

se volvio a añadir se juntaron los

Se midieron 10 ml de
clara de huevo.
sulfato de amoniom sobrenadantes y se
para que se volvio añadir la misma
precipitara aun mas y cantodad de sulfato de
se centrifugo amonio. el color cambio
nuevamente a blanco lechoso.

se dejo precipitar por 30 se agito

agitamos la clara y se
min y se centrifugo a espardicamente y se
añadio 0.1 ml de acido 3500 rpm durante 10 refrigero por una
acetico. min. semana.

se filtro con una

gasa, agitando con se midio el filtrado y se al pasar la semana se
añadio la misma filtro el resultado y se
una varilla para cantidad de sulfato de dejo secar, para poder
romper las amonio al 50% pesarlo.
membranas.

5. Resultados.

El peso de los cristales finales fue: 0.9425

Peso del papel filtro. Peso del papel filtro después del filtrado.

Los cristales fueron pequeños y blancos.

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6. Discusión.

En esta práctica se hizo una precipitación de proteínas por la adición de sales a

esta, lo que paso es que a diferentes concentraciones de sales se afectan
diferentes proteínas, debido al aumento de las interacciones hidrofóbicas. La
albumina es una proteína que precipita al añadir una solución de sales saturada
como lo que ocurrió en este caso al saturar con sulfato de amonio.

7. Conclusión.

En conclusión se obtuvieron muy pocos cristales y demasiados pequeños debido a

que la albumina no precipito como se esperaba.

8. Cuestionario.

1. Sugieran métodos de identificación de los cristales obtenidos con

base en el peso molecular.

Espectrometría de masas.

2. ¿Qué es la albúmina?

Se denomina albúmina a una proteína: es decir, a una molécula que se compone

de aminoácidos que forman distintas cadenas lineales. Albúmina alude a una
clase de proteína que se encuentra en el plasma de la sangre, la leche, la clara de
huevo y las semillas de ciertas plantas, entre otros sitios.

3. ¿Por qué se utiliza sulfato de amonio al 50%?

El sulfato de amonio es una de las sales más utilizadas para la precipitación salina
de proteínas. Es muy soluble y el ion sulfato divalente permite alcanzar altas
fuerzas iónicas. Las proteínas en solución son menos solubles cuando se aumenta
la fuerza iónica y esto se puede lograr adicionando sales solubles como el sulfato
de amonio ((NH4)2SO4).

9. Bibliografía.

https://es.scribd.com/doc/15958125/1-PROPIEDADES-QUIMICAS-Y-
FISICOQUIMICAS-DE-LAS-PROTEINAS

CLARK, J.M: Bioquímica Experimental, 1a Ed, Editorial Acribia, Zaragoza, 1966.

RENDINA G. Técnicas de Bioquímica Aplicada. 1974

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Paola Yoval Colorado.
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