I.

INTRODUCCIÓN

Las técnicas ópticas de medición se utilizan desde hace años para obtener cierta
información de un objeto, teniendo en cuenta la existencia de fenómenos ópticos y las
propiedades que presenta la luz. Los fenómenos ópticos implican la interacción de la luz
con un medio. Al atravesar una muestra el haz luminoso, ocurre la absorción, la
fluorescencia o la dispersión. Las técnicas turbidimétricas constituyen herramientas
muy útiles que satisfacen tales expectativas y que se aplican en las ciencias de la vida.
Los sistemas para la medición de turbidez operan sobre la base de los fenómenos
ópticos que se producen al incidir un haz de luz a través de un medio.

Cuando la radiación electromagnética atraviesa una solución, esta puede ser absorbida
o dispersada; depende de las propiedades de la solución. Cuando la radiación es
dispersada se usan la turbidimetría, que se basa en la medición de la intensidad de la luz
trasmitida como una función de la concentración de la fase dispersa; esta técnica se usa
para determinar la cantidad de material sólido en una suspensión coloidal. En estos
análisis se tiene en cuenta que tan grande son las partículas puesto que se desean medir
aquellas que tienen un tamaño entre 1 y 103 nanómetros; teniéndose que agregar una
solución de etanol-glicerol que ayuda a estabilizar la suspensión y también cloruro de
sodio y ácido clorhídrico en solución para inhibir el crecimiento de microcristales de
BaSO4.

1.1. OBJETIVOS
 Conocer el fundamento de la turbidimetría y sus aplicaciones.
 Determinar sulfatos en muestras acuosas por turbidimetría.

1.2. HIPÒTESIS
 La presencia de partículas suspendidas en medio acuoso desvía la dirección de un
haz de radiación que incide sobre ellas.
 El sulfato precipita en presencia del ion bario enturbiando el medio lo que permite
determinar su concentración por turbidimetría.

2. REVISION DE LITERATURA

Los componentes insolubles presentan problemas para su análisis de concentración en

una solución por medios ópticos. Bajo ciertas condiciones es posible determinar la
concentración de un ion que precipita en su forma de sal a partir de sus propiedades
ópticas.
Tales propiedades de una solución varían de acuerdo a la concentración de la fase dispersa
en la suspensión. Cuando se hace incidir una fuente de radiación electromagnética, como
por ejemplo la luz de una bombilla, la energía radiada a la suspensión es disipada en parte
por absorción, y en parte por reflexión y refracción, mientras que la restante es
transmitida. Mediante la aplicación de la ley de Lambert – Beer es posible determinar el
valor de la concentración de una solución en base a la relación entre la energía emitida
por una fuente y la absorbida por un cuerpo. Es posible medir así con la ayuda de un
espectrofotómetro la relación entre la energía emitida y la energía absorbida por la
muestra mediante la medición de los valores de transmitancia y absorbancia.

La ley de Lambert – Beer establece que:

A = - log (T) = K b C

Donde:
A : Valor de la absorbancia.
T : Valor de la transmitancia.
k : Constante de absortividad.
b : Ancho de la cubeta donde se encuentra la muestra.
C : concentración de la muestra.

