1.

REACCIÓN DE BENEDICT

Preparación: Disolver 100 g de Na2CO3, 175 g de citrato de sodio, 17.3 g de CuSO4.5H2O

en un litro de agua destilada.

Esta prueba sirve para el reconocimiento de azúcares reductores.

Se basa en la reducción de Cu2+ a Cu+ en medio básico débil. Aunque es similar a la

reacción de Fehling, el medio básico débil (HNaCO3) y el estabilizante (citrato sódico)
usados hacen que este test sea más sensible y estable.

Procedimiento:

1. Pipetear en un tubo de ensayo 5 ml de reactivo de Benedict

2. Calentar a ebullición.

3. Añadir 1 ml de la solución de azúcar, mezclar bien y se volver a calentar a ebullición.

Si la reacción es positiva aparece un precipitado rojizo, aunque si la cantidad de azúcar es

pequeña puede dar color anaranjado o verdoso.

2. REACCIÓN DE BRAUN

Esta reacción sirve para el reconocimiento de azúcares reductores. Los azúcares reductores
en medio alcalinos pueden reducir el picrato, de color amarillo, a picramato, de color rojo
en medio alcalino (Na2CO3).

Procedimiento:

1. Añadir en un tubo de ensayo:

- Disolución de azúcar 4 ml

- Ácido pícrico saturado 2 ml (OJO, MUY VENENOSO)

- Na2CO3 1M 2 ml
2. Calentar a ebullición.

Si el test es positivo, el color amarillo pasa a rojo.

3. PRUEBA DE BARFOED

La composición del reactivo de Barfoed se prepara mediante el siguiente procedimiento:

Añadiendo 2.5 ml de ácido acético al 38% en agua a 100 ml de acetato cúprico al 6.6% en
agua o se compone de una solución de 0.33 molar de acetato de cobre neutro en una
solución de 1% de ácido acético. No es recomendable guardar el reactivo previamente a su
uso.

Esta prueba sirve para el reconocimiento de monosacáridos. En medio ácido, tan sólo los
monosacáridos son capaces de reducir el Cu2+ a Cu+. El Cu+ así producido reduce al ácido
fosfomolíbdico a un complejo de intenso color azul oscuro.

Procedimiento:

1. Pipetear en un tubo de ensayo:

- Disolución de azúcar 1 ml

- Disolución ácida de cobre 1 ml

2. Calentar a ebullición durante 3 minutos.

3. Enfriar en agua durante 2 min

4. Añadir 1 ml del reactivo de fosfomolibdato.

Si la prueba es positiva aparece un color azul oscuro muy intenso.

4. PRUEBA DEL ESPEJO DE PLATA

Esta prueba sirve para el reconocimiento de monosacáridos. Los monosacáridos son

capaces de reducir, en medio amoniacal, el ión Ag+ a Ago (plata metálica), que se deposita
en las paredes del tubo.

Ag+ + 2 NH3 → Ag (NH3)2+ + R-CHO → Ag0 + R-COONH4

Procedimiento:

1. Añadir en un tubo de ensayo:

- AgNO3 1% 1 ml

- NH3 30% 1 ml

- Disolución de azúcar 1 ml

2. Mezclar bien y se calentar durante 2 minutos.

3. Sacar y dejar reposar.

Si el ensayo es positivo la plata metálica, que precipita, se va depositando en la pared del

tubo formando un espejo (“espejo de plata”).

5. PRUEBA DE SELIVANOFF

Esta prueba es específica para las cetosas. Las cetosas se deshidratan más rápidamente que
las aldosas, dando furfurales. Estos se condensan con el resorcinol produciendo un
complejo coloreado. Si el tiempo de ebullición se prolonga, puede dar también positivo
para otros azúcares.

Preparación: Disolver 0.05 g de resorcina en 100 ml de HCl 3M. Almacenar en oscuridad.

Procedimiento:

1. En un tubo de ensayo pyrex se añadir:

- Reac. Selivanoff (resorcinol/HCl) 1 ml

- Disolución de azúcar 1 ml

2. Hervir durante 1 minuto en el baño a ebullición.

La aparición de un color rojo o un precipitado rojo es indicativa de la presencia de cetosas.