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Método de flotación con sulfato de zinc

Es una técnica que permite identificar elementos parasitarios del resto de los
materiales contenidos en heces.

La concentración de parásitos por flotación en muestras fecales permite comprobar la

existencia de quistes de protozoos, huevos o larvas de helmintos, aun cuando estén
presentes en pequeñas cantidades.

Esta técnica se basa en la propiedad que tienen las soluciones de densidad mayor, para
hacer flotar objetos menos densos, como los huevos y quistes de parásitos, los cuales
son colectados en la superficie del líquido y observados al microscopio.

La técnica de concentración con sulfato de zinc proporciona una suspensión de

parásitos muy limpia y es muy Buena para la recuperación de quistes de protozoarios y
de la mayoría de los huevos de helmintos. Aunque no es muy usada en forma rutinaria,
por su sencillez se puede utilizarse en encuestas.

El método de Faust, con ZnSO

Es uno de los más utilizados, aunque es poco eficaz para huevos pesados como los de
Trematodos o como los huevos no-fértiles de Ascaris. Tampoco es muy efectivo para
muestras de heces ricas en grasas. Este método puede realizarse en muestras
recientes, refrigeradas o fijadas con formol (5% ó 10%).

Las técnicas de flotación permiten la separación de quistes de protozoos y huevos de

ciertos helmintos del exceso de residuos mediante el uso de soluciones con elevada
gravedad específica. Los elementos parasitarios son recuperados de la capa superficial
y los residuos se mantienen en el fondo del tubo. Con estas técnicas los preparados
son más limpios que los obtenidos por sedimentación. Sin embargo, algunos huevos
(como los operculados, o los densos como los estériles de Ascaris lumbricoides no se
concentran bien en las flotaciones; en estos casos se recomienda el uso de técnicas de
sedimentación.

Los resultados se mejoran en la separación de los parásitos, basados en la diferencia

del peso específico entre los huevos de helmintos, larvas y quistes de protozoos y la

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solución utilizada (cuya densidad oscila entre 1.18 y 1.20) por lo que los huevos
de los Nematodos flotan.(Los de los Trematodos, y Cestodos Pseudofilineos, no).

Una de las maneras de diagnosticar las parasitosis de localización gastrointestinal y

glándulas anexas, es mediante la aplicación de técnicas coproparasitológicas de
enriquecimiento (de sedimentación y flotación), que permiten concentrar huevos,
quistes y larvas en el menor volumen de materia fecal, determinar su presencia e
identificarlos correctamente.

FUNDAMENTO

Este método utiliza una solución con una densidad mayor al agua que se mezcla con
las heces de tal manera que se separen los elementos parasitarios del resto de la
materia fecal.

TECNICA

Este método utiliza una solución de Zn2SO4 con una densidad de 1.180 Baumer, que
permite salir a flote los huevecillos, quistes o larvas de los parásitos.

PROCEDIMIENTOS

• 1 Mezclar de manera homogénea de 1 a 2 gr de materia fecal en 10ml de agua

destilada.

• 2 Filtrar la suspensión a través de un colador o una gasa, en un recipiente

limpio.

• 3 Colocar en un tubo de ensayo la muestra filtrada y centrifugada a 2500 rpm

por 1min.

• 4 Decantar el líquido sobrenadante y completar con agua y centrifugar.

• 5 Se repite el proceso hasta que el sobrenadante se muestre limpio.

• 6 Se decanta nuevamente el sobrenadante y se iguala el volumen con solución

de 2n2SO4, se mezcla bien y se centrifuga a 1500 rpm durante 3min.

• 7 Colocar el tubo con cuidado en una gradilla y con una asa se toma una
muestra de sobrenadante y se coloca en un portaobjeto.

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•8 Se añade una gota de lugol y se coloca el cubre objeto, se observa al

microscopio.

VENTAJAS

• Método sencillo

• No se requiere mucho tiempo para su realización

• Se recuperan estructuras parasitarias como huevo, larvas o quistes.

DESVENTAJA

• Poco eficaz para especies como Ascaris, Taenia, Fasciola.

• El contacto prolongado con el 2n2SO4 puede deformar los quistes.

MÉTODO DE CONCENTRACIÓN POR FLOTACIÓN CON CENTRIFUGACIÓN EN UNA

SOLUCIÓN DE AZÚCAR (TÉCNICA DE SHEATHER)

a. Usos:

Esta técnica es apropiada para la observación y registro de ooquistes de Isospora,

Cryptosporidium, Cyclospora y Sarcocystis.

b. Fundamento:

Se basa en la flotación de quistes, ooquistes y huevos de parásitos en una solución de

azúcar que posee mayor densidad que ellos. Esta técnica es útil para la concentración
de quistes y ooquistes de protozoos y huevos de helmintos y se usa como método

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preferencial en el diagnóstico de los coccidios: Cryptosporidium, Cyclospora,

Isospora, etc.

c. Procedimiento:

1. Homogeneizar 1 a 2 g de materia fecal en suero fisiológico.

2. Colocar un embudo de vidrio con una gasa doblada en la abertura del tubo de
ensayo y filtrar el material homogeneizado.
3. Centrifugar el tubo con el material homogeneizado a 1 500 r.p.m. durante 2 a 5
minutos.
4. Eliminar el sobrenadante, y agregar la solución de azúcar (sacarosa 500 gr, agua
destilada 320 ml y fenol 6 gr) hasta 1 cm del borde del tubo, agitar hasta disolver el
sedimento, centrifugar como en el paso anterior, completar con la solución de
azúcar hasta el borde y esperar de 2 a 5 minutos la formación de un menisco.

Con la ayuda del asa de platino, tomar una muestra de la superficie del menisco y
colocarla en una lámina portaobjeto, agregar lugol, cubrir con una laminilla y observar
al microscopio. En el caso de observar coccidios, de la superficie del preparado, tomar
con la asa de platino o con una pinza curva, una muestra para preparar un frotis para
teñir por el método de Ziehl-Neelsen modificado.

BIBLIOGRAFIA

• Bartlett MS, Harper K, Smith N, Verbanac P & Smith JW. Comparative

evaluation of a modified zinc sulfate flotation technique. J Clin Microbiol 1978;
7:524-528.

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