De esta forma, como k y b son constantes para diferentes muestras de una misma
sustancia a concentraciones diferentes, es posible establecer que la absorbancia en
función de la concentración debe ser una línea recta que pasa por el origen.
Utilizando este principio es posible con ayuda de un espectrofotómetro determinar el
valor de la concentración de una muestra desconocida a partir de una curva de calibración
de absorbancia en función de la concentración. En el caso de una suspensión, realizar un
análisis de la concentración con ayuda de un espectrofotómetro implica el control de
ciertas variables que pueden alterar los valores de lectura. Cuando
bajo ciertos ángulos se hace incidir una radiación electromagnética,debido a las partículas
en suspensión se producen reflexiones de radiación que afectan y hacen perder un
porcentaje de radiación, y por lo tanto se altera la lectura de transmitancia y absorbancia.
La energía dispersada por la fase dispersa de una suspensión es la base del análisis
nefelométrico. De igual forma la relación de la energía transmitida a través de la fase
dispersa como función de la concentración de esta fase es función del análisis
turbidimétrico.
Es posible de esta forma aplicando la ley de Lambert – Beer determinar la concentración
de la fase dispersa de una suspensión. Un ejemplo de la aplicación de este análisis es la
determinación de la concentración de suspensiones diluidas de sulfato de bario. Debido
a que los valores de energía transmitida y dispersada por la fase dispersa de la suspensión
dependen de la concentración de los iones que se unen para formar el precipitado (en este
caso el sulfato y el bario), las cantidades de las demás sustancias presentes, la temperatura
y la velocidad de la mezcla, se deben controlar.
En el caso de la formación de sulfato de bario a partir de una sustancia sulfatada y cloruro
de bario, la velocidad de reacción depende de la cantidad de cloruro de bario presente.
Para controlar la turbulencia de la suspensión, garantizar la suspensión del sulfato de
bario y minimizar el efecto de otros iones presentes en la solución es necesaria la
utilización de una solución acondicionadora formada por cloruro de sodio, ácido
clorhídrico y una mezcla de glicerol y alcohol isopropílico. La finalidad de esta solución
es controlar el tamaño de los cristales de sulfato de bario, los cuales alteran los valores de
radiación que se desean medir y minimizar el efecto de otros iones con la presencia del
cloruro de sodio y el ácido clorhídrico. Por otra parte la mezcla glicerol-alcohol
isopropílico se utiliza para lograr estabilizar la turbulencia de la mezcla y hacerla
uniforme a lo largo de la cubeta que contiene los iones. Adicionalmente se hace necesario
que el tiempo de mezclado de la solución y de reacción sea el mismo y a una velocidad
igual, para garantizar las mismas condiciones con todas las muestras que se desean
analizar.
  Turbidimetro:
Es un instrumento nefelométrico que mide la
turbidez causada por partículas suspendidas en un
líquido. Haciendo pasar un rayo de luz a través de la
muestra se mide la luz reflejada por las partículas en
un ángulo de 90º con respecto al rayo incidente. Las
lecturas se dan en NTU (Unidades Nefelométricas de
Turbidez).

 Turbidez o Turbiedad:
La falta de transparencia de un líquido debida a la presencia de partículas en
suspensión.

 Sulfatos:
Los sulfatos son las sales o los ésteres del ácido
sulfúrico. Contienen como unidad común un átomo de
azufre en el centro de un tetraedro formado por cuatro
átomos de oxígeno. Las sales de sulfato contienen el
anión 𝑆𝑂42− .

3. MATERIALES Y MÉTODOS

3.1. MATERIALES
Gradilla con 10 tubos de prueba
Pipetas volumétricas de 1, 2, 5 y 10 ml
Pipetas graduadas de 10 ml
Propipetas
Matraz volumétrico o fiolas de 25, 50 y 100 ml
Vaso precipitado de 100
1 piceta con agua destilada

Reactivos:
 Solución madre de 1000 mg/L de sulfatos, SO4-2 L. Pesar 1.4792 g de sulfato de
sodio anhidro, Na2SO4 y diluir con agua destilada en un matraz volumétrico de
1 L.
 Solución acondicionadora de sulfato. Preparación: en un vaso de 500 ml
mezclar en orden: 300 ml de agua destilada con probeta; 30 ml de HCl
concentrada; 100 ml de 2-propanol (alcohol isopropilico); 75 gramos de NaCl y
mezclar bien; finalmente agregar 50 ml de glicerol: agitar y enrazar a 500 ml.
 Cloruro de bario en cristales

Equipos:

 Espectrofotómetro UV-VIS
  Cubetas de cuarzo

3.2. MÉTODOS

ACTIVIDAD 1
Calibración el equipo según instrucciones del manual del equipo e indicaciones del
profesor.

ACTIVIDAD 2.
Preparar 100 ml de cada uno de los estándares según datos de la siguiente tabla.
Calcular el volumen de solución madre de 1000 ppm de sulfato para preparar 100
ml de solución estándar según tabla 1. Enrazar con agua destilada.

Tabla 1. Preparación de soluciones estándar: 5, 10, 20, 40 y 80 ppm de SO4-2

ppmSO4-2 Blanco 5 ppm 10 ppm 20 ppm 40 ppm 80 ppm
a preparar
Volumen a 100 ml 100 ml 100 ml 100 ml 100 ml 100 ml
preparar
Vol. 1000 0.0 ml
ppm SO4-2
A tomar
ml de agua 100
destilada

Tabla 2. Generación de precipitado de BaSO4 (Ba+2 + SO4-2) de los estándares

Usar tubos de prueba de 15 ml en gradillas
Vol. De cada 10 ml 10 ml 10 ml 10 ml 10 ml 10 ml
estándar a tomar
Ml de solucion 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml
acondicionadora
Cristales de 1 pizca 1 pizca 1 pizca 1 pizca 1 pizca 1
BaCL2 pizca

Mezcla En vortex En vortex En vortex En vortex En En

10 seg 10 seg 10 seg 10 seg vortex vortex
10 seg 10 seg

ACTIVIDAD 3. Generación de precipitado en muestras de agua

Asegurarse que las muestras no tengan concentraciones mayores a 80 ppm de sulfatos que es
el máximo estándar. Si se excediera deberá diluirse hasta que se encuentre en el rango de
concentración del estándar.

Muestra 1 Muestra 2

Rept. 1 Rept. 1 Rept. 1 Rept. 1

 ml de muestra 10 ml 10 ml 10 ml 10 ml
de o dilución de
muestra
ml de solución 1ml 1 ml 1 ml 1 ml
acondicionadora
Factor de
dilución si se
realizo
Cristales de sal 1 pizca 1 pizca 1 pizca 1 pizca
de BaCl2
Mezcla En vortex En vortex En vortex En vortex
10 seg 10 seg 10 seg 10 seg

4. LECTURA DE TRANSMITANCIA O DISPERSIÓN DE RADIACIÓN CON EL

EQUIPO DESIGNADO

4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Resultados de lectura de turbidez/transmitancia de estándares. (Grupo miércoles de 11-1pm)

Ppm de 0.0 5ppm 10ppm 20ppm 40ppm 80ppm

SO42-
Turbidez del 100 78.5 62.1 36.7 18.2
nefelómetro
T%
Lectura de 0.0 0.105 0.207 0.435 0.740
pT= -log T
del
turbidimetro

X=concentración Y=-log T

Curva de calibración Y=0.009295X+0.01855

Y=mx+b

r=0.996 r2 =0.992
 0.9

0.8

0.7

0.6

0.5
-logT

0.4

0.3

0.2

0.1

0
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Concentracion ppm

Muestra La molina Agua cielo

Transmitancia 0.704 0.982
Turbidez o –logT 0.15243 0.00789
Ppm SO4-2 en la dilución 14.403 -1.147
Factor de dilución 5 10
Ppm SO4-2 en la muestra 72.015 -11.147

Resultados de lectura de turbidez/transmitancia de estándares. (Grupo Viernes de 2-4pm)

Ppm de 0.0 5ppm 10ppm 20ppm 40ppm 80ppm

SO42-
Turbidez del 1 0.703 0.713 0.542 0.522 -
nefelómetro
T
Lectura de 0.0 0.153 0.147 0.266 0.492 -
pT= -log T
del
turbidimetro

X=concentración Y=-log T

Curva de calibración Y=0.011365X- 0.041125

Y=mx+b

r=0.9819 r2 =0.9641
 0.6

0.5

0.4
-logT

0.3

0.2

0.1

0
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45
concentacion ppm

Prueba F para la transmitancia entre los 2 grupos

Error de comparación de promedios

Ho=x1-x2=0

Hi=x1-x2≠0
0.696−0.541
Texp: 0.2698/1.5811 =0.9083

Ttab: (8,95%) = 2.306

Texp < Ttab

Cumple la prueba Ho es decir que los promedios son homogéneos ahora se realiza la prueba F donde se verifica si hay
homogeneidad de varianzas y si los dos grupos están iguales

PRUEBA F
0.192𝑋0.192
Fexp: = 0.3385
0.33𝑋0.33

Ftab: (4,4,95%) = 6.39

Fexp < Ftab

Se cumple la homogeneidad de varianza es decir que la transmitancias usadas las dos

dan una respuesta cercana.
Discusiones

 Según Gary 2009, es una prueba diseñada para indicar si hay una diferencia
significativa entre dos métodos con base en sus desviaciones estándar. F se define en
términos de las varianzas de los dos métodos, donde la varianza es el cuadrado de la
desviación estándar. En nuestra experiencia comparamos no dos métodos, sino
comparamos los resultados de laboratorios diferentes, y nuestra prueba con un F exp de
0.3385 y en F tab de 6.39 cumple con nuestra hipótesis planteada, o sea podemos
afirmas que existen evidencia estadística para afirmar que no existen diferencias
significativas entre las varianzas de ambos laboratorios.

 En la determinación de la curva de calibración, nuestro estándar de concentración 5

ppm mostró un resultado que no se adecuaba a los valores esperados, por ello este valor
no fue tomado en cuenta y asumimos que ocurrió un error sistemático.

 Según ECA de agua decreto supremo n 004-2017 MINAM, la concentración máxima de

sulfatos en aguas superficiales destinadas a la producción de agua potable es de 250
ppm. En la primera muestra de agua de la molina, nuestro resultado fue de 72.105 ppm,
lo cual está dentro del rango permitido y nos muestra una concentración baja de
sulfatos. En la segunda muestra de agua cielo, nuestro resultado fue de -11.147. Cuando
obtenemos una absorbancia negativa, significa que la solución utilizada como estándar
tiene una concentración de analito mayor a la concentración de analito en la muestra. En
este caso podemos utilizar una solución estándar con una concentración menor o diluir
menos la muestra.

5. CONCLUSIONES

 La turbidez del agua cielo fue de 0.00789 y del agua de la molina fue de 0.15243.
 La turbidimetría es una técnica que se sustenta básicamente en los fenómenos ópticos
que ocurren durante el paso de un haz de luz a través de un medio.
 No existe diferencia significativa en las transmitancias de las muestras.

6. RECOMENDACIONES

 Desarrollar la practica con los lineamientos establecidos en el manual de

gestión de residuos de laboratorio y lo estipulado en las normas ISO 14001,
con la finalidad de cumplir con un procedimiento ecoeficiente, reciclaje,
segregación y disposición correspondiente.

 Usar los elementos de seguridad de salud personal.

7. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
- Química analítica moderna - Página 276. W. F. Pickering – 1980
- Métodos ópticos de análisis - Página 491. Eugene D. Olsen – 1990

8. ANEXOS
9. CUESTIONARIO DE PREGUNTAS
 3. ¿Cuáles son las técnicas ópticas llamadas espectroscópicas y las no espectroscópicas y
en que se diferencian?

Estos métodos emplean técnicas que se dividen en técnicas espectroscópicas y en técnicas no

espectroscópicas.
Las técnicas espectroscópicas son aquellas en las que el analito sufre procesos
de absorción, emisión o luminiscencia. El resto corresponde a técnicas no espectroscópicas.
Las técnicas espectroscópicas se diferencian también según la forma en la que se encuentra el
analito en el momento en el que sufre el proceso espectroscópico, dando lugar a
la espectroscopia atómica y a la espectroscopia molecular.
Según el rango de energía que presente la radiación electromagnética existen diferentes
técnicas, por ejemplo, espectroscopia de infrarrojo, espectroscopia de resonancia magnética
nuclear, etcétera.
Las técnicas no espectroscópicas aprovechan diferentes propiedades de la radiación
electromagnética, como el índice de refracción o la dispersión.

4.-Si se desea preparar 100mL de soluciones estándar de 5, 10, 20,40 y 80 ppm de

sulfatos Que volumen de solución madre de 1000ppm se requerirá en cada caso y
cuantos mL de diluyente agua se aumentara?

Ppm Blanco 5 ppm 10 ppm 20 ppm 40 ppm 80 ppm

estándar a
preparar
mL de 0.0mL 0.2mL 1mL 2mL 4mL 8mL
1000 pm
SO4-2
mL de 100 mL 99.8mL 99mL 98mL 96mL 92mL
agua
destilada
Volumen 100 mL 100 mL 100 mL 100 mL 100 mL 100 mL
final

5.- En una determinación espectrofométrica se encontró la siguiente información de

lecturas de absorbancia y concentración de P en g/L estándar y muestra. La
absorbancia de una dilución de 5 en 50ml de muestra dio una absorbancia de 0.137.
¿Cuál es la concentración del analito en la muestra original en g/L?

P (g/L) 2.13 4.26 6.40 8.53 X g/L

Absorbancia 0.048 0.110 0.173 0.230 0.137

[0]𝑔
𝐴 =𝑚 +𝑖
𝐿
 [0]𝑔
𝐴 = 0.029 − 0.012 ; 𝑅 = 0.9995
𝐿
𝑆𝑖: 𝐴 = 0.137
𝑅𝑒𝑒𝑚𝑝𝑙𝑎𝑧𝑎𝑛𝑑𝑜 ∶
0.029[0]𝑔
0.137 = − 0.012
𝐿
[0]𝑔 𝑔
= 5.138
𝐿 𝐿

𝐶1 × 𝑉1 = 𝐶2 × 𝑉2
𝑔
𝐶1 × 5 𝑚𝐿 = 5.138 × 50 𝑚𝐿
𝑙
𝐶1 = 51.35 𝑔/𝐿

6.- ¿Cuál es la diferencia entre turbidez y opacidad?

La turbidez es una descripción de la trasparencia del agua, o en otras palabras, de su

claridad. En términos sencillos es una medida de su “enlodamiento” o “enturbiamiento”.
En términos más precisos, es una expresión de las propiedades ópticas del agua que
provoca la dispersión y absorción de la luz en la misma. El aumento de la turbidez cambia
la dirección de la luz no dejando que se transmita a través del agua en línea recta hacia el
lecho. Si la turbidez es baja, la luz no cambiará de dirección. Si la turbidez es alta, la luz se
dispersará iluminando las partículas que hay en el agua de forma muy parecida a cómo un
rayo de luz del sol ilumina las partículas de polvo que hay en el aire. La regla general es que
cuanto menos clara esté el agua, mayor será su turbidez.

La opacidad, referida al aire que nos rodea, es lo contrario a la visibilidad. Se dice que la
atmósfera está opaca cuando, como consecuencia de la cantidad de partículas sólidas en
suspensión que contiene, dificulta la visibilidad clara y definida de los objetos más o menos
distantes.

La opacidad cumple el mismo rol que la turbidez pero en este caso la matriz es aire, no
agua. El agua está turbio y análogamente el aire está opaco.

7.- ¿Qué es un opacímetro?

En el sector automovilístico se entiende por opacímetro un aparato para el control de los gases
emitidos por los vehículos equipados con motor Diesel.

El opacímetro permite valorar la cantidad de hidrocarburos sin quemar (gas-oil) y, por tanto,
deducir la eficacia de la bomba de inyección. (*Analizador de los gases de escape,
*Contaminación.)